Прогностическое значение изменения секреции активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите

• Автор: Усанова, Елена Алексеевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 92 с. : 58 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о патогенезе острого деструктивного панкреатита

1.1.1. Участие полиморфно-ядерных лейкоцитов в патогенезе острого деструктивного панкреатита
1.1.2. Механизмы инфицирования и микробиологический пейзаж при остром деструктивном панкреатите
1.2. Современные возможности прогнозирования течения острого деструктивного панкреатита
1.3. Механизмы регуляции кислородозависимого метаболизма полиморфноядерных лейкоцитов
1.4. Методы исследования кислородозависимого метаболизма полиморфноядерных лейкоцитов

1.5. Заключение по обзору литературы

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Клиническая характеристика пациентов с острыми деструктивными панкреатитами
2.2. Используемые материалы
2.3. Методы
2.3.1. Метод приготовления бактериальных комплексных антигенов на целлофановом диске
2.3.2. Приготовление разведений бактериальных комплексных антигенов
2.3.3. Метод выделения полиморфно-ядерных лейкоцитов из цельной венозной крови
2.3.4. Метод подсчета полиморфно-ядерных лейкоцитов цельной крови в камере Горяева
2.3.5. Метод учета жизнеспособности полиморфно-ядерных лейкоцитов
2.3.6. Определение суммарной секреции активных форм кислорода
полиморфно-ядерными лейкоцитами методом люминол-зависимой
хемилюминесценции
2.3.7. Определение секреции супероксид анион радикала кислорода
полиморфно-ядерными лейкоцитами методом люцигенин-зависимой
хемилюминесценции
2.3.8. Определение влияния условий инкубации in vitro на полиморфно-ядерные лейкоциты методами люминол- и люцигенин-зависимой
хемилюминесценции
2.3.9. Определение праймирующего влияния комплексных бактериальных антигенов на полиморфно-ядерные лейкоциты методами люминол- и люцигенин-зависимой хемилюминесценции
2.3.10. Методы статистической обработки результатов
Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ и ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение влияния условий инкубации in vitro на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.2. Изучение влияния условий инкубации in vitro на секрецию активных форм
кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.3. Изучение влияния бактериальных комплексных антигенов на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.3.1. Праймирующее влияние комплексного антигена Escherichia coli на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.3.2. Праймирующее влияние комплексного антигена Staphylococcus aureus на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.3.3. Праймирующее влияние комплексного антигена Klebsiella pneumoniae на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.3.4. Праймирующее влияние комплексного антигена Pseudomonas aeruginosa на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови в норме
3.4. Изучение влияния бактериальных комплексных антигенов на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.4.1. Изучение влияния комплексного антигена Escherichia coli на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.4.2. Изучение влияния комплексного антигена Staphylococcus aureus на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.4.3. Изучение влияния комплексного антигена Klebsiella pneumoniae на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.4.4. Изучение влияния комплексного антигена Pseudomonas aeruginosa на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.5. Прогностическое значение исследования изменения секреции активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите
3.5.1. Динамическое исследование суммарной секреции активных форм кислорода и секреции супероксид анион радикала кислорода полиморфно-

ких поверхностных рецепторов как CD lib, CD14, CD15,CD16, CD17, CD18, CD 24, CD25, CD 50, CD95 у доноров [83].
На сегодняшний день проведено немало исследований праймирующего влияния различных факторов на кислородозависимый метаболизм ПМЛ у здоровых людей и животных. Среди праймирующих факторов можно выделить хемо-таксические факторы, препараты про- и противовоспалительных цитокинов, им-мунорегуляторные соединения, различные физические и химические факторы. [23; 54; 56; 64; 82; 153]. Проводилось много исследований по изучению праймирующих влияний бактерий или их отдельных компонентов. Так Marsha А. (1999) исследовал феномен респираторного взрыва в клетках и бесклеточной системе при воздействии протеина А клеточной стенки Staphylococcus aureus. В данном исследовании было показано, что дозозависимое увеличение опосредованного протеином А генерирования АФК наблюдается в покоящихся и стимулированных форбол-миристат ацетатом (ФМА) ПМЛ доноров. Причем при изучении механизма праймирующего влияния этого АГ Staphylococcus aureus на кислородозависимый метаболизм ПМЛ, выяснили, что протеин А вызывает активацию НАДФН-оксидазы ПМЛ [131]. Аналогичным образом исследовали праймирующее влияние антифагоцитарного фактора лейкоцидина Pseudomonas aeruginosa на секрецию АФК стимулированных зимозаном или ФМА кроличьих ПМЛ. Данное исследование выявило усиление кислородозависимого метаболизма клеток (наличие эффекта прайминга) в ответ на предварительную стимуляцию лейкоцидином ПМЛ, причем засчет активации МПО [124]. Увеличение секреции АФК также происходит при праймирующем воздействии на ПМЛ гликолипидами микобактерий или бактериальных ЛПС [91; 116].
Ранее в литературе были описаны случаи изучения праймирующего воздействия бактерий или их АГ на кислородзависимый метаболизм ПМЛ крови при различных инфекционных и воспалительных заболеваниях. Так Zabuska К. et al. изучали особенности секреции АФК ПМЛ крови пациентов с туберкулезом в ответ на предстимуляцию бациллой Кальметта-Герена. В результате исследований