Экспериментальное обоснование использования липосомальной формы эмоксипина (производного 3-оксипиридина)для коррекции ишемических и реперфузионных повреждений миокарда

• Автор: Торопова, Яна Геннадьевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Кемерово
• Количество страниц: 116 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Общие механизмы ишемического и реперфузионного повреждения сердца

1.2 Роль свободно-радикальных процессов в ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда

1.3Механизмы гибели кардиомиоцитов при ишемии и реперфузии

1.4Современный взгляд на использование антиоксидантов для коррекции окислительного стресса

1,5Фармакологические эффекты эмоксипина

1 .бВозможность использования липосомальных препаратов при ишемических и реперфузионных повреждениях миокарда

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.Эксперименты на изолированном сердце
2.1.1 Схема эксперимента
2.1.2Методика подготовки препарата изолированного сердца
2.1 .ЗМетодика перфузии изолированного сердца методом Langendorff
2.1.4Методика перфузии изолированного сердца методом Neely
2.1.5Моделирование тотальной нормотермической ишемии
2.1 .бМетодика оценки сократительной функции изолированного сердца

2.1.7Характеристика регистрируемых параметров сократительной функции изолированного сердца
2.1.8Методика оценки насосной функции изолированного сердца
2.1.9Методика измерения коронарного протока изолированного сердца
2.2Фармакологические агенты, используемые при выполнении исследования
2.2.1Приготовление липосом
2.2.2Распределение животных по сериям экспериментов
2.3Биохимические методы исследования
2.3.10пределение активности ферментов-маркеров повреждения миокарда
2.3.20пределение уровня свободнорадикальных процессов в миокарде
2.4Морфологический анализ кардиомиоцитов методом ПЖЕЬ
2.5Иммуноферментный анализ содержания оксида азота
2.6Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Влияние введения «пустых» липосом 50 и 100 нм на ишемизированный и реперфузируемый миокард
3.2Влияние введения липосом, содержащих 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл эмоксипина, на толерантность сердца к воздействию ишемии и реперфузии
3.2.1 Степень повреждения миокарда при реперфузии в условиях кардиопротекции 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формой эмоксипина

3.2.2Антиоксидантные системы миокарда при тотальной ишемии и реперфузии при введении липосом, содержащих 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл эмоксипина
3.2.3Коронарный кровоток ишемизированного миокарда в период реперфузии при введении 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина
3.2.3.1 Активность эндотелиальной ЫО-синтазы (по уровню стабильных метаболитов N0) после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина при тотальной нормотермической ишемии и реперфузии
3.2.3.2Взаимосвязь выраженности свободнорадикальных процессов в миокарде, уровня N0 и уровня коронарного протока реперфузируемого миокарда при введении липосомальной формы эмоксипина
3.2.4Сократительная функция миокарда в условиях тотальной нормотермической ишемии и реперфузии после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина
3.2.5Насосная функция миокарда крыс в условиях тотальной нормотермической ишемии и реперфузии после введения 0,1 мг/мл и 0,25 мг/мл липосомальной формы эмоксипина
ГЛАВА 4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

2.1.5 Моделирование тотальной нормотермической ишемии
Тотальную нормотермическую ишемию изолированного сердца моделировали посредством перекрывания всех перфузатнесущих магистралей на 30 минут. Сердце при этом погружали в термостатируемую (37 °С) камеру с перфузионным раствором. Общепринятым считается мнение, что режим 30-минутной тотальной нормотермической ишемии изолированного сердца приводит к необратимым ишемическим повреждениям миокарда (Palmer В. S. et al„ 2004).
Модель тотальной ишемии, выполненной на изолированном перфузируемом сердце, обеспечивает:
- полное прекращение доставки кислорода и питательных веществ и отсутствие оттока метаболитов, что позволяет полностью воспроизвести весь комплекс отрицательных электрофизиологических и метаболических изменений в миокарде, характерных для ишемии;
- возможность воспроизведения ишемии, длительность и температуру которой можно легко варьировать;
- равномерность нарушения коронарного кровотока в различных отделах миокарда, позволяющую поставить их в одинаковые условия;
- исключение влияния на сердце нейрогуморальных факторов, что дает возможность «в чистом виде» выявить характер и механизмы кардиотропного действия исследуемых веществ (Биленко М. В., 1989).
В опытах на изолированном перфузируемом сердце можно оценить именно кардиальные механизмы развития ишемических и реперфузионных повреждений сердца и возможность их коррекции с помощью исследуемых препаратов.