Протективный эффект аденовирусных генетических конструкций, экспрессирующих белки хламидий, против экспериментальной хламидийной инфекции

• Автор: Королева, Екатерина Андреевна
• Шифр специальности: 14.03.09, 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 153 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологические особенности хламидий

1.1.1 Жизненный цикл хламидий

1.1.2 Структура клеточной оболочки хламидий

1.1.3 Система секреции III типа хламидий

1.2 Эпидемиология хламидийной инфекции

1.3 Стратегии контроля распространения хламидийной инфекции: лечение или профилактика?
1.4 Преимущества вакцинации, как стратегии контроля над распространением хламидийной инфекции
1.5 Особенности патогенеза хламидийной инфекции
1.5.1 Клеточная парадигма
1.5.2 Иммунологическая парадигма
1.6 Характеристика иммунного ответа при хламидийной инфекции
1.6.1 Врожденная резистентность
1.6.2 Адаптивный иммунный ответ
1.7 Исследования по разработке вакцин против хламидиоза
1.7.1 Аттенуированные хламидийные вакцины
1.7.2 Субъединичные вакцины
1.7.3 Генетические вакцины
1.7.4 Адъюванты, используемые в разработке вакцин против хламидиоза
1.8 Состояния и перспективы разработки вакцины против урогенитального
хламидиоза, вызванного С. trachomatis
Глава 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы

2.1.1 Бактериальные штаммы
2.1.2 Клеточные линии
2.1.3 Антигены
2.1.4 Плазмидные векторы
2.1.5 Адъюванты
2.1.6 Другие реактивы
2.1.7 Лабораторные животные
2.1.8 Лабораторное оборудование
2.2 Методы исследования
2.2.1 Методы работы с животными
2.2.2 Методы мониторинга инфекционного процесса
2.2.3 Методы иммуномониторинга вакцинных конструкций
2.2.4 Статистическая обработка результатов исследований
2.3 Результаты исследований
2.3.1 Изучение иммуногенных и протективных свойств рекомбинантного
аденовирусного вектора, экспрессирующего белок ОтсВ С. trachomatis
2.3.1.1 Получение рекомбинантного аденовируса, несущего ген отсВ С. trachomatis
2.3.1.2 Изучение иммуногенных и протективных свойств Ad-mOmcB-Fc на модели урогенитальной хламидийной инфекции, вызванной С. muridarum
2.3.2 Характеристика иммуногенных свойств структурного белка третьей транспортной системы хламидий ТС_0
2.3.2.1 Определение специфических антител к рекомбинантному белку ТС_0037 С. muridarum (г-ТС_0037) и его эпитопу - пептиду ТС_0037 (р-ТС_0037) методом ИФА
2.3.2.2 Анализ специфической лимфопролиферации в ответ на антиген ТС_0037 С. muridarum
2.3.2.3 Анализ реакции торможения миграции макрофагов (РТММ), полученных от мышей, иммунизированных белком ТС_0037 С. muridarum
2.3.2.4 Адаптивный перенос Т-клеток от мышей, иммунизированных антигеном ТС_0037 С. muridarum
2.3.3 Сравнительный анализ иммуногенных и протективных свойств генетических конструкций на основе аденовирусного вектора, экспрессирующих белки хламидий ОтсВ и ТС 0037 (Ad-mOmcB-Fc/Ad-MBL-TC_0037)
2.3.3.1 Получение рекомбинантного аденовируса, несущего ген tc_0037 (Ad-MBL-ТС_037) С. muridarum
2.3.3.2 Изучение иммуногенных и протективных свойств препаратов Ad-mOmcB-Fc, Ad-MBL-TC_0037 на модели урогенитальной хламидийной инфекции, вызванной С. muridarum
2.3.4 Оптимизация схемы иммунизации генетической конструкцией на основе аденовирусного вектора, экспрессирующего белок ТС 0037 С. muridarum
2.3.4.1 Изучение гуморального иммунного ответа на иммунизации Ad-MBL-ТС 0037 с бустированием рекомбинантным белком ТС 0037 в сочетании с монофосфорил липидом A (rTC_0037-MPLA)
2.3.4.2 Оценка клеточного иммунного ответа к антигену ТС 0037 у лабораторных животных, интраназально иммунизированных Ad-MBL-TC_0037 с бустированием rTC_0037-MPLA
2.3.4.3 Изучение протективных свойств иммунизации генетической конструкцией на основе аденовирусного вектора, экспрессирующего белок ТС 0037 С.
muridarum с бустированием rTC_0037-MPLA
Глава 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

о 6> Нейтрофял
о © Хзяаювюия

Эпк1“18" Т-ХСЖПСр _

КПСТЖі (яшме) в
Эшгтелпдьни (р«реш№ке
кнфечцик) □ в
(г.»рскст*яш«і
Рисунок 6. Иммунологическая теория патогенеза (O'Meara, 2012).
(А) После повторного заражения, эпителиальные клетки и локальные популяции макрофагов еекретируют провоспалительные цитокины и хемокины, которые увеличивают экспрессию молекул адгезии (ICAM-1, VCAM-1,