МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЛИМФОЦИТОВ ПРИ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

• Автор: Наумова, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 92 с. : 33 ил.

Содержание
Сокращения
ВВЕДЕНИЕ

Актуальность

Научная новизна

Практическая значимость

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Лимфопоэз

Характеристика антигенов

Проточная цитофлуориметрия

Основные принципы проточной цитофлуориметрии
Количественный анализ интенсивности флуоресценции
Общая характеристика лимфопролиферативных заболеваний
Хронический лимфолейкоз/Лимфома из малых лимфоцитов
Волосатоклеточный лейкоз
Лимфома из клеток мантийной зоны
Лимфома маргинальной зоны селезенки
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Характеристика пациентов
Материал исследования
Методы исследования
РЕЗУЛЬТАТЫ
I Анализ возможности использования МТТ для оценки плотности поверхностных рецепторов
II. Характеристика экспрессии поверхностных антигенов лимфоцитов периферической крови доноров
III. Морфоиммунологические характеристики лимфоцитов периферической крови больных хроническим лимфолейкозом
3.1 Характеристика поверхностных антигенов лимфоцитов у больных ХЛЛ в зависимости от морфологии опухолевого субстрата
3.2 Характеристика поверхностных антигенов лимфоцитов больных ХЛЛ в зависимости от стадии заболевания
IV Морфоиммунологические характеристики лимфоцитов периферической крови при В- клеточных лимфопролиферативных заболеваниях и реактивных лимфоцитозах
Реактивные состояния
Волосатоклеточный лейкоз
Лимфома маргинальной зоны селезенки
Лимфома из клеток мантийной зоны
Сравнение экспрессии СБ20 и СВ45 на лимфоцитах при ХЛЛ, ВКЛ, ЛМЗС,
И ЛКМЗ и реактивных лимфоцитозах
V. Характеристика экспрессии СБ43 опухолевыми лимфоцитами при В-клеточных лимфопролиферативиых заболеваниях
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Сокращения

АГ - антиген АТ- антитело
вкл - волосатоклеточный лейкоз
ВОЗ — всемирная организация здравоохранения
ДИ — доверительный интервал
ЛКМЗ - лимфома из клеток мантийной зоны
ЛМЗС - лимфома маргинальной зоны селезенки
ЛМЛ - лимфома из малых лимфоцитов
ЛПЗ - лимфопролиферативные заболевания
ЛСА - лимфосаркома
МАТ — моноклональные антитела
ОАК — общий анализ крови
ХЛЛ - хронический лимфолейкоз
ABC (antibody bound per cell) - количество антигенных молекул на поверхности или внутри клетки
CD (cluster differentiation) - кластер дифференцировки FITC - флюоресцеинизотиоцианат FSC - прямое светорассеивание HGB - гемоглобин
MESF (molecules of equivalent soluble fluorochrome)- молекулы эквивалентного растворимого флуорохрома
MFI (mean fluorescence intensity) - средняя интенсивность флуоресценции РЕ - фикоэритрин
РегСР - перидинин-хлорофилл протеин PLT - тромбоциты RBC (red blood cells) - эритроциты SSC - боковое светорассеивание WBC(white blood cells) - лейкоциты

ты определяются геометрией и площадью проекции клетки на плоскость, нормальную к направлению распространения светового потока. Этот эффект имеет диаграмму направленности, состоящую из нескольких лепестков, симметричных относительно оси светового потока и убывающих по интенсивности с увеличением угла дифракции. В пределах первого центрального лепестка диаграммы попадает около 85% всего рассеянного света. Рассеяние в центральном лепестке (под малым углом) используется для определения размеров клеток. Вне центрального сектора дифракции эффекты преломления становятся существенными. Преломленный свет проходит через внутренние части клетки, поэтому эффект преломления отражает структуру этих внутренних частей, а рассеяние под большими углами должно нести информацию об этих структурах. В настоящее время принято считать, что рассеяние под большими углами несет информацию о соотношении размеров ядра и цитоплазмы, а также о неоднородности - гранулярности цитоплазмы [3,122,129].
Как упоминалось выше, основное использование сигналов светорассеяния базируется на двух фактах: 1) интенсивность светорассеяния в пределах центрального лепестка диаграммы направленности (угол 1-10°) прямо пропорционально объему клетки, 2) светорассеяние под большими углами (90°) отражает внутреннюю структуру клеток и позволяет в ряде случаев проводить их типи-рование по этому параметру. Одновременное измерение рассеяния света клетками под углами ~1° и -90° (Рис.5,6) позволяет дискриминировать в лейкоцитах человека три группы - лимфоциты, моноциты и гранулоциты без какого-либо окрашивания клеток, кроме того, по сигналам светорассеяния можно различать жизнеспособные и мертвые клетки. Эти приемы прочно вошли в практику современной проточной цитофлуориметрии [159].