Изучение эндотелиопротективного действия ацетилизочистозида и его комбинации с эналаприлом

• Автор: Брусник, Максим Сергеевич
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Старая Купавна
• Количество страниц: 107 с. : 17 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Патогенетические основы эндотелиальной дисфункции

1.2. Эндотелиопротективные свойства производных флавоноидов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Моделирование дефицита оксида азота введением Е-МАМЕ в сочетании с эмоционально-болевым стрессом и оценка эндотелийзависимых и эндотелийнезависимых сосудистых реакций
2.2. Проведение функциональных проб в острых экспериментах на наркотизированных крысах
2.3. Биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции
2.4. Морфологические методы оценки сердечно-сосудистых изменений при моделировании комбинированной Е-МАМЕ и стресс-индуцированной ЭД
2.5. Исследуемые химические соединения и дизайн
эксперимента
2.6. Статистическая обработка результатов исследования
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Разработка комплекса методических подходов для количественной оценки развития эндотелиальной дисфункции при введении Е-НАМЕ в сочетании с эмоционально-болевым стрессом в эксперименте с использованием результатов функциональных проб, биохимических
маркеров и результатов морфологических исследований
3.2 Исследование эндотелиопротективной активности ацетилизочйстозида и эналаприла при комбинированной Е-ИАМЕ и стресс -индуцированной модели дефицита N0 с использованием результатов
функциональных проб, биохимических маркеров и морфологических
исследований
3.3. Изучение эндотелиопротективной активности сочетанного применения ацетилизочистозида и ингибитора АПФ эналаприла при комбинированной Ь-ИАМЕ и стресс-индуцированной модели дефицита N0
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АГ - артериальная гипертензия АцХ - ацетилхолин АТФ - аденозинтрифосфат ИБС - ишемическая болезнь сердца лжд — левожелудочковое давление
+dp/dt - максимальная скорость увеличения левожелудочкового давления -dp/dt — максимальная скорость снижения левожелудочкового давления NO - оксид азота
L-NAME - N-нитро-Ь-аргинин метиловый эфир
ЭД - эндотелиальная дисфункция
чсс - частота сердечных сокращений
КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции
ГЛЖ - гипертрофия левого желудочка
АТ - ангиотензин
АД - артериальное давление
ГМК - гладкомышечная клетка
РААС - ренин - ангиотензин - альдостероновая система УЗИ - ультразвуковое исследование
ИАПФ - ингибитор ангиотензинпревращающего фермента
А К - антагонист кальция
цГМФ - циклический гуанозин - монофосфат
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидифосфат
ЛПНП - липопротеиды низкой плотности
ЛПОНП - липопротеиды очень низкой плотности
ЛПВП - липопротеиды высокой плотности
САД - систолическое артериальное давление
ДАД - диастолическое артериальное давление

pH 7,4, содержащем 0,1% азида натрия. Затем мембрану отмывали 7 раз по 10 мин в том же~ буфере. В течение часа- мембрану инкубировали с разведёнными в соотношении 1:300 вторыми антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена (goat anti-rabbit IgG antibodies, Sigma, USA). При этом неспецифическое связывание конъюгатом блокировали добавлением в буфер 5% обезжиренного сухого молока. Затем мембрану снова отмывали в фосфатном буфере (7 раз по 10 мин).
Детекцию полосы eNOS проводили методом усиленной хемилюминесценции (ECL). После отмывки в фосфатном буфере 7 раз по 10 мин мембрану обрабатывали- соответствующим раствором (ECL, Amersham), как указано производителем, экспонировали на плёнку Hyperfïlm-ECL (Amersham UK) в течение 2 ч в темноте. Полоску, соответствующую eNOS детектировали в соответствии с её молекулярной массой, устанавливаемой по сравнению с белками-метчиками. Плёнку высушивали на воздухе, полосы сканировали и рассчитывали площадь под кривой с использованием программы Total Lab. (рис. 1)
г* . —.т_|_
еЛО$, 140 Юа
+ + +... ± ±
Рисунок 1. Типичная авторадиограмма Вестерн-блота, окрашенного поликлональными антителами против еЖ)8 с последующей обработкой по методу ЕСЬ после его экспонирования с рентгеновской плёнкой «НурегШт» (Атегзйат).
2.4. Морфологические методы оценки сердечно-сосудистых изменений, при моделировании комбинированной ЕНЧАМЕ и стресс -индуцированной ЭД2.
Для морфологического подтверждения развития моделируемых патологических процессов и в комплексной оценке эффективности