Молекулярно-клеточные механизмы активации врожденного иммунитета сульфатированными полисахаридами бурых водорослей

• Автор: Макаренкова, Илона Дамировна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 239 с. : 39 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Механизмы активации, характеристика и межклеточные взаимодействия ключевых клеток-эффекторов врожденного иммунитета
1.1. Характеристика рецепторов врожденного иммунитета и механизмы проведения сигналов

1.2. Характеристика ключевых клеток врожденного иммунитета

1.3. Взаимодействие клеток врожденного иммунитета при вирусных инфекциях

ГЛАВА 2. Структура и физиологический спектр действия сульфатированных полисахаридов бурых водорослей

2.1. Структура сульфатированных полисахаридов

2.2. Физиологический спектр действия сульфатированных полисахаридов

ГЛАВА 3. Материалы и методы

3.1. Материалы исследования
3.2. Методы и объём исследований
3.3. Методы оценки взаимодействия сульфатированных полисахаридов с ТІЛІз
3.4. Методы оценки функциональной активности ДК
3.5. Методы оценки функциональной активности мононуклеарных лейкоцитов мышей и Т4К-клеток
3.6. Методы исследования противовирусного действия сульфатированных полисахаридов бурых водорослей
3.7. Статистический анализ
ГЛАВА 4. Взаимодействие сульфатированных полисахаридов бурых водорослей с То11-подобными рецепторами

4.1. Влияние фукоиданов на экспрессию ТЫ1-2, ТЫМ и ТЬЯ-9 дендритными клетками мышей, костномозгового происхождения
4.2. Изучение взаимодействия фукоиданов с ТЫ1-2, гетеродимером Т1Л1-2/6, ТЪЯ-З, ТЬК-4, ТЬЯ-5, Т1Л-7, ТЬЯ-8 и ТЬК-9 человека на клеточных линиях эмбрионального почечного эпителия человека НЕК
4.3. Изучение токсического действия фукоиданов на клеточные линии эмбрионального почечного эпителия человека НЕК
4.4. Исследование фукоиданов на содержание липополисахарида грамотрицательных бактерий (ЛАЛ-тест, газожидкостная хроматография и газожидкостная масс-спектрометрия)
ГЛАВА 5. Влияние сульфатированных полисахаридов бурых водорослей на созревание дендритных клеток
5.1. Иммунофенотип дендритных клеток, генерированных из костного мозга мышей под действием фукоиданов
5.2. Иммунофенотип дендритных клеток, генерированных из моноцитов периферической крови человека под действием фукоиданов
5.3. Морфологическая характеристика дендритных клеток, генерированных из моноцитов периферической крови человека под действием фукоиданов
ГЛАВА 6. Характеристика профиля цитокинов, продуцируемых дендритными клетками, под действием сульфатированных полисахаридов бурых водорослей
6.1. Влияние фукоиданов на продукцию цитокинов дендритными клетками, генерированными из костного мозга мышей
6.2. Влияние фукоиданов на продукцию цитокинов

дендритными клетками, генерированными из моноцитов периферической крови человека
ГЛАВА 7. Влияние сульфатированных полисахаридов бурых водорослей на клетки-эффекторы врожденного иммунитета и развитие адаптивного иммунного ответа
7.1. Характеристика субпопуляционного состава лимфоцитов селезенки мышей, под действием фукоиданов в системе ex vivo
7.2. Влияние фукоиданов на морфологическую характеристику лимфоидных органов
7.3. Влияние фукоиданов на динамику продукции цитокинов в сыворотке крови мышей в системе ex vivo
7.4. Влияние фукоиданов на пролиферативную активность спленоцитов мышей в системах in vitro и ex vivo
7.5. Влияние фукоиданов на цитотоксическую активность спленоцитов мышей в системах in vitro и ex vivo
ГЛАВА 8. Противовирусная активность сульфатированных полисахаридов бурых водорослей
8.1. Противовирусная активность фукоидана из бурой водоросли Laminaria japonica в отношении вируса гриппа птиц A/H5N1 in
vitro
8.1.1. Определение цитотоксического действия фукоидана на культуру клеток СПЭВ
8.1.2. Изучение противовирусной активности фукоидана в отношении вируса гриппа птиц A/H5N1
8.2. Противовирусная активность сульфатированных полисахаридов бурых водорослей при экспериментальной хантавирусной инфекции
8.2.1. Скрининг биополимеров из морских гидробионтов на культуре клеток Vero Е6
8.2.2. Изучение противовирусной активности фукоиданов в отношении хантавируса в системе in vitro

ИК имеют общие антигены с моноцитами/макрофагами (СБ1/С018), которые опосредуют адгезию с клетками-мишенями и связывание с рецепторами комплемента СКЗ, экспрессируют антигены, характерные для Т-лимфоцитов (С02, -7, -8), через которые осуществляются повышение внутриклеточной концентрации ионов кальция, перекрестное реагирование с СБ25, С071, С054, НЬА-БЯ и стимуляция секреции №N-7 [83, 428]. Также ТЧК экспрессируют селектины, (3-интегрины, УЬА-4, -5, -6 и антигенные детерминанты к гликопротеидам, которые способствуют адгезии к фибронектину и ламинину, опосредуют антителозависимую цитотоксичность, инициируют синтез 1Ь-2 и активируют литический потенциал 14К, а наличие на мембране ЫК-клеток FcR.HI (СБ16) обеспечивает их участие в защитных реакциях антителозависимой клеточной цитотоксичности [5, 75, 83, 305, 428].
Активация 14К происходит при участии I типа, продуцируемого преимущественно ДК и Мф, а также провоспалительных цитокинов (1Ь-15, 1Ь-12 и 1Ь-18). Наиболее значимую роль 14К играют в защите от вирусных инфекций [75, 305]. Известно, что многие вирусы, проникая в клетку, стремятся подавить синтез молекул МНС I класса, чтобы ускользнуть от эффекторных функций адаптивного иммунитета, но именно это обстоятельство определяет чувствительность инфицированных клеток к опосредованному 14К лизису в силу утраты ингибирующих молекул МНС I класса, в отличие от Т-киллеров [24, 75, 83, 428].
В свою очередь, активированные 14К секретируют №N7, который влияет на созревание и эффекторные функции ДК, а также на Мф, гранулоциты и лимфоциты, участвующие в противовирусном ответе. Именно продукция ШИ-у ЫК и антигенпродуцирующими клетками на ранних стадиях вирусных инфекций, до активации специфического иммунного ответа, является важнейшим компонентом, индуцирующим механизмы противовирусной защиты организма, а также, усиливает кинетику лизиса и стимулирует дифференцировку предшественников 14К. Кроме того, на