Разработка лабораторной технологии получения гиногенных растений моркови in vitro

• Автор: Домблидес, Артур Сергеевич
• Шифр специальности: 06.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 140 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:
1.1. Значение гаплоидов для селекции
1.2. Получение гаплоидов из клеток-гамет
1.3. Получение гаплоидных растений при использовании мужского
г аметофит a in vitro
1.4. Метод культуры неопыленных семяпочек и завязей in vitro
1.5. Факторы влияющие на процесс гиногенезаev vitro
1.5.1. Способы культивирования
1.5.2. Генотип донорного растения
1.5.3. Состав питательной среды
1.5.4. Стадия развития зародышевого мешка
1.6. Пути развития гиногенеза т vitroт.:а,
..-ЦТ»..:"
1.7. Получение дигаплоидов у моркови Шптяо
1.6. Перспективы метода гиногенеза in vitro
II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
III ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Изучение взаимосвязи между стадиями развития мужского и женского гаметофитов и морфологическими показателями репродуктивных органов моркови
3.1.1. Развитие мужского гаметофита моркови
3.1.2. Развитие женского гаметофита моркови
3.1.3. Взаимосвязь между стадиями развития мужского и женского гаметофитов моркови
3.1.4. Взаимосвязь между стадией развития микро и макрогаметофита и
морфологическими показателями соцветия
3.2. Культура пыльников и неопыленных семяпочек моркови
3.2.1. Культура цветочных бутонов моркови
3.2.2. Культура пыльников моркови in vitro
3.2.3. Культура неопыленных семяпочек in vitro
3.3. Оптимальные стадии развития мужского и женского гаметофитов для индукции гиногенеза и андрогенеза у моркови in vitro
3.5. Цитологическое изучение процесса гиногенеза в культуре
НЕОПЫЛЕННЫХ СЕМЯПОЧЕК МОРКОВИ IN ПТЯО
3.5.1. Влияние 2,4 Д и ИУК на женский гаметофит моркови
3.6. Регенерация растений моркови
3.7. Особенности анатомического строения андро - и гиногенных растений моркови R0
3.7.1. Растения-регенеранты моркови репродуктивного периода онтогенеза
3.8. Опенка растений моркови, полученных методом андро- и гиногенеза IN VITRO
3.8.1. Оценка линии с использованием RAPD - анализа
3.8.2. Биохимический анализ
3.8.3. Морфологическая оценка растений
3.9. Адаптация метода гиногенеза на других генотипах морковий
3.9.1. Цитологическое изучение модификаций дифференциации тканей пыльников моркови сорта НИИОХ 336 с петалоидным типом стерильности
3.9.2. Культура неопыленных семяпочек сорта НИИОХ 336 и Нантская
3.10. Использование тидиазурона в качестве индуктора гиногенеза в культуре неопыленных семяпочек моркови
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
V ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение
Широкое возделывание моркови во всех странах обусловлено высокой питательной ценностью ее корнеплодов. Ее выращивают повсеместно как вкусный овощ и как основной источник соединений изопреновой природы -каротина, или провитамина А (Сечкарев, 1971). На мировом рынке широким спросом пользуются гетерозисные гибриды F,. В России работа по созданию межлинейных гибридов моркови F) на базе ЦМС была начата в 70-х годах Н.И. Жидковой с сотрудниками, в результате чего был создан первый отечественный гибрид F] Калисго (Сазонова, Власова 1990). Для того, чтобы достигнуть однородности линии по определенным селекционно-ценным признакам, используя методы традиционной селекции, требуется 5-7 поколений инбридинга. Поскольку морковь относится к двулетним культурам, то для получения таких линий необходимо затратить 10-14, атоиболее лет.
Современная селекционная практика нуждается в новейших методах, которые призваны повысить ее эффективность. Наряду с традиционными, все большее применение в селекции находят биотехнологические методы, позволяющие ускорить селекционный процесс и повысить качество конечного продукта. Используя методы биотехнологии растений такие как культура пыльников и неопыленных семяпочек in vitro, можно сократить сроки создания константных линий моркови в 3-4 раза. При этом, для получения гетерозисных гибридов Fi моркови наряду с фертильными линиями В и С, которые можно получить используя культуру пыльников, необходимы и линии А с мужской стерильностью. Процесс получения стерильных линий моркови методами традиционной селекции довольно длителен и трудоемок и не всегда удается получить линии, отвечающие требованиям гетерозисной селекции (Тюкавин, Шмыкова, 1999).
С целью ускоренного создания выровненных линий с мужской стерильностью в лаборатории биотехнологии ВВШИССОК помимо получения

Рис. 3. Ранние стадии развития зародышевого мешка моркови
(по ВоиЬтеск, 1931).
А - продольный разрез через молодую завязь моркови; Б - материнская клетка макроспор, окруженная нуцеллусом; В, Г - мейотическое деление материнской клетки макроспор; Д - линейная тетрада макроспор; Е - халазальная макроспора; Мк - материнская клетка макроспор; Дм - дегенерирующие макроспоры; Г - гипостаза.