Комплексная оценка функционально-метаболического статуса нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии

• Автор: Захаров, Александр Алексеевич
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Ульяновск
• Количество страниц: 132 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1. Характеристика бактерицидных свойств нейтрофилов

1.2. Функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов при паразитозах

1.3. Патофизиологические аспекты бластоцистной инвазии

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований

2.1. Материалы исследований

2.2. Методы исследований

ГЛАВА 3. Воздействие бластоцист на макроорганизм

3.1. Характеристика бластоцист

3.2. Проявления кишечного бластоцистоза у экспериментальных животных
ГЛАВА 4. Влияние бластоцистной инвазии на функциональнометаболическую активность нейтрофильных
гранулоцитов
4.1. Динамика количественного содержания нейтрофильных гранулоцитов
4.1.1. Абсолютное количество нейтрофилов
4.1.2. Показатели относительного количества нейтрофильных гранулоцитов
4.2. Оценка фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов
4.2.1. Результаты определения фагоцитарного индекса
4.2.1.1. Изменение показателей базального фагоцитоза
4.2.1.2. Динамика уровня стимулированного фагоцитоза
4.2.2. Характеристика способности фагоцитов к поглощению
возбудителя
4.2.3. Результаты определения завершенности фагоцитоза
4.3. Оценка кислородзависимой биоцидности нейтрофильных гранулоцитов при бластоцистной инвазии
4.3.1. Результаты определения активности «респираторного взрыва» НСТ-тестом
4.3.2. Характеристика активности миелопероксидазы
4.4. Характеристика кислороднезависимой биоцидной системы
нейтрофилов
4.4.1. Уровень щелочной и кислой фосфатазы
4.4.2. Изменение показателей кислой фосфатазы
4.4.3. Изменение уровня катионного белка
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
КБ - катионные белки
КФ - кислая фосфатаза
ЛКБ - лизосомальные катионные белки
МПО - миелопероксидаза
НГ - нейтрофильные гранулоцити
НСТ- тест восстановления нитросинего тетразолия
ЦТ - центральное тело
МСФ - микробицидная система фагоцитов
СЦК - средний цитохимический коэффициент
ФИ - фагоцитарный индекс
ФМАН - фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов ФЧ - фагоцитарное число ЩФ - щелочная фосфатаза

Сали набирали из свежей капли 20 мкл крови, осторожно выдували ее в разводящую жидкость, закрывали резиновой пробкой и тщательно перемешивали. В этом случае кровь разведена в 21 раз. После каждого взятия крови пипетка промывалась дистиллированной водой. Расчет лейкоцитов проводили, учитывая разведение крови, число сосчитанных квадратов и объем одного большого квадрата (1/250 мкл, так как сторона квадрата 1/5 мм, высота 1/10 мм) (Меньшиков с соавт.,1987).
х = а ■ 250 • 20, т.е. х - а - 50, где
х - число лейкоцитов в 1 мкл; а - число лейкоцитов в 100 больших квадратах.
2.2.2. Методика определения фагоцитарной реакции полиморфноядерных
лейкоцитов крови
Принцип метода основан на количественном определении поглощенных и переваренных нейтрофилами микроорганизмов при совместной инкубации исследуемой крови с микробной тест-культурой (Staphylococcus aureus).
Показатели фагоцитарной реакции полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) крови определяли, используя тест-систему, предложенную НПКО «Реакомплекс».
В две центрифужные пробирки с 0,25 мл 2% раствора цитрата натрия вносили 0,5 мл исследуемой крови, после этого в обе пробирки добавляли 0,25 мл двухмиллиардной взвеси золотистого стафилококка, взвесь перемешивали встряхиванием и выдерживали при температуре 37°С в течение 5 минут, повторно встряхивая через каждые 5 минут. Далее пробирки охлаждали холодной водой и центрифугировали при 1500 об/мин 6 минут. Надосадочную жидкость сливали, а осадок ресуспендировали.
Для определения поглотительной способности нейтрофилов из полученной взвеси готовили мазки на предметных стеклах, затем препараты