Роль редокс-чувствительной сигнальной системы антиоксидант-респонсивного элемента в механизмах модулирования воспаления фенольными антиоксидантами

• Автор: Лемза, Анна Евгеньевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 106 с. : 28 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

AKRlc2 альдокеторедуктаза 1С2 человека

ARE антиоксидант-респонсивный элемент

BSA бычий сывороточный альбумин

СОХ циклооксигеназа

DAPI 4',6-диамино-2-фенилиндол

DCF дихлорфлуоресцин

DiOCô 3,3'-дигексилоксакарбоцианин йодид

DMSO диметилсульфоксид

Е+ этидин
ELAM молекула адгезии лейкоцитов к эндотелию, Е-селектин
EpRE электрофил-респонсивный элемент
GCLC каталитическая субъединица глутаматцистеинлигазы
GCLM регуляторная субъединица глутаматцистеинлигазы
GR глутатионредуктаза
GSH восстановленная форма глутатиона
GSSG окисленная форма глутатиона
GST глутатион-8-трансферазы
НО-1 гемоксигеназа
IFN интерферон
IL интерлейкин
1RES внутренний участок посадки рибосом
LPS липополисахарид
МТТ бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолия
NES сигнал ядерного экспорта
NLS сигнал ядерной локализации
N0 оксид азота
NOS синтаза оксида азота
NQ01 НАО(Р)Н:хиноноксидоредуктаза
PBS фосфатно-солевой буфер
PI йодид пропидия
РМА форбол-12-миристат-13-ацетат
SOD супероксиддисмутаза
tBHQ трет-бутилгидрохинон
TNF фактор некроза опухолей
ТЛЕ сайт связывания АР
ТЯХ тиоредоксин
УСАМ молекула адгезии клеточного эндотелия
ХЯЕ ксенобиотик-респонсивный элемент
АКМ активированные кислородные метаболиты
МПО миелопероксидаза
ПОЛ перекисное окисление липидов
эпо эозинофильная пероксидаза
ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Механизмы функционирования редокс-чувствительной системы антиоксидант-респонсивного элемента Keapl/Nrf2/ARE и ее роль в поддержании окислительновосстановительного равновесия in vivo
1.1.1. Гены с ARE-контролируемой экспрессией
1.1.2. Индукторы системы Keapl/Nrf2/ARE
1.1.3. Структура компонентов системы Keapl/Nrf2/ARE
1.1.3.1. Структура ARE
1.1.3.2. Структура Nrf2
1.1.3.3. Структура Keapl
1.1.4. Механизмы активации системы Keapl/Nrf2/ARE
1.1.5. Механизмы инактивации системы Keapl/Nrf2/ARE
1.2. Активированные кислородные метаболиты и их роль в развитии окислительного стресса и воспаления
1.3. Роль системы Кеар 1 /Nrf2/ARE в воспалении
1.4. Синтез и исследование антиоксидантных и биологических свойств новых водорастворимых серосодержащих фенольных соединений
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение влияния исследуемых фенольных антиоксидантов на жизнеспособность клеток в культуре
3.2. Изучение способности исследуемых фенольных антиоксидантов индуцировать ARE-зависимые ферменты в культуре клеток
3.3. Изучение влияния исследуемых фенольных антиоксидантов на способность модулировать развитие острого локального воспаления in vivo (модель 1)
3.4. Изучение способности фенольного антиоксиданта ТС-13 индуцировать систему антиоксидант-респонсивного элемента
3.4.1. Изучение влияния фенольного антиоксиданта ТС-13 на содержание глутатиона и активность глутатионредуктазы
3.4.2. Изучение влияния фенольного антиоксиданта ТС-13 на активацию транскрипционного фактора Nrf2
3.5. Изучение способности фенольного антиоксиданта ТС-13 модулировать развитие острого системного асептического воспаления in vivo (модель 2)

окислении жирных кислот в клеточных мембранах или липопротеинах крови биологически активные альдегиды, участвуют, в частности, в хемотаксисе гранулоцитов [Curzio М. et al., 1987]. Продукты ПОЛ не только стимулируют направленную миграцию нейтрофилов, но при высоких концентрациях могут и ингибировать ее [Curran R.D. et al., 1989; Dianzani M.U. et al., 1996].
Схема
Характерные реакции, протекающие при окислении углеводорода (RH) в присутствии
кислорода и ингибитора (InH)
Зарождение цепей окисления: (0) RII —> R*
Продолжение цепей окисления: (1) r* + o2->ro;
(2) ROI +RH -> ROOH +R*
Вырожденное разветвление цепей: (3) ROOH -» RO’ + *OH
(3’) ROOR’ -» RO* + *OR'
Обрыв цепей окисления: (4) R* + R* -> RR
(5) R02 + R* -> ROOR
(6) RO2 + ROÎ ->ROOR +
(7) R02 + InH -> ROOH + In*
(7') RO* + InH -> ROH + In*
(7") R* + InH -> RH + In*
(8) R02 + In* —» ROOIn
Прочие реакции с участием ингибитора (-7) ROOH + In* R02 + InH
и продуктов его превращений: (9) In* + In’ -» молекулярные продукты
(10) In* + RH -> InH + R*
(И) InH + ROOH In* + RO* + H20
(12) InH + 02 In* + HO
(13) ROOIn -» RO* + InO*
Примечание. ЯН - углеводород (липид); Я*, ЯО' и Я(>2 — соответственно алкильный, алкоксильный и перекисный (пероксидный) радикалы; ЯООН - органический гидропероксид; 1пН - ингибитор; 1п* - радикал ингибитора.
Реактивные альдегиды могут изменять активность ферментов, ингибировать действие шаперонов и модифицировать структуру апобелков в липопротеинах, взаимодействуя с сульфгидрильными и аминогруппами белков. Так, 4-гидрокси-2-ноненаль способен образовывать циклические адцукты в результате взаимодействия с аминокислотными остатками лизина, гистидина и цитозина [Лущак В.И., 2007], усиливать адгезию моноцитов, подавлять активность тиоредоксина-1, взаимодействуя с его аминокислотным остатком Суь73 [во У. et а1., 2007]. В очаге воспаления продукты ПОЛ модулируют метаболическую активность фагоцитирующих клеток (в высоких (микромолярных) концентрациях 4-гирокси-2-ноненаль ингибирует хемилюминесценцию гранулоцитов и продукцию ОТ в форболмиристатацетат- и зимозан-стимулированных клетках [ЕИапгат М.и. е1 а1., 1996; Б1 Маиго С. е1 а1., 1990], в низких же концентрациях он оказывает прайминг-эффект на продукцию ОТ гранулоцитами [П1апгаш М.и. еЧ а1., 1996]). Таким образом, подобно другим липидным модуляторам, таким как простагландин Е2, в низких концентрациях альдегиды оказывают провоспалительный эффект,