Антиангиогенная активность экстрактов растений и их фракций

• Автор: Соломко, Элисо Шаликовна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Роль ЭК в организме человека

1.2. Ангиогенез в норме и при онкологических болезнях (этапы формирования, механизмы и факторы)

1.2.1 Этапы формирования кровеносных сосудов при ангиогенезе

1.2.2. Механизмы формирования новых кровеносных сосудов в норме

1.2.3. Созревание вновь сформированной кровеносной сети

1.2.4. Особенности ангиогенеза при солидных злокачественных

новообразованиях
1.3. Антиангиогенная терапия опухолей
1.3.1. Ингибиторы ангиогенеза, одобренные для клинического использования
1.3.2. Непрямые ингибиторы ангиогенеза
1.3.3. Ингибиторы ангиогенеза растительного происхождения
1.3.4. Особенности скрининга веществ растительного происхождения на
антиангиогенную активность
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Материалы
2.1.3. Приготовление основных сред и буферов
2.1.4. Соединения, использованные для исследования антиангиогенных свойств
2.1.4.1 Противоопухолевые препараты и известные ингибиторы ангиогенеза
2.1.4.2 Экстракты растений
2.1.4.2. Фракции, полученные из корней и листьев лопуха
2.1.4.3. Фракции гидролизуемых таннинов, выделенные из Кипрея узколистого(Сйатаепепоп ашйМшт)
2.1.5. Клеточные линии
2.2. Методы исследований
1.2.1. Культивирование клеточных линий
1.2.2. Снятие клеток с культуральных матрасов
1.2.3. Замораживание клеток
1.2.4. Размораживание клеток
1.2.5. Определение количества клеток

1.2.6. Инкубация клеток с тестируемыми веществами in vitro
2.2.7. Метод оценки цитотоксического действия веществ
2.2.8. Метод оценки эффективности блокирования пролиферации
2.2.9. Метод оценки блокирования миграционной способности клеток в камере Бойдена
2.2.10. Метод оценки блокирования миграционной способности клеток по
методу «заживления раны»
2.2.11 .Метод оценки блокирования формирования СПС
2.2.12. Имплантат Матриге л я
2.2.13. Иммуногистохимическое и иммуноцитохимическое окрашивание
2.2.14.Статистический анализ
Глава 3. Характеристика и функциональная активность in vitro культуры эндотелиальных клеток мыши SVEC
3.1. Экспрессия маркеров эндотелиальных клеток на клеточной линии SVEC
3.2. Оценка влияния VEGF165 и bFGF на функциональную активность ЭК SVEC
3.3. Оценка влияния известных ингибиторов ангиогенеза на
функциональную активность ЭК SVEC
3.4 Оценка влияния известных противоопухолевых препаратов на
функциональную активность ЭК SVEC
Глава 4. Изучение антиангиогенной активности фракций растений in vitro и in vivo
4.1. Изучение антиангиогенных свойств экстрактов растений
4.2. Антиангиогенные свойства веществ, выделенных из лопуха обыкновенного (Arctium Lappa)
4.2.1. Антиангиогенные свойства сока корней Лопуха обыкновенного
4.2.2. Антиангиогенные свойства сока листьев Лопуха обыкновенного
4.2.3. Антиангиогенные свойства н-бутанольной фракции сока корней Лопуха обыкновенного
4.2.3. Антиангиогенные свойства н-бутанольной фракции СЛЛ
4.2.4. Антиангиогенные свойства этилацетатной фракции сока корней Лопуха обыкновенного
4.2.5. Антиангиогенные свойства этилацетатной фракции СЛЛ
4.2.6. Антиангиогенные свойства Арктиина из семян Лопуха обыкновенного

4.2.7. Антиангиогенные свойства других фракций сока корней Лопуха обыкновенного (полисахаридная фракция, водная фракция без полисахаридов, водная фракция)
4.2.8. Обобщение полученных результатов по влиянию СКЛ и СЛЛ и отдельных фракций Лопуха обыкновенного на ангиогенез in vitro
4.2.9. Изучение свойств сока Лопуха обыкновенного и его фракций на ангиогенез in vivo на модели имплантата Матригеля
4.2.10. Антиангиогенные свойства фракций гидролизуемых таннинов, выделенных из Кипрея узколистого (Chamaenerion angustifolium)
4.2.11. Анализ взаимосвязи антиангиогенной активности веществ in vitro и
in vivo
Глава 5. Обсуждение полученных результатов
Заключение
Выводы
Список использованной литературы

эфиром [Arbiser J., 1998]. Также куркмин блокирует синтез некоторых матриксных металлопротеиназ, в частности ММР-9 и аминипептидазу N [Shim J., 2003]. На моделях in vivo было показано, что куркумин ингибирует прогрессию химически индуцированного рака толстой кишки и кожи [Arbiser J., 1998]. Куркумин также ингибирует рост меланомы В16 in vivo, возможно через ингибирование ангиогенеза и снижение синтеза N0 и фактора некроза опухоли альфа [Leyon Р., 2003].
Однако куркумин плохо адсорбируется из желудочно-кишечного тракта. В I фазе клинических исследований хотя больные и получали per os очень высокую дозу (до 1 гр.) куркумина, однако в сыворотке крови концентрация соединения определялась в наномолярных концентрациях [Sharma R., 2004]. Таким образом, эффективную дозу куркумина для осуществления фармакологической активности невозможно достичь у человека, его применение может быть только местным.
Чай, также как и вода, является одним из самых потребляемых жидкостей в мире. Некоторые эпидемиологические исследования показывают, что те люди, которые употребляют большое количество зеленого чая, имеют более низкий риск развития некоторых типов рака [Jung Y., 2001]. Основными действующими активными веществами зеленого чая являются катехины, в частности (-)-эпигаллокатехин галлат (EGCG), (-)-эпигаллоктахин (EGC), (-)-эпикатехин галлат (ECG) и (-)-эпикатехин (ЕС) [Kanthou С., 2002]. EGCG является основным активным компонентом зеленого чая. Он активирует апоптоз в опухолевых клетках, а также ингибирует опухолевую инвазию и ангиогенез.
Экспериментальные исследования показывают, что потребление зеленого чая мышами значительно снижает ангиогенез [Jung Y., 2001]. Механизмом антиангиогенного действия является ингибирование пролиферации ЭК в ответ на стимуляцию ангиогенными ростовыми факторами [Kojima-Yuasa., 2003]. Данные эффекты достигаются