Гепатопротекторные свойства флавоноидов : фармакодинамика и перспективы клинического изучения

• Автор: Доркина, Елена Григорьевна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 367 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о патогенезе токсических поражений печени. 13 Роль окислительного стресса
1.2 Механизмы действия флавоноидов и их применение при токсических нора- 36 жениях печени

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1 "

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Характеристика объектов исследования

2.2 Постановка опытов и основные экспериментальные серии

2.3 Методы исследования

2.3.1 Оценка поражения печени по биохимическим показателям
2.3.2. Оценка интенсивности перекисного окисления липидов
2.3.3. Оценка состояния эндогенной антиоксидантной системы
2.3.4 Определение активности ферментов микросомалъной системы печени
2.3.5 Оценка состояния энергетического обмена в печени
2.3.6 Определение содержания NO-радикалов методом ЭПР
2.3.7 Выделение поспгьядерной, микросомалъной и митохондриальной фракций 85 печени
2.3.8 Определение антиоксидантной активности флавоноидов в модельной сис- 86 теме
2.3.9 Изучение гистоморфологической картины печени
2.3.10 Оценка желчеобразовательной функции печени
2.4 Используемые реактивы
2.5 Статистическая обработка результатов эксперимента
ГЛАВА 3 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОЙ ДОЗЫ ФЛАВОНОИДОВ И СУ-
ХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО НА МОДЕЛИ ОСТРОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ СС14 У КРЫС
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3
ГЛАВА 4 СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОЗАЩИТНОГО ДЕЙСТ-
ВИЯ ФЛАВОНОИДОВ И СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО НА МОДЕЛИ ОСТРОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ СС14 У КРЫС
4.1 Характеристика острого поражения печени гетрахлорметаном

4.2 Сравнительная оценка эффективности и особенности гснатозащитного действия флавоноидов и сухого экстракта при остром ССІ^-генатитогепатозе ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 5 СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ ФЛАВОНОИДОВ И СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО ПРИ ОСТРОМ АЛКОГОЛЬНОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ У КРЫС
5.1. Характеристика острого алкогольного поражения печени
5.2 Сравнительная оценка эффективности и особенности гепатозащитного действия флавоноидов и сухого экстракта при остром алкогольном поражении печени
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 6 ВЛИЯНИЕ ФЛАВОНОИДОВ И СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО НА ОСНОВНЫЕ ЗВЕНЬЯ ПАТОГЕНЕЗА ОСТРОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ ЧЕТЫРЁХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ
6.1 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на про-антиоксидан гное равновесие при остром CCT-1-гепагигогена гозе
6.2 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на энергетический обмен в печени при остром ССІ4-гспатитогепатозе
6. 3 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на систему микросомального окисления в печени при остром ССІ4-генатитогепатозе ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 7 ВЛИЯНИЕ ФЛАВОНОИДОВ И СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО НА ОСНОВНЫЕ ЗВЕНЬЯ ПАТОГЕНЕЗА ОСТРОГО АЛКОГОЛЬНОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ
7.1 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на про-/антиоксидантнос равновесие при остром алкогольном поражении печени
7.2 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на энергетический обмен при остром алкогольном поражении печени
7.3 Влияние флавоноидов и сухого экстракта на систему микросомального окисления при остром алкогольном поражении печени
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ
ГЛАВА 8 ИЗУЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ ФЛАВОНОИДОВ, СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО И КАРСИЛА IN VITRO И IN VIVO И ИХ ВЛИЯНИЯ НА ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН И

