Гистогенез лимфоидных органов при воздействии некоторых иммуномодуляторов

• Автор: Иванов, Валентин Станиславович
• Шифр специальности: 16.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 163 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Гистогенез тимуса в пренатальный период
1.1.1 Морфофункциональная характеристика основных клеточных
элементов тимуса
1.2. Эмбриогенез и строение селезенки у крыс
1.3. Современные представления о системе «мать-плод»
1.4. Влияние некоторых биологически активных веществ на эмбриональный гистогенез лимфоидных органов
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал и методы исследования
2.2. Влияние иммуномодуляторов на течение беременности и качество потомства
2.3. Влияние тимогена на гистогенез лимфоидных органов
2.4. Развитие органов иммуногенеза при воздействии экзогенного
В-активина
2.5. Влияние циклофосфамида на развитие органов иммунитета
3. Обсуждение полученных результатов
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Изучение системы органов иммуногенеза в период эмбрионального развития и в раннем постнатальном периоде заслуживает особого внимания, так как знания о закономерностях становления иммунологических механизмов и функции различных популяций иммуноцитов в эмбриональном периоде необходимы для понимания иммунологической целостности плода. Они являются фундаментом для изучения внутриутробных инфекций, возникновения аутоиммунных процессов, аллергических состояний, иммунологической недостаточности и толерантности у новорожденных животных или заболеваний у взрослых животных, которые своим происхождением связаны с нарушением развития иммунной системы в процессе эмбриогенеза (27, 57, 68, 71, 106, 140, 143, 170, 220). Результаты проведенных в последнее время исследований показали, что формирование иммунной системы плода и новорожденного зависит в определенной степени от состояния иммунной системы матери (8,128, 139,182). Патология иммунной системы новорожденных может быть обусловлена неблагоприятными воздействиями в период внутриутробного развития через фетоплацентарный барьер стрессорных гормонов (61, 81, 87, 88, 89). В настоящее время физиологически обосновано существование во время беременности функциональной системы «мать-плод» (20, 55, 99, 131, 183). Адаптация к вне утробной жизни и последующие нормальное развитие потомства возможны только при нормальном функционировании этой системы. Познание закономерностей гистогенетических процессов в иммунокомпетентных органах при нарушении гомеостаза в функциональной системе «мать-плод» важно для поиска способов направленного воздействия на процессы морфогенеза с целью коррекции иммунологического статуса или составляющих его звеньев в раннем постнатальном периоде.
Если в литературе имеется значительное число работ, посвященное изучению эмбриогенеза лимфоидных органов при измененном гормональном
статусе плода птиц (13, 78, 79, 80), то данных об их формировании при изменении иммунного статуса у млекопитающих животных в доступной литературе обнаружена работа Окунева П. Ю. и соавторов (1991), носящая фрагментарный характер.
Исследования по влиянию иммуномодуляторов (тимоген, В-активин и циклофосфамид) в раннем онтогенезе, малочисленны, их результаты фрагментарны и не дают полного представления (24, 29, 62), хотя и тимоген, и миелопид достаточно часто и широко в последнее время применяются в акушерской практике для лечения воспалительных заболеваний половых органов самок во время беременности (39, 41, 45, 71, 103, 113).
Анализ литературных данных (10,27,31, 53, 90,204, 212) по вопросам реактивности как центральных, так и периферических органов иммунной защиты плода на действие многих веществ, оказывающих иммуномодулирующий эффект через фетоплацентарный барьер также не дал исчерпывающей информации о морфологических и иммуногистохимических изменениях этих органов.
Вышеизложенное, показывает, что изучение постнатального органогенеза иммунокомпетентных органов и их цитоархитектоники при изменении (как при повышении, так, особенно, и при подавлении) иммунного гомеостаза через систему «мать-плацента-плод» - является весьма актуальным и представляет не только научный интерес, но имеет и определенное практическое значение.
Цель и зада*щ исследования. Настоящая работа имела цель изучить закономерности развития лимфоидных органов (тимуса, селезенки, кишечноассоциированной лимфоидной теани и морфологического состава периферической крови) у крыс при нарушении иммунного гомеостаза в системе «мать-плацента-плод», вызванного введением в различные периоды беременности экзогенных иммуномодуляторов с различным эффектом воздействия. Учитывая теоретический и практический интерес этих вопросов, мы поставили следующие задачи:

2. Собственные исследования
2. 1. Материалы и методы исследования
Работа выполнена на потомстве (новорожденные и 23-суточные крысята), полученном от самок белых беспородных крыс массой 200-250 грамм. Всего в опыте использована 81 самка, от 243 потомков, которых в суточном и 23-х дневном возрасте подвергнуты щгго - и гистологическому исследованию органы и ткани иммунной защиты. Все животные содержались на обычном виварном режиме с дачей корма один раз в сутки (между 11 и 12 часами утра).
Получение животных с датированным сроком беременности производилось без предварительного учета стадии эстрального цикла. Для этого половозрелых самок в возрасте 2-х месяцев подсаживали к самцам (из расчета 5:1) с 17 часов вечера до 10 часов утра. Первым днем беременности считали день обнаружения сперматозоидов в утреннем вагинальном мазке. Новорожденных и крысят в возрасте 23-х дней забивали декапитацией. Живую массу животных определяли с точностью до 0,01 грамма на электрических весах ВЛКТ-500-М. Массу тимуса и селезенки устанавливали взвешиванием на торсионных весах ВТ-500 с точностью до 0,001 г. Кусочки органов (тимуса, селезенки и стенки различных отделов пищеварительной трубки) фиксировали в жидкости Толес-ницки (формалин - спирт - уксусная кислота на фосфатном буфере) и по общепринятой методике заливали в парафин. Срезы толщиной 5 мкм для обзорных целей окрашивали гематоксилином Гарриса с докраской эозином. Для определения степени дифференцированное лимфоцитов выявляли нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК), применяя окраску метиловым зеленым и пиронином по Унна в модификации Ноуег Р. Е. е! а1. (1986).
Для выделения субпопуляций лимфоидных клеток использовались лектины арахиса, сои и виноградной улитки, меченые пероксидазой хрена.