Влияние ауторегуляторных факторов бактерий (гомосеринлактонов и алкилоксибензолов) на лейкоциты периферической крови человека

• Автор: Свиридова, Татьяна Геннадьевна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Екатеринбург
• Количество страниц: 122 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1 - Лейкоциты периферической крови человека и регуляция их

функциональной активности

1Л - Основные характеристики функциональной активности лейкоцитов

1Л Л - Поглощение и дегрануляция

1Л.2- Кислород-зависимый киллинг

1 Л.З - Кислород-независимый киллинг

1Л .4 - Продукция цитокинов

1.2 - Регуляция жизнеспособности и функциональных характеристик лейкоцитов

факторами различного генеза
1.2Л - Иммунотропные вещества микробного происхождения
1.2.2 - Участие ауторегуляторных факторов бактерий в регуляции активности
лейкоцитов
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2 - Материалы и методы
2.1 - Общая характеристика материалов исследования
2.2. - Методы исследования
2.2.1 - Определение жизнеспособности лейкоцитов методом эксклюзии
трипанового синего
2.2.2 - Оценка развития апоптоза лейкоцитов по интенсивности накопления в лизатах клеток активированной каспазы-
2.2.3 - Оценка развития апоптоза лейкоцитов по обнаружению гистон-
ассоциированных фрагментов ДНК
2.2.4 - Изучение параметров высвобождения лактатдегидрогеназы лейкоцитов..
2.2.5 - Оценка мембранолитической активности ауорегуляторных факторов по показателям изменения осмотической резистентности эритроцитов
2.2.6 - Исследование поглотительной способности лейкоцитов при фагоцитозе..
2.2.7 - Методика оценки секреторной дегрануляции лейкоцитов

2.2.8 - Оценка люминол-зависимой хемилюминесценции лейкоцитов
2.2.9. - Моделирование окислительных процессов при фагоцитозе
2.2.10 - Оценка интенсивности продукции цитокинов
2.2.11 - Методы статистических исследований
ГЛАВА 3 - Оценка цитотоксичности гомосеринлактонов и алкилоксибензолов в отношении лейкоцитов периферической крови человека и установление механизмов гибели клеток
3.1 - Изучение цитотоксического эффекта гомосеринлактонов и
алкилоксибензолов методом эксклюзии трипанового синего
3.2 - Эффекты длинноцепочечных гомологов ГСЛ и АОБ на индукцию апоптоза лейкоцитов по накоплению активированной каспазы-
3.3 - Эффекты ГСЛ и АОБ на индукцию апоптоза лейкоцитов по обнаружению гистон-ассоциированных фрагментов ДНК
3.4 - Анализ динамики высвобождения ЛДГ в супернатантах клеточных культур лейкоцитов, обработанных ГСЛ и АОБ
3.5 - Эффекты ГСЛ и АОБ на стабильность мембран эритроцитов в тесте
осмотической резистентности
ГЛАВА 4 - Влияние гомосеринлактонов и алкилоксибензолов на функциональные характеристики лейкоцитов периферической крови
4.1 - Эффекты гомосеринлактонов и алкилоксибензолов на показатели
секреторной и поглотительной активности лейкоцитов
4.2 - Эффекты гомосеринлактонов и алкилоксибензолов на спонтанную и люминол-зависимую хемилюминесценцию нейтрофильных лейкоцитов
4.3 - Эффекты гомосеринлактонов и алкилоксибензолов на окислительные процессы при фагоцитозе
4.4 - Влияние гомосеринлактонов и алкилоксибензолов на интенсивность
продукции цитокинов моноцитами
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ
Список условных сокращений
АОБ - алкилоксибензолы;
АФК - активные формы кислорода;
ГСЛ - гомосеринлактоны;
ИЛ - интерлейкины;
ИХЛ - индекс хемилюминесценции;
ИФ - интерферон;
КСФ - колониестимулирующие факторы;
ЛИС - липополисахарид;
ЛЗ - лизоцим;
ЛФ - лактоферрин;
ЛЗХЛ - люминол-зависимая хемилюминесценция;
ТС - трипановый синий;
ФИО - фактор некроза опухолей;
ЦРК - цистоподобные рефрактерные клетки;
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота;
BPI - bacterial permeability-increasing protein (рус. - бактерицидный протеин, повышающий проницаемость микробной стенки);
QS - Quorum Sensing (рус. - Чувство Кворума).

работы НАДФ-Н-оксидазного комплекса, ответственного за синтез производных АФК (Martner, 2008) а также продукцию некоторых ферментов, таких, например, как металлопротеиназы (Cockeran, 2009).
В целом, действие продуктов микробного генеза на лейкоциты
периферической крови многогранно и затрагивает как процессы стимуляции их функциональной активности, что нашло свое применение в иммунологической практике, так и супрессии, а также гибель клеток, связанные с действием широкого круга бактериальных токсикантов.
1.2.2 - Участие ауторегуляторных факторов бактерий в регуляции активности лейкоцитов
Отдельное внимание привлекает возможность участия в регуляции
активности лейкоцитов низкомолекулярных ауторегуляторных метаболитов микробного происхождения - веществ, выделяемых всей популяцией клеток или частью ее в окружающую среду, не используемых в целях конструктивного и энергетического метаболизма, но играющих важную сигнальную роль и, таким образом, влияющих на физиологическое состояние и репродуктивные способности организмов в природных сообществах (Эль-Регистан, 2006). Данные метаболиты обеспечивают межклеточную коммуникацию и контролируют
поведение популяции в соответствии с постоянно меняющимися условиями окружения, которые составляют фон стрессорных воздействий.
Для многих типов подобных внеклеточных бактериальных ауторегуляторов известны химическая структура, феноменологические и физиологические эффекты действия, для некоторых показана функциональная активность в генетических механизмах адаптационного ответа клеток, установлена роль в регуляции стадийности развития культур бактерий, цитодифференцировке, вторичных синтезах (Бухарин, 2005). В последние годы большое внимание привлекают две группы ауторегуляторов: гомосеринлактоны (FCJI) и
алкилоксибензолы (АОБ).