Ивабрадин как субстрат-маркер активности изофермента CYP3A4

• Автор: Толкачев, Борис Евгеньевич
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 93 с. : 11 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Оценка активности ферментов метаболизма как основа персонализированного подхода к назначению ЛС

1.2. Методы оценки активности ферментов метаболизма ЛС

1.3. Роль изофермента СУРЗА4 в метаболизме лекарственных веществ, механизмы регуляции активности и клиническая значимость её оценки

1.4. Характеристика отдельных субстратов-маркёров активности

СУРЗА4

1.5.Клинико-фармакологическая характеристика препарата ивабрадин

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава 3. РАЗРАБОТКА ВЭЖХ МЕТОДА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИВАБРАДИНА И ЕГО Х-ДЕМЕТИЛИРОВАННОГО МЕТАБОЛИТА В ПЛАЗМЕ КРОВИ И МОЧЕ
3.1. Подбор условий хроматографирования ивабрадина, его метаболита и домперидона (внутреннего стандарта) в растворах
3.2. Подбор условий твердофазной экстракции исследуемых веществ из биологических проб (донорской плазмы крови и мочи)
3.3. Построение калибровочной зависимости величины аналитического сигнала от концентрации исследуемых веществ в биологических пробах (донорской плазмы крови и мочи) и валидация методики ,
Глава 4. ОЦЕНКА АКТИВНОСТИ СУРЗА4 У ДОБРОВОЛЬЦЕВ
4.1. Оценка активности СУРЗА4 исходно и после курсового приёма грейпфрутового сока
4.2. Оценка активности изоформы СУРЗА4 исходно и после курсового приёма экстракта зверобоя продырявленного
Глава 5. ОЦЕНКА АКТИВНОСТИ СУРЗА4 У ПАЦИЕНТОВ,
ПРИНИМАЮЩИХ ИНДУКТОРЫ И ИНГИБИТОРЫ ДАННОГО ИЗОФЕРМЕНТА
5.1. Оценка изменения активности СУРЗА4 у пациентов, принимавших кларитромицин
5.2. Оценка изменения активности СУРЗА4 у пациентов, принимавших карбамазепин
Глава 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

AUC СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ - area under curve, площадь под фармакокинетической кривой
CE - cumulative excretion, кумулятивная экскреция
DP - domperidone, домперидон
IVB - ivabradine, ивабрадин
MR - metabolic ratio, метаболическое отношение
N-IVB - N-desmethylivabradine, N-десметиливабрадин
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ИМТ - индекс массы тела
ЧСС - частота сердечных сокращений
ЭКГ - электрокардиограмма

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования и степень её разработанности
Одним из наиболее перспективных направлений современной клинической фармакологии является разработка и внедрение научно-обоснованных подходов к индивидуализации лекарственной терапии. Данные методы призваны стать мощными инструментами так называемой персонифицированной медицины, главная задача которой состоит в повышении эффективности и безопасности фармакотерапии с учётом факторов, способных оказывать влияние на меж- и внутрииндиви-дуальную вариабельность фармакологического ответа. Особое место среди них занимают различия в скорости биотрансформации лекарственных веществ, которая в большинстве случаев определяется активностью ферментов метаболизма [4]. Изменение последней, в свою очередь, может быть обусловлено такими причинами, как генетический полиморфизм, пол, возраст, лекарственные взаимодействия, сопутствующие заболевания и др. [8].
Установлено, что изофермент CYP3A4 участвует в метаболизме более 50% лекарственных препаратов, многие из которых являются его ингибиторами, либо индукторами [40]. Межлекарственные взаимодействия на уровне этой системы метаболизма часто становятся причиной изменения плазменных концентраций препаратов. Следствием этого может являться как снижение эффективности фармакотерапии, так и повышение риска нежелательных лекарственных реакций. Это приводит к необходимости коррекции режима дозирования [2].
Существуют два принципиальных подхода к определению активности ферментов метаболизма лекарственных веществ: гено- и фенотипирование. Феноти-пирования ферментов метаболизма лекарственных веществ заключается в оценке их активности in vivo с использованием различных маркерных субстратов [12].
На сегодняшний день в научно-исследовательской практике используются большое количество маркерных субстратов CYP3A4, среди которых распространение получили мидазолам, эритромицин, а также лидокаин (MEGX-тест). Кроме того, было предложено оценивать активность CYP3A4 путём определения эндо-

• хронические заболевания сердечно-сосудистой, бронхолегочной, нейроэндокринной системы, а также заболевания желудочно-кишечного тракта, печени, почек, крови;
• хирургические вмешательства на желудочно-кишечном тракте (за исключением аппендэктомии);
- острые инфекционные заболевания-менее-чем-за-4- недели- до начала исследова
ния;
• прием лекарственных препаратов, биологически активных добавок и нутриен-тов, оказывающих.влияние на активность СУРЗА4 (см. приложение 1) менее, чем за 30 дней до начала исследования;
• курение более 10 сигарет в день;
• необходимость приёма домперидона в момент проведения исследования.
После подписания информированного согласия проводилось клиническое обследование добровольцев, включающее врачебный осмотр, а также лабораторные тесты:
• клинический анализ крови;
« клинический анализ мочи;
• биохимический' анализ крови (общий белок, билирубин, креатинин, аспартата-минотрансфераза, аланинаминотрансфераза, щелочная фосфатаза, глюкоза, холестерин);
• ЭКГ;
• анализ на гепатит С, ВИЧ.
Скрининговые лабораторные исследования осуществляли на базе общеклинической и биохимической лабораторий НУЗ «ОКБ на ст. Волгоград-1 ОАО «РЖД». Тестирование добровольцев на гепатит С и ВИЧ проводилось на базе ГУЗ "Волгоградский областной Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями".
Развернутый общий анализ крови определяли с помощью гематологического анализатора «Sismex KX-21N» (Roche Diagnostics, Швейцария). Нормами счи-