Идентификация и исследование антиадгезионного фактора из крови млекопитающих

• Автор: Швыркова, Ирина Геннадиевна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 189 с. : ил.

Введение
1. Идентификация в сыворотке крови млекопитающих белка, проявляющего антиадгезионную активность.
2. Изучение действия ингибиторов на открепление клеток от субстрата, вызванное добавлением к культуре клеток плазмина или плазминогена.
3. Исследование зависимости индуцируемого плазминогеном плазмином открепления клеток от субстрата от времени инкубации, температуры и концентрации плазминогена в культуральной среде. i
4. Сравнение антиадгезионных эффектов, вызываемых плазминогенами из сыворотки крови различных млекопитающих.

5. Изучение процесса автолиза плазминогенов разных видов млекопитающих.

6. Исследование протеолитической специфичности плазмина по отношению к адгезионным белкам

IV. Экспериментальная часть

1. Приборы и материалы.

2. Методы
V. Выводы
VI. Список литературы
Введение


Эта модель была подтверждена иммунохимическими исследованиями отдельных областей базальных мембран различных тканей с использованием антител к коллагену IV типа, ламинину и гепарансульфатпротеогликану . IV типа в трехмерную сетевую структуру ,. Комплексы ламинина, нидогена и гепарансульфатпротеогликана были обнаружены в базальной мембране методом иммуноэлектронной микроскопии . Модель полимеризации, которая в настоящее время является общепринятой, объединила положения этих двух моделей ,,. В соответствии с этой моделью основу базальной мембраны составляют смешанные полимеры ламинина, коллагена IV типа и гепарансульфатпротеогликана. С помощью молекул нидогена, которые играют роль соединительных мостиков, гетерополимеры ламинина, коллагена IV типа и гепарансульфатпротеогликана объединяются в трехмерную сетевую структуру. В процессе формирования базальной мембраны коллаген ГУ типа спонтанно агрегирует, образуя упорядоченную сеть. Ламинин также способен к самоагрегации, причем первоначально образуются небольшие олигомеры ламинина, которые объединяются в более крупные полимерные структуры только в присутствии ионов Са2 и при достаточной концентрации ламинина Полимеры ламинина могут взаимодействовать с димерами или тримерами гепарансульфатпротеогликана. Полимеры ламинина в упорядоченном комплексе с гепарансульфатпротеогликаном либо связываются с сетью молекул коллагена IV типа, либо образуют независимую сеть рис. З. Нидоген участвует как в соединении полимерной сети ламинина с сетью молекул коллагена IV типа, так и в объединении гетерополимеров ламинина, коллагена IV типа и гепарансульфатпротеогликана Какой именно механизм формирования базальной мембраны будет реализован, зависит, в частности, от набора и концентрации компонентов матрикса, синтезируемых и секретируемых клетками на данном участке ,. В состав базальных мембран, синтезируемых фибробластами, входит фибронектин. Молекулы фибронектина собираются в микрофибриллы, которые образуют независимую полимерную сеть ,,. IV типа и гепарансульфатпротеогликана ,. Рис. Схема формирования базальной мембраны ,. Интерстициальной стромой называют межклеточный матрикс соединительной ткани. Интерстициальная строма содержит коллагены I, Ш, IV, V, V типов, эластин, гликопротеины фибронектин, тромбоспондин, остеонектин , ВМ, гликозаминогликаны дерматансульфат, хондроитинсулъфат, кератансульфат, гиалуроновую кислоту и протеоглюсаны. Молекулы коллагена IV типа образуют в интерстициальной строме так называемые соединяющие плашки структуры, подобные участкам базальной мембраны, соединенные фибриллами, состоящими из димеров коллагена VII типа рис. При этом димеры коллагена VII типа связываются с коллагеном IV типа в базальной мембране с одной стороны и с коллагеном IV типа в соединяющих плашках в интерстициальной строме с другой стороны . Рис. Схематическое изображение структуры межклеточного матрикса в базальной мембране и интерстициальной строме . Промежуточный матрикс эпителия и гладкой мускулатуры подобно интерстициальной строме представляет собой ячеистую структуру. Фибриллы, состоящие из коллагенов I, Ш, V и VI типов и эластина, погружены в аморфное вещество, содержащее гликозаминогликаны хондроитинсульфат и дерматансульфат, протеогликаны хондроитинсульфатпротеогликан и дерматансульфатпротеогликан и гликопротеины фибронектин, тромбоспондин, остеонекгин , ВМ. В состав промежуточного матрикса гладкой мускулатуры входят также витронектин и фактор фон Виллебранда . Относительные количества различных макромолекул и способы их организации в матриксе сильно отличаются в зависимости от вида ткани табл. Хотя коллаген входит в состав межклеточного матрикса всех тканей организма, каждый вид матрикса характеризуется определенными типами коллагена. Коллаген IV типа обнаружен только в базальной мембране и интерстициальной строме, коллаген I типа в интерстициальной строме, сухожилиях, костях, коллаген П типа в хрящевом матриксе, межпозвоночных дисках и стекловидном теле глаза. Количественное соотношение коллагенов определенных типов может изменяться в процессе развития организма . Таблица 1. Состав разных видов межклеточного матрикса ,.