Обращенно-фазный вариант тонкослойной хроматографии в химико-токсикологическом анализе ряда лекарственных средств основного характера

• Автор: Поспелова, Анна Анатольевна
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Пермь
• Количество страниц: 139 с. : 54 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Оценка распространенности отравлений лекарственными средствами на территории Пермского края
1.2. Применение тонкослойной хроматографии (ТСХ) в практике химикотоксикологического анализа отдельных групп лекарственных средств
1.3. Сравнительная характеристика нормально-фазного (НФ) и обращенно-фазного (ОФ) вариантов тонкослойной хроматографии
1.4. Пробоподготовка биологической жидкости (мочи) при химикотоксикологических исследованиях

Выводы по главе 1

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика объектов исследования

2.2. Характеристика средств измерения и реактивов
2.3. Методические основы проведения эксперимента
Глава 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК ОБНАРУЖЕНИЯ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ МЕТОДОМ ОБРАЩЕННО-ФАЗНОЙ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
3.1. ОФ ТСХ-скрининг исследуемых соединений
3.1.1. ОФ ТСХ-скрининг ряда представителей соединений группы опиатов, опиоидов, спазмолитических средств
3.1.2. ОФ ТСХ-скрининг ряда местноанестезирующих средств
3.1.3. ОФ ТСХ-скрининг ряда производных 1,4-бензодиазепина
3.1.4. ОФ ТСХ-скрининг продуктов гидролиза ряда 1,4-бензодиазепина
3.1.5. ОФ ТСХ-скрининг ряда производных фенотиазина
3.1.6. ОФ ТСХ-скрининг ряда антигистаминных средств и лекарственных средств, действующих на центральную нервную систему посредством различных механизмов
3.1.7. ОФ ТСХ-скрининг ряда антидепрессантов
3.2. Определение чувствительности различных детекторов при ненаправленном и направленном исследовании методом ОФ ТСХ
Выводы по главе 3
Глава 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК ПРОБОПОДГОТОВКИ МОЧИ НА ОСНОВЕ ЖИДКОСТЬ-ЖИД КОСТНОЙ И ТВЕРДО-ФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ ДЛЯ АНАЛИЗА МЕТОДОМ ОФ ТСХ
4.1. Пробоподготовка мочи на основе жидкость-жидкостной экстракции
4.2. Пробоподготовка мочи на основе жидкость-жидкостной экстракции в сочетании с вымораживанием
4.3. Пробоподготовка мочи на основе твердо-фазной экстракции
Выводы по главе 4

Глава 5. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ИЗОЛИРОВАНИЯ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ МОЧИ НА ОСНОВЕ ДЕНСИТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТОДОМ ОФТСХ
5Л. Характеристика степени извлечения экзотоксикантов из модельных смесей мочи при изолировании различными способами
5.2. Апробация способов пробоподготовки реальных образцов мочи с целью обнаружения лекарственных средств методом ОФ ТСХ
Выводы по главе 5
Общие выводы
Список литературы
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1. Параметры удерживания исследуемых соединений в различных хроматографических условиях (к обзору литературы) Приложение 2. Характеристика исследуемых веществ, входящих в состав лекарственных форм
Приложение 3. Протоколы расчета содержания анализируемых соединений в моче денситометрическим методом
Приложение 4. Документы по внедрению результатов научных исследований

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. В структуре отравлений химической этиологии значительную долю занимают отравления лекарственными средствами, что обусловлено их широким ассортиментом и постоянно обновляющейся номенклатурой. На основании статистических данных в отношении медикаментов, обнаруживаемых в ходе проведения экспертных исследований на территории Пермского края за период 2007-2011 гг. [4], показано преобладание соединений с основными свойствами, что обуславливает необходимость более детального изучения веществ данной группы.
Ввиду сложности клинической интерпретации отравлений в практике химико-токсикологического анализа большое значение имеет использование высокочувствительных и специфичных методов анализа [34, 35, 43].
Одним из наиболее эффективных методов при проведении скрининга «лекарственных ядов» является хроматография в тонком слое сорбента (ТСХ), достоинствами которой являются доступность, простота выполнения, экспрессность, экономичность, возможность сочетания с другими методами анализа с целью повышения качества и достоверности полученных результатов [5, 16, 30, 61, 62, 74, 75, 78, 93, 94, 99]. ТСХ предпочитают пользоваться в случаях анализа широкого спектра объектов, в том числе при проведении мониторинга лекарственных средств в биосредах при наличии минимального оснащения [10, 17, 74].
Динамика развития метода ТСХ привела к созданию новых типов сорбентов, совершенствованию способов, методических приемов и техники хроматографирования, включая подготовительные операции, расширению способов детектирования, автоматизации самого метода и процедуры обработки хроматограмм [6, 7, 17, 22, 26, 65, 70, 77, 83, 84, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 96, 100, 101].

Screen DAU производства фирмы United Chemical Technologies, США, позволяющие извлекать широкий круг соединений [29, 102].
Одним из вариантов проведения пробоподготовки объектов с последующим определением токсикологически значимых веществ и их метаболитов методом ТСХ, является система Toxi-Lab (производитель фирма Varian, США). Экстракция токсикантов из мочи осуществляется с применением специальных патентованных устройств для ЖЖЭ и ТФЭ [32, 50, 62].
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
1. Выявлено, что по Пермскому краю отравления лекарственными средствами находятся практически на одном уровне с отравлениями алкоголем на протяжении всего рассматриваемого периода (2007-2011 гг.). Их число заметно выше числа отравлений наркотическими средствами и угарным газом. Круг лекарственных средств, обнаруживаемых в ходе проведении экспертиз, был определен на основании данных токсикологического отделения ГБУЗ ПК «МСЧ № 9 им. М.А. Тверье», химико-токсикологической лаборатории ГБУЗ «Пермский краевой наркологический диспансер», ГКУЗОТ «Пермское краевое бюро судебно-медицинской экспертизы». В связи с тем, что большинство этих соединений являются веществами основного характера (вещества кислотного характера представлены фенобарбиталом), дальнейшие исследования были направлены на работу с этой группой веществ. Ввиду широкого ассортимента лекарственных средств и постоянно обновляющейся номенклатуры для повышения объективности скрининговых исследований круг анализируемых соединений был расширен.
2. Отмечено, что преимущества использования ТСХ в аналитической практике актуализируют применение этого метода в химикотоксикологическом анализе. Литературные данные подтверждают большую распространенность нормально-фазного варианта ТСХ в сравнении с обращенно-фазным вариантом. Ряд характеристик ОФ ТСХ - расширение