Изолирование лекарственных средств из плазмы крови с применением протеолитических ферментов

• Автор: Чувина, Наталия Александровна
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 146 с. : 19 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Связывание лекарственных веществ с белками крови

1Л.1 Конкурентные взаимоотношения при взаимодействии

ксенобиотиков с белками

1.1.2 Факторы, влияющие на связывание лекарственных средств

1.1.3 Участки_связывания_альбумина_длазмы_крови

1.1.4 Методы определения связанной и свободной фракции лекарственного средства с белком

1.2 Ферментативный гидролиз

1.2.1 Общие условия ферментативного гидролиза
1.2.2 Ферментативный гидролиз трипсином
1.2.3 Ферментативный гидролиз пепсином
1.2.4 Ферментативный гидролиз химотрипсином
1.2.5 Ферментативный гидролиз химопсином
1.3 Методы изолирования токсических веществ из крови
1.4 Твердофазная экстракция
1.4.1 Область применения и принцип действия ТФЭ
1.4.2 Основные стадии твердофазной экстракции
1.4.3 Оборудование для твердофазной экстракции
1.4.4 Сорбенты Waters Oasis для твердофазной экстракции
1.5 Внутрилабораторный контроль качества количественных методов лабораторных исследований с использованием контрольных веществ 40 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. МЕТОДЫ И ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Объекты исследования
2.2 Методы исследования, приборы и реактивы
2.3 ИССЛЕДОВАНИЕ СУБСТАНЦИЙ

2.3.1 Выделение оснований дифенгидрамина, хлоропирамина, клемастина, папаверина и целекоксиба из лекарственной формы
2.3.2 Исследование веществ методом тонкослойной хроматографии
2.3.3 Исследование веществ методом инфракрасной спектроскопии
2.3.4 Исследование веществ методом спектроскопии в ультрафиолетовой области
2.3.5 Исследование веществ методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором
2.3.6 Исследование фармацевтических субстанций, оснований и целококсиба выделенных из лекарственных форм методом высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 3. ИЗОЛИРОВАНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ
3.1 Моделирование комплекса «плазма крови - раствор анализируемого вещества»
3.2 Изолирование исследуемых веществ из плазмы крови методом прямой жидкость-жидкостной экстракции
3.3 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови с использованием осаждающих агентов
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 4. ПРИМЕНЕНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА ПРИ ИЗОЛИРОВАНИИ ИССЛЕДУЕМЫХ BF.T1IF.CTB ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ
4.1 Изолирование кофеина методом прямой жидкость-жидкостной экстракции из модельного комплекса с альбумином
4.2 Выбор оптимальных условий для проведения ферментативного гидролиза при изолировании исследуемых веществ
4.2.1 Гидролиз трипсином модельного комплекса
«раствор альбумина - раствор кофеина»

4.2.2 Гидролиз химотрипсином модельного комплекса «раствор альбумина - раствор кофеина»
4.2.3 Гидролиз пепсином модельного комплекса «раствор альбумина - раствор кофеина»
4.2.4 Гидролиз химопсином модельного комплекса «раствор альбумина - раствор кофеина»
4.3 Ферментативный гидролиз плазмы крови
4.3.1 Гидролиз трипсином модельного комплекса плазмы крови с анализируемыми веществами
4.3.2 Гидролиз химотрипсином модельного комплекса плазма крови с анализируемыми веществами
4.3.3 Гидролиз химопсином модельного комплекса плазма крови с анализируемыми веществами
4.3.4 Гидролиз пепсином модельного комплекса плазма крови с исследуемыми веществами
4.4 Апробация методики на экспертном материале ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 5. ИЗОЛИРОВАНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ МЕТОДОМ ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ
5.1 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови методом ТФЭ на патронах марки Oasis HLB
5.2 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови методом ТФЭ на патронах марки Oasis МСХ
5.3 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови методом ТФЭ на патронах марки Oasis WCX
5.4 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови методом ТФЭ на патронах марки Oasis МАХ
5.5 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови методом ТФЭ на патронах марки Oasis WAX ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

сорбционных и/или ионообменных процессов, протекающих в специальной колонке (картридже или диске) для ТФЭ.
Пропускание аналитов через твердые сорбенты (картриджи или диски) основано на гидрофобных, водородных или ионных взаимодействиях.
В ТФЭ используются три основных режима разделения: обращённо-фазовый, нормально-фазовый, ионный обмен.
Обращенно-фазовый режим разделения - экстракция неполярных соединений из водных образцов за счёт Ван-дер-Ваальсовых взаимодействий.
Нормально-фазовый режим разделения: экстракция полярных
соединений из неполярных органических растворителей за счёт водородных связей, диполь -дипольных и тг-тг взаимодействий.
Ионообменный режим разделения: экстракция заряженных соединений из органических или водных растворов с низкой ионной силой за счёт кулоновских взаимодействий.