МИКРОСОМАЛЫГОЕ ОКИСЛЕНИЕ В УСЛОВИЯХ НОРМЫ ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 9 ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ФЛАВОНОИДОВ НА ЭНДОТЕЛИАЛЬ- 199 НУЮ ДИСФУНКЦИЮ, ПРОДУКЦИЮ N0, ОРГАННЫЙ КРОВОТОК И ГЕ-МОРЕОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ
ГЛАВА 10 ИЗУЧЕНИЕ ЛЕЧЕБНОГО ДЕЙСТВИЯ СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ 219 ГОРОШКА ОБРУБЛЕННОГО ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ И ЕГО ВЛИЯНИЯ НА ЖЕЛЧЕОБРАЗОВАТЕЛЬНУЮ ФУНКЦИЮ ПЕЧЕНИ
10Л Изучение гепатозащитного действия сухого экстракта при хронической ал- 219 коголизацип у крыс в сравнении с карсилом
10.2 Изучение влияния сухого экстракта на развитие фиброза при хроническом 236 поражении печени ССЦ в сравнении с карсилом
10.3 Изучение биохимических показателей печени при хроническом ССІ4- 240 гепатите через 2 месяца после лечения сухим экстрактом и карсилом
10.4 Изучение влияния сухого экстракта на желчеобразовательную функцию 241 печени в сравнении с фламином и карсилом
ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 10 ЗАКЛЮЧЕНИЕ ОБЩИЕ ВЫВОДЫ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ А

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

ПРИЛОЖЕНИЕ В

ное повышение активности АлАт по сравнению с обычными мышами [437]. Подобный эффект наблюдался и у обычных мышей, получавших ингибитор iNOS (1400W). При этом у нокаутов полностью блокировалось образование 4-гидроксиноненаля и 3-нитротирозиновых белковых аддуктов. Результаты свидетельствуют в пользу того, что iNOS необходима для развития алкоголь-индуцированного гепатита через образование NO-производных прооксидантов (ONOO-). Однако L-NAME (более специфический ингибитор eNOS, чем iNOS) усиливал повреждение печени этанолом. Результаты действия ингибиторов понятны, исходя из концепции, что продукция NO eNOS оказывает защитный эффект, a iNOS — повреждающий. В эту же концепцию укладываются данные о том, что при тяжелых формах алкогольного гепатита более высокий уровень портального давления связан с увеличением содержания ADMA - эндогенного ингибитора eNOS [434], а также то, что при хроническом потреблении этанола снижается активность eNOS [465]. Последними исследованиями найдено, что при этанол-индуцированной гипоксии высвобождение NO усиливает кровоток и оказывает защитное действие. В обзоре [328] указало, что генерация N0 донорами N0 тормозит дыхание митохондрий крыс и в большей степени тех, которые получали этанол. Такая более высокая чувствительность к N0 предполагает его вклад в этанол-индуцированнуго гипоксию и снижение энергетического статуса печени. Таким образом, и в отношении АБП видно, что в зависимости от условий NO может быть либо гепатопротектором, либо потенцировать повреждение печени.
На основании приведенного обзора работ можно сделать вывод, что алкогольное поражение печени является результатом комплексного взаимодействия между метаболизмом этанола, воспалением и иммунными реакциями. При этом в патогенез алкоголь-индуцированного повреждения печени на определенных стадиях вовлечены все клеточные компоненты [472]: гепатоциты, клетки Купффера, стеллатные и эндотелиальные клетки, а развивающийся окислительный стресс, вероятно, имеет несколько источников, включая CYP2E1, митохондрии, активированные клетки Купффера. Интересной представляется рабочая модель, предложенная Dey A. and Cederbaum A.I., 2006 [328]. Этанол повышает уровень CYP2E1 (в основном путем посттрансляционных механизмов, включая стабилизацию фермента и снижение его деградации). В течение своего каталитического цикла CYP2E1 генерирует Ог~ и НгСЬ. В присутствии Fe2+, увеличение которого наблюдается при потреблении этанола, продуцируются более сильные оксиданты - ОН и HER. Вначале клетки печени отвечают на повышение продукции ROS индукцией транскрипции АО ферментов через анти-оксидант-чувствительный элемент (ARE). В конце концов, когда эти механизмы исчерпываются, клетки становятся чувствительными к CYP2E1-генерируемым оксидантам. Эти разнообразные оксиданты вызывают инактивацию ферментов, окислительное повреждение белков