Физиологическая и биохимическая характеристика штамма Aspergillus niger A3, продуцента целлюлаз и гемицеллюлаз

• Автор: Савов, Валентин Александров
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Одесса
• Количество страниц: 143 c. : ил

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Биоконверсия целлкшозосодержащих материалов

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Штамм.. - Aspergillus niger А^

3.2. Культуральная характеристика

3.3. Биохимические анализы

3.4. Статистическая обработка данных

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

4.1. Культуральные и морфо-физиологические свойства штамма A.niger а^ #

4.2. Исследование физиологических особенностей штамма A.niger А^ в условиях лимитации углеродом И' азотом
4.2.1. Углеродная лимитация
4.2.2. Азотная лимитация
4.3. Культивирование штамма A.niger на целлшо-зосодержащие субстраты
4.3.1. Биосинтез целлюлазных энзимов и кеиланазы штаммом A.niger на различных целлюлозосодержащих субстратах
4.3.2. Динамика активнооти ферментов целлкшаз-ного комплекса и кеиланазы гриба a.niger А^ в
зависимости от питательной среды и углеродного источника
4.3.3. Влияние возраста вегетативного посевного материала на динамику биосинтеза целлюлазных энзимов и кеиланазы A.niger
4.3.4. Влияние дрожжевого экстракта на биосинтез целлюлазных энзимов и кеиланазы A.niger
4.3.5. Активность некоторых внутриклеточных энзимов углеродного и азотного обмена при периодичном культивировании
4.3.6. Содержание N, Р, сахаров и экзоклеточного протеина при культивировании A.niger на среде Мандельс с микрицеллом и отрубями
4.3.7. Активность фермента супероксид-дисмутазы при культивировании A.niger на среде Манцельс с микрицеллом и пшеничными отрубями
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
Список основной использованной литературы

Актуальность проблемы. В постановлении ШТ съезда Коммунистической партии Советского Союза подчеркивается необходимость "разработки биотехнологических процессов ц для производства продукции, используемой в медицине, сельском хозяйстве и промышленности".
К важнейшим направлениям биотехнологии как в фундаментальном, так и в прикладном отношении следует отнести биоконверсию возобновляемого растительного сырья для пищевой, микробиологической, нефтехимической, энергетической, медицинской промышленности и сельского хозяйства.
Что касается микробиологического аспекта работ по биотехнологии, то здесь центральной задачей должна быть разработка фундаментальных подходов и получение полиферментных комплексов микробного происхождения, гидролизирующих растительные биополимеры с заданными свойствами /термостабильность., адсорбционная способность, активность и т.д./ и ферментативным составом.
Различные виды микроорганизмов обладают неодинаковой способностью к гидролизу природных целлюлозосодержащих растительных субстратов. При этом наблюдаются различия не только в активности и свойствах целлюлаз, но и в характере роста, степени дезагрегации субстрата, способности использования продуктов гидролиза клетчатки. Одни виды целлюлозотрансформирующих микроорганизмов при разрушении v

/Растворы: а/ ОД Н раствор иаОН; 2^-ный раствор Ыа2С05 в ОД Н растворе ыаон /реактив А/.
б/ 0,5%-тй раствор сиБО^ • 5Н2о в 1%-ном растворе виннокислого натрия или калия /реактив В/: растворяют 10 г соли в 300 мл дистиллированной воды. В этот раствор вносят 5 г сиБО^ • 5Н2о и после ее растворения доводят объем раствора дистиллированной водой до I л. Перед анализом смешивают 4,9 мл реактива А с I мл реактива В /реактив С/.
в/ реактив Фолина I 152 I.
Последовательность определения: к 2 мл исследуемого раствора белка добавляли 4 мл реактива С. Смесь перемешивали, через 10 мин. добавляли 0,2 мл реактива Фолина, снова тщательно перемешивали и оставляли пробирку при комнатной температуре на 30 мин. Интенсивность синей окраски измеряли на спектрофометре при длине волны 750 нм.
Расчет содержания белка. Концентрацию белка в пробе определяют по оптической плотности раствора с помощью калибровочной кривой, которую строят на основании характеристик ряда точно приготовленных белковых растворов нисходящей концентрации. В тех случаях, когда необходимо получить точное представление об абсолютном содержании белка, для построения калибровочной кривой используют кристаллические препараты чистого белка.
3.3.2. Определение общего азота методом Кьельдаль - Неслера I 137 I
Принцип метода. Органические вещества исследованного материала в присутствии катализатора минерализовали концентрированной н2бо4.
Растворы: реактив Неслера - йодит меркурия - 45,5 г, йодит калия - 35 г, н2о - 30-40 мл. Соли растворяли водой и перелива-