Разработка параметров качества сырья наперстянки шерстистой Digitalis lanata Ehrh. Определение ланатозида С и активности эндогенных ферментов

• Автор: Балакина, Мария Владимировна
• Шифр специальности: 15.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с.

СОДЕРЖАНИЕ.
Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общая характеристика сердечных

гликозидов'

1.2. Препараты кардиотон ического действия, получаемые из сердечных гликозидов

1.3. Биологические методы стандартизации лекарственных растений, содержащих сердечные гликозиды

1.4. Сердечные гликозиды из наперстянки шерстистой

1.5. Лекарственное растительное сырье: выращивание, сбор, заготовка, хранение

1.6. Особенности переработки сырья

1.7. Реакции обмена сердечных гликозидов

1.8. Методы определения сердечных гликозидов
1.8.1. Принципы пробоподготовки сырья
1.8.2. Физико-химические методы определения сердечных гликозидов
1.8.3. Химические методы определения сердечных гликозидов
1.8.4. Хроматографические методы анализа сердечных гликозидов
1.8.4.1. Тонкослойная хроматография
1.8.4.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография
Глава 2. Объекты, материалы и методы исследования
Глава 3. Обсуждение результатов
3.1. Усовершенствование методики ВЭЖХ-анализа сырья наперстянки шерстистой
3.2. Методика определения активности эндогенных ферментов сырья наперстянки шерстистой с использованием метода ВЭЖХ

3.3. Изучение зависимости содержания ланатозида С и уровня
активности эндогенных ферментов от условий сушки и заготовки образцов
сырья наперстянки шерстистой I и II года вегетации
Общие выводы
Список литературы
Приложение

ВВЕДЕНИЕ.
Актуальность темы. Сердечные гликозиды - известная группа природных соединений, обладающая кардиотоническими свойствами. Основными представителями сердечных гликозидов, присутствующими в растении наперстянка шерстистая Digitalis lanata Ehrh. семейства норичниковых (Scrophulariaceae) являются ланатозид С, дигоксин, дигитоксин. В лечебной практике широкое распространение получили препараты, субстанциями для которых служат ланатозид С (препараты ланатозид С, целанид, лантозид и ряд других) и дигоксин, производство которых в течении десятилетий осуществляется как в России так и за рубежом.
Лист наперстянки шерстистой наряду с первичными (основной представитель - ланатозид С) и вторичными (основной представитель — дигоксин) гликозидами содержат систему ферментов, обусловливающих процесс автоферментации. При активации ферментов, присутствующих в сырье, происходит переход первичных гликозидов во вторичные (переход ланатозида С в дигоксин). Данный процесс лежит в основе получения препарата дигоксина.
В последнее время отдается предпочтение производству дигоксина, что обусловлено популярностью данного препарата у врачей и пациентов.
Главной проблемой технологии при производстве препаратов сердечных гликозидов Digitalis lanata Ehrh. является нестабильное качество сырья.
Оценку качества сырья наперстянки шерстистой проводят по содержанию (уровню накопления) ланатозида С. ФС 42-614-89 регламентирует содержание ланатозида С не менее 0,06%. Уровень активности эндогенных ферментов при оценке качества сырья и при определении путей его переработки ранее не учитывался и не

гидролизу [21]. По этой причине использование этанола в качестве экстрагента целесообразно только при получении вторичных гликозидов.
Известны способы получения первичных гликозидов путем экстракции 90% метиловым спиртом [17,23,102] и 80% метиловым спиртом [101]. Метиловый спирт применяют также в качестве экстрагента для получения вторичных гликозидов после стадии ферментации [95,120,136]. Метиловый спирт хорошо проникает через клеточные стенки растительного сырья, обладает достаточной летучестью. Однако в последние годы применение метилового спирта на стадиях экстракции растительного сырья ограничено, что связано с его токсичностью.
Использование сильнополярных растворителей приводит к извлечению наряду с основными компонентами большого количества сопутствующих веществ [21]. При использовании малополярных растворителей (этилацетат, хлороформ) содержание последних резко снижается. Согласно данным, полученным авторами [9,21,125], этилацетат представляет собой наиболее избирательный растворитель при выделении первичных гликозидов. Существенным недостатком данного растворителя в качестве экстрагента является возможность аутогидролиза с выделением свободной уксусной кислоты. Это может привести к снижению pH, что в свою очередь приводит к разрушению гликозидных связей молекулы сердечного гликозида. Для подавления данного недостатка этилацетат насыщают водным буферным раствором [39,40,90].