Оценка реактивности лейкоцитов при аденокарциномах желудочно-кишечного тракта

• Автор: Соснина, Анастасия Викторовна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 125 с. : 6 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АЖТК - аденокарциномы желудка и толстой кишки
ВД - высокодифференцированные клетки
ИВ — индекс влияния
ИРИ - иммунорегуляторный индекс
КРР — колоректальный рак
МНК - мононуклеарные клетки
НД - низкодифференцированные клетки
ОАА — опухолеассоциированные антигены
РЖ - рак желудка
УД - умереннодифференцированные клетки ФГА - фитогемагглютинин
HLDF (Human Leukemia Differentiation Factor) - фактор дифференцировки IL-18BP (IL-18 binding protein) - белок, связывающий интерлейкин-18 IL-IRa - рецепторный антагонист интерлейкина

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава 1. Состояние реактивности лейкоцитов при злокачественных новообразованиях (обзор литературы)
1.1 Реактивность лейкоцитов и ее зависимость от антигенных свойств опухолей
1.2 Роль цитокинов в патогенезе злокачественных новообразований
1.3 Гуморальная регуляция биологических эффектов медиаторов
воспаления и факторов дифференцировки при опухолевой прогрессии
Глава 2. Материал и методы исследования
2.1 Материал исследования
2.2 Методы исследования
2.2.1 Количественное определение популяций и субпопуляций мононуклеарных клеток
2.2.2 Определение реакции мононуклеарных клеток на опухолеассоциированные антигены in vitro
2.2.3 Определение содержания цитокинов: TNFa, IL-lp, IL-IRa, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18, IFNa, IFNy, уровней аутоантител к TNFa, IFNa, IFNy, HLDF и IL-18BP
2.2.4 Патогистологическая характеристика операционного материала 38 Глава 3. Результаты исследования
3.1 Фенотип мононуклеарных клеток и их реакция in vitro на опухолеассоциированные антигены у больных аденокарциномами желудка и толстой кишки
3.2 Содержание цитокинов в сыворотке крови и в супернатантах клеток цельной крови у больных с онкологической и неонкологической патологией желудочно-кишечного тракта
3.3 Гуморальные факторы регуляции биологических эффектов цитокинов и HLDF у больных с онкологической и неонкологической патологией желудочно-кишечного тракта

Глава 4. Обсуждение результатов исследования
Выводы
Литература

клеточную взвесь разливали в пластиковые пробирки по 50 мкл, после чего вносили по 20 мкл рабочего раствора моноклональных антител и инкубировали 30 минут при комнатной температуре, затем проводили отмывку раствором Хенкса. Далее вносили 20 мкл фрагментов антител к иммуноглобулинам мыши, меченных ФИТЦ, и продолжали инкубацию еще 30 минут. По окончании инкубации клетки дважды отмывали раствором Хенкса. Из каждой пробирки брали 10 мкл клеточного осадка, помещали на предметное стекло и покрывали покровным стеклом. Подсчет клеток производили с нефлюоресцирующей масляной иммерсией на микроскопе ЛЮМАМ И-3 при объективе 90х, окуляре 5х.
2.2.2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕАКЦИИ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК НА ОПУХОЛЕАССОЦИИРОВАННЫЕ АНТИГЕНЫ IN VITRO
В качестве ОАА применяли фетальные протеины в изотоническом растворе хлорида натрия, содержащие раковоэмбриональный антиген - 84 МЕ/мл, хорионический гонадотропин человека - 170 МЕ/мл,
нейроспецифическую энолазу - 1,35 МЕ/мл, углеводные антигены - С А 19-9 - 144 МЕ/мл и СА 125 - 512 МЕ/мл, альфафетопротеин - 172 МЕ/мл и микроглобулин человека - 4 МЕ/мл. Оценку реакции лимфоцитов на ОАА проводили в соответствии с технологией, разработанной сотрудниками лаборатории физико-химической индикации иммунных процессов НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, по изменению относительного содержания CDS'-клеток после инкубации МНК с ОАА (100 мкл, исходная концентрация белка 2,5 мг/мл) in vitro в течение 1 часа по сравнению с контрольной пробой, содержащей вместо ОАА 100 мкл раствора хлорида натрия. Для подтверждения специфичности реакции МНК на ОАА методом слепой выборки, в каждой группе пациентов, клетки параллельно инкубировали с раствором бычьего сывороточного альбумина по указанной выше методике и в той же концентрации по белку, и ни в одном случае не было отмечено подобной реакции. Во всех случаях использовался одинаковый состав ОАА.