Значение субпопуляций моноцитов крови и уровня экспрессии на их поверхности активирующих рецепторов врожденного иммунитета в патогенезе неинфекционного системного воспалительного ответа

• Автор: Матвеева, Вера Геннадьевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Кемерово
• Количество страниц: 121 с. : 16 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 ЗНАЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА В ФОРМИРОВАНИИ И ПОДДЕРЖАНИИ СИСТЕМНОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОТВЕТА

(обзор литературы)

1.1 Алармины как эндогенные активаторы врожденного иммунитета и воспаления

1.2 Роль TLR 2, TLR4 в реализации стерильного воспалительного ответа

1.3 TREM-1 - особенности изолированной и совместной активации с

TLRs, значение в системном воспалительном ответе

1.4 Роль моноцитов в развитии воспалительной реакции

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Характеристика клинического материала
2.2. Определение концентрации аналитов методом иммуноферментного анализа
2.3 Определение абсолютного и относительного количества моноцитов в периферической крови пациентов
2.4 Разделение моноцитов на субпопуляции и исследование уровня поверхностной экспрессии TREM-1, TLR2 и TLR4 методом проточной лазерной цитофлюориметрии
2.5 Определение уровня внутриклеточной продукции TNFa субпопуляциями моноцитов методом проточной цитофлюориметрии
2.6 Методика стимуляции цельной крови для последующего исследования моноцитов методом проточной цитофлюориметрии
2.7 Моделирование in vitro влияния на моноциты продуктов механического повреждения миокарда, эндотоксинов и их сочетания

2.7.1 Получение гомогената ушка предсердия и цитозольной фракции кардиомиоцитов
2.7.2 Выделение и культивирование изолированных моноцитов
2.8 Определение содержания цитокинов в культивационной среде
методом СВ А
2.9 Определение уровня поверхностной экспрессии рецепторов TLR2,
TLR4 и TREM-1 стимулированных in vitro на моноцитах
2.10 Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Динамика уровня растворимой формы рецептора CD 14 (sCD14) и цитокинов, синтезированных с участием моноцитов, в сыворотке крови пациентов, подвергшихся операции коронарного шунтирования
3.1.1 Концентрация провоспалительных цитокинов (IL-6, TNFa, IL-1P)
3.1.2 Концентрация антивоспалительных цитокинов (IL-10 и IL-1RA)
3.1.3 Концентрация растворимой формы рецептора CD 14 (sCD 14)
3.2 Характеристика провоспалительных свойств моноцитов CD14h'CD16,
CD 14hiCD 16+ и CD 14dimCD 16+
3.2.1 Особенности базальной поверхностной экспрессии рецепторов
TLR2, TLR4 и TREM-1 на субпопуляциях моноцитов
3.2.2 Особенности внутриклеточной продукции TNFa субпопуляциями моноцитов при стимуляции LPS
3.2.3 Динамика субпопуляционного состава моноцитов при стимуляции
LPS in vitro
3.3 Динамика субпопуляционного состава моноцитов крови у пациентов с различными вариантами течения системного воспалительного ответа в послеоперационном периоде коронарного шунтирования
3.3.1 Динамика абсолютного и относительного содержания моноцитов
3.3.2 Динамика абсолютного и относительного содержания субпопуляций моноцитов CD14hlCD16~, CD14h'CD16+ и CD14d,mCD16+

3.3.3 Корреляционный анализ оценки по шкале SOFA и субпопуляционного состава моноцитов в раннем послеоперационном периоде коронарного шунтирования
3.4 Особенности синтеза цитокинов и поверхностной экспрессии TLR2,
TLR4 и TREM-1 при воздействии на моноциты различных стимуляторов
in vitro
3.4.1 Динамики уровня поверхностной экспрессии TLR2, TLR4 и
TREM-1 на субпопуляциях моноцитов, стимулированных LPS
3.4.2 Изучение уровня синтеза моноцитами провоспалительных цитокинов в модели, ассоциированной с инфекционной, неинфекционной и комбинированной воспалительной реакцией in vitro
3.4.3 Уровень поверхностной экспрессии TLR2, TLR4 и TREM-1 на моноцитах в модели, ассоциированной с инфекционной, неинфекционной и комбинированной воспалительной реакцией in vitro
3.5 Особенности динамики поверхностной экспрессии TLR2, TLR4 и TREM-1 на субпопуляциях моноцитов в периоперационном периоде коронарного шунтирования
3.5.1 Уровень кортизола в крови пациентов в периоперационном
периоде коронарного шунтирования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
сосудов и клапанов сердца, острая инфекция и обострение хронической инфекции, наличие злокачественных новообразований, хирургические осложнения во время операции и в послеоперационном периоде.
Распределение пациентов по возрасту и полу, а так же особенностям течения ИБС представлено в таблице 3 и 4.
Таблица 3 - Распределение пациентов по возрасту и полу (Ме (С>25%-С>75%))
Возраст Пол
мужчины женщины
абс % абс %
Пациенты п=69 62 (55-67) 50
Таблица 4 - Особенности течения ИБС у обследованных пациентов
(Ме (<325%-С>75%))
ХСН Стенокардия Артер. гипертензия
стадия абс. % ФК абс. % абс. %
Пациенты I 31 45 II 43
п=69 На 36 52 III 26 38
Нв 2 3
Операция коронарного шунтирования выполена в условиях нормотермического ИК. Время ИК составило 96 мин (80-112,5 мин), время пережатия аорты 61 мин (53-70 мин.) (Таблица 5). Количество шунтируемых артерий 2-3.
Таблица 5 - Длительность ИК и время пережатия аорты (Ме (С>25%-С)75%))
Длительность ИК (мин) Время пережатия аорты (мин)
Пациенты (п=69) 96 (80-112,5) 61(53-70)
Ретроспективно все пациенты в зависимости от варианта течения раннего послеоперационного периода были разделены на три группы (Таблица 6).