Определение органических ксенобиотиков в волосах человека методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии

• Автор: Маруценко, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 157 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Волос как объект анализа

1.1. Отбор пробы

1.2. Очистка и измельчение

1.3. Извлечение органических ксенобиотиков из волос

2. Методы определения ксенобиотиков в волосах человека

3. Классы определяемых соединений

3.1. Наркотические вещества

3.2. Лекарственные препараты

3.3. Полиароматические углеводороды

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Исходные вещества, аппаратура и техника эксперимента
1.1. Выбор модельных соединений
1.2. Реактивы и материалы
1.3. Выбор оптимальных параметров сканирования тонкослойных пластин на денситометре Сатад
1.4. Выбор метода предварительного концентрирования
2. Определение ПАУ в волосах человека
2.1. Оптимизация условий хроматографического определения ПАУ в тонком слое
2.2. Изучение сорбции ПАУ из сигаретного дыма на волосы человека
2.3. Выбор условий извлечения ПАУ из матрицы волос
2.4. Практическое приложение изучение защитного влияния полиэтиленгликолевых эфиров хитозана на волосы человека
3. Определение лекарственных препаратов в волосах человека
3.1. Определение параметров экстракции лекарственных препаратов в системе вода гексан
3.2. Оптимизация условий хроматографического определения лекарственных препаратов в тонком слое
3.3. Изучение сорбции лекарственных препаратов из
водных растворов на волосы человека
3.4. Выбор условий извлечения лекарственных препаратов
из матрицы волос
4. Определение изученных ксенобиотиков в реальных образцах волос
ПРИЛОЖЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Способ модификации подвижной фазы при групповом ВЭТСХ определении соединений класса ПАУ. Результаты изучения сорбции соединений класса ПАУ из сигаретного дыма и модельных лекарственных препаратов из водных растворов на волосах человека. Разработанный подход для оценки соотношения внутреннего эндогенного и внешнего экзогенного загрязнений и способы приготовления образцов сравнения для определения органических ксенобиотиков в волосах человека. Данные по изучению эффективности различных способов извлечения органических веществ из белковой структуры человеческого волоса и предложенные в работе новые способы извлечения полярных и неполярных органических ксенобиотиков. Методики скрининга лекарственных препаратов и ПАУ в волосах человека на основе сочетания микрожидкостной экстракции и высокоэффективной тонкослойной хроматографии. Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на международных симпозиумах i i i Венгрия, г. Венгрия, г. Разделение и концентрирование в аналитической химии Россия, Туапсе, г. Россия, Москва, г. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ 3 статьи и 6 тезисов докладов. Человеческие волосы занимают особое место среди медикобиологических объектов анализа следовых количеств органических веществ. Они являются ороговевшими эпителиальными отростками кожи и состоят в зависимости от содержания жидкости на из протеинов, воды, 1 9 липидов и менее 1 некоторых ферментов, пигментов и холестерола. Содержание минеральных компонентов колеблется от 0. Говоря о строении волоса, различают стержень ii выступающую над кожей часть и корень ix ii, расположенный в толще кожи. Корень оканчивается утолщением луковицей i ii 2. Сердцевина волоса покрыта корковым слоем и кутикулой. Корковое вещество составляет основную массу волоса и состоит из ороговевших веретенообразных клеток. Сердцевина образована клетками полигональной формы, а кутикула представляет собой одинарный слой безъядерных клеток чешуек. Внутреннее строение волоса человека представлено на рис. С химической точки зрения волос представляет собой ориентированную полимерную сетку, содержащую ряд функциональных химических групп, способных связывать небольшие молекулы. Преобладающими компонентами являются алифатические аминокислоты цистеин серосодержащая кислота, лейцин, глутаминовая кислота, в меньшей степени аргинин и аспарагиновая кислота. Кроме того, в состав матрицы входят ароматические тирозин и фенилаланин и гетероциклические гистидин и триптофан аминокислоты 1. Рис. Внутреннее строение волоса 2
Повидимому, пептидные и аминокислотные группировки, дисульфидные и карбоксильные группы, ароматические и гетероциклические фрагменты являются ответственными за образование связей с инородными органическими соединениями и обеспечивают их внедрение в протеиновую матрицу. Также доказано участие в этом процессе основного пигмента волос меланина 2, 3, 4. Существует две модификации меланина феомеланин и эумеланин. Эумеланин это чернокоричневый пигментполимер, по химическому строению относящийся к производным дигидроксииндола. Он имеет хиноидную структуру и обладает сильно выраженными анионообменными свойствами. Феомеланин красножелтый пигмент, относящийся к бензатиазинам. Обе формы меланина в организме синтезируются из диоксифенилаланина ДОФА. Многие вещества накапливаются именно в структуре меланина. Например, в работе 4 было показано, что коэффициент корреляции между родством с меланином и способностью проникать в волосы для группы из наркотиков очень высок и составляет 0. Во многих работах показана прямая зависимость между содержанием ксенобиотиков в волосах и степенью их пигментации. Так, работа 5 посвящена взаимодействию 3Нгалоперидола с культурами пигментированных меланоциты и непигментированных кераноциты клеток. Исследование подтвердило, что в общем меланоциты более склонны к накоплению и концентрированию 3Нгалоперидола. В работе 6 авторы установили, что содержание метадона в окрашенной шерсти крыс было выше в . При этом меланина в окрашенной шерсти было больше лишь в 3. ЗНгалсперидол, связанный с клетками. Рис.