Применение пьезокварцевых иммуносенсоров для проточно-инжекционного определения биологически активных соединений

• Автор: Мелихова, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Липецк
• Количество страниц: 125 с.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

I. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ МЕТОДОМ ПРОТОЧНО

ИНЖЕКЦИОННОГО АНАЛИЗА.

I. 1. Характеристика детекторов, применяемых

в проточно инжекционном анализе

I.2. Пьезокварцевые иммуносснсоры для определения

биологически активных соединений в жидких средах

И. ЭКСЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

II. 1. Характеристика объектов исследования, химических

реагентов, биополимеров и иммунореагентов.

II. 2. Установка для проточно инжекционного анализа.
II. 3. Пробоподготовка образцов пищевых продуктов
и объектов окружающей среды
III. ИССЛЕДОВАНИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТЕЙ ИММУНОХЙМИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ НА
ПОВЕРХНОСТИ ПЬЕЗОКВАРЦЕВЫХ ИММУНОСЕНСОРОВ.
III. 1. Изучение взаимодействия антител с биорецепторным
покрытием на основе иммунореагентов.
III. 1.1. Влияние способа иммобилизации
на качество биорецепторного покрытия
и оперативные характеристики иммуносенсора
III. 1. 2. Влияние массы биослоя на величину
аналитического сигнала
III. 2. Кинетические исследования иммунохимических
реакций антигенантитело .
III. 3. Влияние концентрации иммунореагентов на полноту
протекания иммунохимических реакций
III. 4. Исследование специфичности иммунореагентов
III. 5. Изучение влияния условий проточноинжекционного
анализа на величину аналитического сигнала сенсора.
III. 5.1. Влияние скорости, природы и
буферного раствора носителя на величину
аналитического сигнала иммуносенсора.
III. 5. 2. Влияние природы регенерирующего раствора на воспроизводимость аналитического
сигнала
IV. ПРИМЕНЕНИЕ ПЬЕЗОКВАРЦЕВЫХ ИММУНОСЕНСОРОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДШ4ЕНИЙ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ И
БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ
IV. 1. Особенности применения пьезокварцевых иммуносенсоров
для проточноинжекционного определения сульфопреиаратов
и салицилатов в жидких средах
IV. 2. Методика определения сульфаметоксазола
в объектах окружающей среды
IV. 3. Методика определения сульфаметоксазола
в пищевых продуктах
IV. 4. Методика определения сульфаметоксазола
в фармацевтических формах
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Изучено влияние режима проточноинжекционного анализа на величину аналитического сигнала сенсора и определены оптимальные параметры скорость потока, природа и раствора носителя, природа и концентрация регенерирующего раствора, обеспечивающие высокую чувствительность определения биологически активных веществ. Практическая значимость. Предложены новые эффективные биорецспторные покрытия пьезокварцевых иммуносенсоров для определения микроколичеств сульфопрепаратов и салицилатов в жидких средах. Предложен алгоритм выполнения проточноинжекционного анализа жидких сред, включающий регистрацию аналитического сигнала сенсора и регенерацию его биорецепторного покрытия. Разработаны высокочувствительные и селективные методики проточноинжекционного определения сульфаметоксазола, сульфаметазина, сульфаметазина гемисукцината, белого стрептоцида и салициловой кислоты в водных растворах, а также сульфаметоксазола в объектах окружающей среды почва, природные воды, пищевых продуктах мясо, яйцо, молоко, фармацевтических препаратах. Методика определения сульфаметоксазола внедрена в лабораторный практикум спецкурса Химические и биосенсоры. Но материалам разработок подана заявка на предполагаемое изобретение и получено положительное решение на выдачу патента. Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на конференции студентов, аспирантов и молодых ученых Актуальные проблемы современного естествознания Иваново, ХИ научнопрактической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов Наша общая окружающая среда Липецк, XVII Менделеевском съезде по общей и прикладной химии Казань, V Всероссийской конференции но анализу объектов окружающей среды с международным участием Экоаналитика СанктПетербург, I Региональной научной конференции Химикоэкологические проблемы Центрального региона России Орел, Всероссийской конференции по аналитической химии Аналитика России Москва, , XIV Областной научнотехнической конференции Липецк, , II Международном симпозиуме Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии Краснодар, , III Международной конференции Экстракция органических соединений Воронеж, . Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 3 статьях, тезисах докладов. Структура работы. Диссертационная работа изложена на 5 страницах машинописного текста, включает рисунок и таблиц. Состоит из введения, 4 глав, выводов и списка использованных библиографических источников, включающего 9 ссылок на отечественные и зарубежные работы. А2. Исследование условий формирования аналитического сигнала проточного пьезокварцевого иммуносенсора при определении сульфопрепаратов в жидких средах. Такие характеристики ПИА позволяют разрабатывать новые, уникальные аналитические методики, предназначенные для определения биологически активных соединений в потоке 1, способствуют внедрению их в аналитическую практику в ветеринарии 2, медицине 3 6, различных отраслях производства и промышленности 7, 8 и т. В работе 9 рассмотрено современное состояние и перспективы развития проточноинжекционного анализа для определения лекарственных веществ в фармацевтических формах и биологических жидкостях, обсуждены проблемы повышения избирательности и чувствительности при определении биологически активных соединений. В полной мере этим требованиям не отвечает ни один из известных детекторов. Выбор способа регистрации аналитического сигнала зависит, главным образом, от природы определяемого компонента и анализируемого образца . Наиболее часто в ПИА используются спектрофотометрические , флуориметрические , электрохимические амперометрические и потенциометрические детекторы , ,, гораздо реже атомно абсорбционные спектроскопические детекторы или биосенсоры , , , , 1. Аналитическим сигналом спектрофотомегрических детекторов служит интенсивность светопоглощения оптическая плотность при избранной длине волны. Этот тип детекторов обладает невысокой стоимостью, однако его возможности в значительной степени ограничены низкой чувствительностью на уровне г и невысокой селективностью , . Чувствительность спектрофотометрического детектора, в случае применения его в проточноинжекционном режиме, существенно ниже, чем в статическом. Это было продемонстрировано на примере определения циметидина предел обнаружения ПрО составляет 2,16 и 9,57 М .