Выделение и структурно-функциональные свойства сексстероидсвязывающего глобулина крови человека

• Автор: Сурвило, Леонид Иосифович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Минск
• Количество страниц: 148 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 3
Глава I. БЕЛКИ МАЕМЫ КРОВИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ ПОЛОВЫЕ СТЕРОИДНЫЕ ГОРМОНЫ Обзор литературы . 7

1.1. Основные свойства сексстероидсвязывакнцего глобулина

ССГ в составе плазмы крови 7

1.2. Ввделение и очистка ССГ

1.3. Физикохимические свойства ССГ

1.4. Краткие сведения о неспецифических стероидсвязывающих белках сыворотки крови .

1.5. Физиологическая роль ССГ .

Глава II. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА ССГ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

.1. Выделение ССГ с помощью аффинной хроматографии

на ДГТсефарозе .
.2. Выделение ССГ с помощью аффинной хроматографии на иммобилизованном кортизоле
.3. Очистка ССГ.
Глава III. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ССГ.
1.1. Электрофоретические и гидродинамические свойства ССГ
1.2. Стероидсвязывающие свойства ССГ .
1.3. Спектральные свойства ССГ .
1.4. Химические свойства ССГ .
Глава 1У. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ССГ С ПЛАЗМАТИЧЕСКИМИ МЕМБРАНАМИ
КЛЕТОК ДЕВДДУАЛЬНОЙ ТКАНИ ЧЕЛОВЕКА.
Глава У. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ . I0II3I
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Используя такие матрицы, авторы работы II определили связывающую способность сыворотки крови женщин равную в норме 2,6 мкг ДГТЮО ж сыворотки, а при беременности 6, мкг ДГТЮО мл сыворотки. Используя данный подход, авторы работы определили концентрацию ССГ в плазме крови мужчин и
кенщин, которая составила ,4 нмоль и ,1 нмоль, соответственно. Вывод о возрастании связывающей способности сыворотки крови человека при беременности и эстрогенной терапии сделан также в работах . В таблице I представлена совокупность данных по связывающей способности сыворотки крови человека при различных физиологических состояниях организма. Связывающая способность сыворотки крови человека по отношению к половым стероидным гормонам при различных физиологических состояниях организма. Данные о распределении ССГ у млекопитающих фрагментарны и в некоторых случаях противоречивы. Мурфи обнаружила тестостеронсвязывакщие свойства у сыворотки крови коровы, но не обнаружила их у сывороток крови крысы, кролика и собаки. ССГ у обезьян , коров, овец, слонов, собак, львов, кроликов, кенгуру. У свиней, верблвдов, ослов, крыс и мышей ССГ, по данным Вена, отсутствует. По данным работы ССГ отсутствует у крыс, морских свинок, хомяков, собак и котов. В крови коров, овец и кроликов I присутствует. В работе было показано, что у крыссамцов ССГ появляется только в шестинедельном возрасте. В крови крыссамок ССГ отсутствует в возрасте 5 дня. Возможно, данный факт объясняет то, что некоторые исследователи не обнаружили ССГ в сыворотке крови крысы. В ранних работах была изучена специфичность цельной плазмы крови человека и фракции глобулинов по отношению к половым стероидным гормонам. Стино 6 нашел, что эстрон замещает тестостерон в связывающем центре белка, в то время как эстриол, добавленный в равных количествах в бесстероидную плазму крови человека не оказывает такого действия. В работе было показано, что кортизол, прогестерон, эпитестостерон и Дандростерон не конкурировали с тестостероном за связывающий центр ССГ сыворотки крови человека. Напротив, екметилтестостерон обладал таким же сродством к белку, как и тестостерон, а эстрадиол был лишь несколько менее конкурентноспособен, чем последний. Рознер , используя плазму крови человека, показал, что эстрон, эстрадиол, дегидроэпиандростерон, андростерон, к оксипрогестерон и нортестостерон конкурируют с тестостероном за активный центр молекулы ССГ. Авторы работы использовали фракцию У по Кону сыворотки крови человека после е хроматографии на целлюлозе и сефадексе 0. Методом равновесного диализа было установлено, что связывающий центр молекулы ССГ один и тот же для тестостерона и эстрадиола. М и 1,7 М, соответ
ственно. Впоследствии эти же авторы , также используя фракцию 1У по Кону сыворотки крови человека, привели значения констант ассоциации Ка для тестостерона 1,2ГО9 М1 и эстрадиола 0,59 М1. Другие авторы получили более низкие значения Ка ССГ с данными гормонами 4,5Ю8 М1 и 0,4Ю8 М1 для тестостерона и эстрадиола, соответственно. В работе было показано, что тестостерон, 3 ,,6 диокси5сандростан, Зс Д7сдиокси5оСандростан, 33 ,3 диоксиандрост5ен, Иск метил3 оксиандрост1,4диенЗон связываются ССГ примерно одинаково сильно. Слабее связывались Зуб окси5с андростанон, и 3к окси5С андростанон. Наконец, к оксиандрост4енЗон, Ьб,ЗуЗ диоксиандрост5ен, Зубоксиандрост5енон и Зубокси5гандростанон связывались слабо. В таблице 2 приведена стероидная специфичность ССГ человека на основании данных ряда работ , , . Авторы работы показали, что с ростом температуры Ка ССГ с тестостероном заметно уменьшается. Так, при 4 Ка3,19 М, при Ка1,2Ю9 М1, при Ка0,79 М. Аналогичную закономерность обнаружили и другие исследователи . Используя цельную плазму и частично очищенные препараты ССГ человека и кролика отдельные группы исследователей изучили некоторые физикохимические свойства данных белков. Так, в работах гельфильтрацией оценили кажущуюся молекулярную массу ССГ человека, которая оказалась равной 0 00 ООО. Корвел с помощью электрофореза в полиакриламидном геле ПААТ вычислил молекулярную массу ССГ человека, которая составила ООО. Значение ООО было получено равновесным ультрацентрифугированием .