Новые методы определения биологически активных соединений, основанные на иммунохимических реакциях на поверхности пьезокварцевых сенсоров

• Автор: Дергунова, Елена Сергеевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 117 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные способы определения эндокринных

деструкторов в объектах окружающей среды

1.2. Методы формирования биочувствительного покрытия

пьезокварцевого иммуносенсора.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Характеристика объектов исследования, химических

реагентов, биополимеров и иммунореагентов.

2.2. Приборы и вспомогательное оборудование

2.3. Подготовка проб для анализа объектов окружающей среды,
лекарственных препаратов, полимерных материалов и средств гигиены.
2.4. Синтез гаптенбелковых конъюгатов для определения
линейных алкилбензолсульфонатов.
2.5. Определение константы аффинности
3. ИССЛЕДОВАНИЕ УСЛОВИЙ ПОЛУЧЕНИЯ РЕЦЕПТОРНОГО
СЛОЯ НА ПОВЕРХНОСТИ ЭЛЕКТРОДОВ
ИММУНОСЕНСОРОВ.
3.1 Ковалентная иммобилизация рецепторных молекул.
3.2. Фотоиммобилизация рецепторных молекул.
4 ОЦЕНКА АФФИННОСТИ И СПЕЦИФИЧНОСТИ
ИММУНОРЕАГЕНТОВ
4.1. Кинетические исследования иммунохимического
взаимодействия антигенантитело.
4.2. Оценка специфичности иммунореагентов
5. ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ГРОТОЧНОИНЖЕКЦИОННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
5.1. Сравнение форматов иммунохимического анализа.
5.2. Влияние концентрации иммунореагентов на полноту протекания иммунохимических реакций.
5.3. Влияние скорости, природы и буферного раствораносителя на величину аналитического сигнала
5.4. Влияние природы регенерирующего раствора на воспроизводимость аналитического сигнала
6. ПРИМЕНЕНИЕ ПЬЕЗОКВАРЦЕВЫХ ИММУНОСЕНСОРОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
6.1. Определение нонилфенола в водных средах
6.2. Определение бисфенола А в жидких средах
6.3. Определение линейных алкилбензолсульфоиатов в жидких
средах.
6.4. Определение 4аминофенола в фармацевтических формах
6.5. Определение котинина в биологических пробах
ВЫВОДЫ.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ
ЛИТЕРАТУРЫ.
ПРИЛОЖЕНИЕ.
ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность


Установлены закономерности иммунохимической реакции, протекающей на поверхности сенсора, позволяющие прогнозировать пути оптимизации условий проточноинжекционного определения нонилфенола, бисфенола А, линейных алкилбензолсульфонатов, 4аминофенола и котинина в сложи IX по составу смесях с применением пьезокварцевого сенсора. Оценено влияние различных форматов иммунохимического анализа конкурентный, анализ с утяжелением массы на аналитический сигнал пьезокварцевого иммуносенсора. Установлены количественные взаимосвязи чувствительности определения фенолов А с величинами электронных эффектов заместителя в их молекулах, имеющие прогнозирующие функции. Выявлены основные факторы, влияющие на оперативные характеристики пьезокварцевых сенсоров при проточноинжекционном определ знии БАВ в жидких средах. Показана возможность конкурентного определения следовых концентрации эндокринных ядов, 4аминофенола в жидких средах на уровне нгмл. Практическая значимость. Разработаны методики высокочувствительного и селективного проточноинжекционного определения следовых концентраций эндокринных ядов, 4аминофенола, котинина в жидких средах. Методика определения нонилфенола в жидких средах защищена патентом РФ Патент 0. Показана возможность применения пьезокварцевого иммуносенсора для экспрессного определения следовых концентраций эндокринных ядов в объектах окружающей среды, 4аминофенола в фармацевтических препаратах и котинина в биологических жидкостях. Результаты исследований и выбора способов формирования биорецепторных покрытий пьезокварцевых иммуносенсоров, предназначенных для определения нонилфенола, бисфенола А, линейных алкилбензолсульфонатов. Результаты изучения закономерностей иммунохимических реакций антигенантитело, протекающих на поверхности пьезокварцевого сенсора и лежащих в основе определения биологически активных веществ в жидких средах. Результаты исследования условий проточноинжекционного определения биологически активных веществ и факторы, обеспечивающие оптимальные оперативные характеристики пьезокварцевых сенсоров. Методики проточноинжекционного определения следовых концентраций эндокринных ядов в объектах окружающей среды, 4аминофенола в фармацевтических препаратах, котинина в биологических жидкостях. Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на конференции студентов, аспирантов и молодых ученых Актуальные проблемы современного естествознания Иваново, XII научнопрактической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов Наша общая окружающая среда Липецк, IV Всероссийской конференции молодых ученых Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии Саратов, XVII Менделеевском съезде по общей и прикладной химии Казань, I Международном форуме Аналитика и аналитики Воронеж, Всероссийской конференции по аналитической химии Аналитика России Москва, Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых Ломоносов Москва, II Международном симпозиуме Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии Краснодар, Всероссийской студенческой научнотехнической школе конференции Инженерные науки защите окружающей среды Тула, Ii i i I Москва, V1 Всероссийской конференции по анализу объектов окружающей среды с международным участием Экоаналитика Самара, Всероссийской конференции Фагран Воронеж, . Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 3 статьях, тезисах докладов, 1 патенте РФ на изобретение. Структура работы. Диссертационная работа изложена на П9 страницах машинописного текста, включает рисунков и таблиц. Состоит из введения, 6 глав, выводов и списка использованных библиографических источников, включающего ссылок на отечественные и зарубежные работы. Минобрнауки РФ тема Физикохимические основы формирования и функционирования биосенсорных систем для определения физиологически активных веществ, регионального гранта РФФИ Новые методы определения биологически активных соединений, основанные на иммунохимических реакциях на поверхности пьезокварцевых сенсоров грант 9рцентра, стипендии Президента РФ.