Прогнозирование гестоза и задержки развития плода в ранние сроки беременности

• Автор: Хахва, Наталья Тенгизовна
• Шифр специальности: 14.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 108 с.

СОДЕРЖАНИЕ.

Список сокращений

Введение

Глава I. Иммуногенетические аспекты гестоза.

Обзор литературы

Глава II. Материалы и методы исследования.

2.1. Контингент обследованных

2.2. Методы исследования

2.3. Методика определения сывороточных аутоантител

2.3.1. Забор материала

2.3.2. Методика проведения теста
2.4. Исследование крови на носительство аллеля PL-AII
гена GP Ilia
2.4.1. Забор материала
2.4.2. Получение ДНК-матрицы
2.4.3. Электрофорез в агарозном геле
2.4.4. Полимеразная цепная реакция
2.4.5. Обработка ДНК рестрикционной экзонуклеазой
2.4.6. Электрофорез в полиакриламидном геле
2.4.7. Окраска полиакриламидного геля серебром
Глава III. Клиническая характеристика обследованных
беременных
Глава IV. Результаты исследований (собственные наблюдения).

4.1. Комплексная оценка сывороточного содержания аутоантител методом ЭЛИ-П-Теста
4.2. Исследование на носительство аллелей PL-AI и PL-AII гена GP Ilia
4.3. Комплексная оценка эффективности методов исследования аллельной принадлежности гена GP Ilia и ЭЛИ-П-Теста в прогнозировании гестоза
Глава V. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Практические рекомендации
Указатель литературы

Список сокращений.
аАТ - аутоантитела
АФС - антифосфолипидный синдром
ВА - волчаночный антиген
ВНС - вегетативная нервная система
ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения
ВПГ - вирус простого герпеса
ВСД - вегетососудистая дистония
ГСД - гестационный сахарный диабет
ДВС - диссеминированное внутрисосудистое свертывание
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт
ЗРП - задержка развития плода
ИБС - ишемическая болезнь сердца
ИМТ - индекс массы тела
МКБ - международная классификация болезней
МПП - мать - плацента
МС - материнская смертность
НЦД - нейроциркуляторная дистония
ОБМ - основной белок миелина
ОЖГБ - острый жировой гепатоз беременных
ОПБ - отделение патологии беременных
ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция
ПН - плацентарная недостаточность
ПС - перинатальная смертность
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ССС - сердечно-сосудистая система
УЗД - ультразвуковая диагностика
УЗИ - ультразвуковое исследование

2.4. Исследование крови на носительство аллеля PL-AII гена GP
Ilia.
2.4.1. Забор материала.
Отбирали 100 мкл периферической крови пациентки в пробирку, содержащую 25 мкл 50 мМ раствора нейтрального Na - ЭДТА ("Sigma", США), и перемешивали. В таком виде кровь может храниться 15 - 20 суток в бытовом морозильнике (около -12°).
2.4.2. Получение ДНК-матрицы.
К 125 мкл смеси крови и раствора Na - ЭДТА добавляли 125 мкл раствора 0,15 М NaCl ("Реахим", степень чистоты ОСЧ или ХЧ), 0,1% тритона - Х100 ("Sigma", США) перемешивали и инкубировали при комнатной температуре 20 мин. Затем осаждали центрифугированием на микрофуге "Eppendorf1 (Германия) 10 мин при 10 000 об/мин. Убирали супернатант. Осадок суспендировали в 200 мкл 0,1% тритона - XI00, полученную смесь центрифугировали 10 мин при 10 000 об/мин, супернатант убирали. Полученный осадок дважды промывали 500 мкл 10 мМ трис - НС1 ("Sigma", США) путем суспендирования и осаждения центрифугированием при вышеуказанных условиях. Затем ресуспендировали в 50 мкл 10 мМ трис - НО и выдерживали 10 мин на кипящей водяной бане с последующим быстрым охлаждением (для денатурации ДНК и получения гомогенного раствора).
2.4.3. Электрофорез в агарозном геле.
Электрофорез ДНК проводили на аппарате "Bio - Kad" в 0,8% агарозном геле ("Sigma", США) в трис - ацетатном буфере ("Реахим", степень чистоты ОСЧ или ХЧ) с бромистым этидием ("Sigma", США) при напряженности поля 20 мА и 150 V. Краска для нанесения образцов