Посттравматическая регенерация суставной гиалиновой хрящевой ткани при применении клеточно-тканевых биотехнологий (экспериментальное исследование)

• Автор: Тертерян, Маргарита Анатольевна
• Шифр специальности: 14.03.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 79 с. : 58 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава Е ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Морфо-функциональные особенности хрящевой ткани

1.2.Современные способы лечения деструктивно-дистрофических заболеваний суставов

1.3. Применение клеточных и тканевых биотехнологий в реконструктивной травматологии ортопедии

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2Л. Общая характеристика экспериментальных животных

2.2 Получение аллогенного клеточного материала для выделения клеток

2.2.1. Выращивание клеток из гиалинового хряща кроликов

2.2.2. Методы идентификации клеток, выращенных из гиалинового реберного хряща

2.3. Создание аллогенного клеточно-тканевого трансплантата.
2.3.1. Выбор матрицы носителя для клеток
2.3.2. Тканевой компонент комбинированного трансплантата
2.3.3. Получение клеточно-тканевого трансплантата
2.3.4. Методы исследования клеточно-тканевого трансплантата
2.4. Выполнение хондропластики аллогенным клеточно-тканевым трансплантатом в эксперименте на животных
2.5. Макро- и микроскопические методы исследования
2.6. Примененные методы исследования
2.7. Статистическая обработка полученных результатов
Глава 3. КЛЕТОЧНО-ТКАНЕВОЙ ТРАНСПЛАНТАТ ДЛЯ ПЛАСТИКИ
КОСТНО-ХРЯЩЕВЫХ ДЕФЕКТОВ
3.1. Клеточный компонент комбинированного трансплантата
3.2. Результаты тестирования на биосовместимость и адгезию клеток
различных пористых костных материалов
Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1 Микроскопическая характеристика костно-хрящевых дефектов без пластики
4.1.1 Костно-хрящевые дефекты без пластики через 2 недели после операции
4.1.2 Костно- хрящевые дефекты без пластики через 1 месяц после операции
4.1.3 Костно- хрящевые дефекты без пластики через 3 месяца после операции
4.1.4.Костно-хрящевые дефекты без пластики через 6 месяцев после
операции
4.2 Микроскопическая характеристика костно-хрящевых дефектов после пластики бионосителем
4.2.1 Костно- хрящевые дефекты с бионосителем через 2 недели после операции
4.2.2 Костно-хрящевые дефекты с бионосителем через 1 месяц после операции
4.2.3 Костно-хрящевые дефекты с бионосителем через 3 месяца после операции
4.2.4 Костно-хрящевые дефекты с бионосителем через 6 месяцев после
операции
4.3 Микроскопическая характеристика костно-хрящевых дефектов после пластики аллогенным комбинированным трансплантатом на различных
сроках
4.3.1 Костно- хрящевые дефекты с аллогенным комбинированным трансплантатом через 2 недели после операции

4.3.2 Костно-хрящевые дефекты с аллогенным комбинированным
трансплантатом через 3 месяца после операции
Глава 5 РЕЗУЛЬТАТЫ МАКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
КОЛЕННЫХ СУСТАВОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА ЖИВОТНЫХ
5.1. Результаты рентгенографии и компьютерной томографии коленных суставов животных
5.2 Макроскопическая оценка коленных суставов животных в динамике
5.3 Осложнения оперативных вмешательств
5.4 Оценка отдаленных результатов экспериментального исследования
5.5 Обоснование полученных результатов с позиций доказательной
медицины
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ УКАЗАТЕЛЬ

Процесс получения аллогенной деминерализованной спонгиозы включал в себя специальную ультразвуковую обработку костных тканей кролика для удаления элементов костного мозга и жира, проведение первичной стерилизации, вирусной инактивации и дезинфекции материала. После такой обработки фрагменты губчатой костной ткани лиофилизировали, затем герметично упаковывали и стерилизовали радиационным способом - быстрыми электронами на сертифицированной установке (ускоритель У - 003 с поверхностной дозой 15 кГр).
2.3.3. Получение клеточно-тканевого трансплантата
С целью получения комбинированного клеточно-тканевого трансплантата аллогенную деминерализованную спонгиозу помещали в культуральный флакон с аллогенными фибробластоподобными клетками на двое суток, по вышеуказанной методике. Посадочная доза фибробластоподобных клеток на биогенном носителе составляла 5±0,1 тысяч клеток на 1 мм3 носителя.
2.3.4. Методы исследования клеточно-тканевого трансплантата.
Клеточно-тканевой трансплантат исследовали с помощью сканирующей растровой электронной и конфокальной микроскопии Конфокальную микроскопию осуществляли с помощью конфокального оптического микроскопа и лазерного комбайна фирмы ANDOR (скорость сканирования до 25 слоев в секунду). Растровую электронную микроскопию созданных комбинированных клеточно-тканевых трансплантатов выполняли на микроскопе JEOL JSM -6390А Analysis Satation (Япония).
2.4. Выполнение хондропластики аллогенным клеточно тканевым
трансплантатом в эксперименте на животных (кролики)
Эксперименты проводили на 33 кроликах.