Оценка генетической безопасности питьевых вод, полученных неконтактной электрохимической активацией

• Автор: Зацепина, Ольга Валерьевна
• Шифр специальности: 14.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 236 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика питьевых вод, использованных для неконтактной активации

2.2. Неконтактная активация воды

2.3. Определение физико-химических показателей активированных вод

2.3.1. Определение водородного показателя, окислительно-

восстановительного потенциала и электропроводности исследуемых вод

2.3.2. Определение доли связанной (структурированной) фазы в воде
2.3.3. Определение светосуммы люминол-гемиповой
хемилюминесценции
2.3.4. Определение химического состава исходных и неконтактно активированных вод
2.4. Оценка нестабильности генома на культуре клеток крови человека
2.4.1. Проведение исследования в реконструированных средах
2.4.2. Фиксация клеток
2.4.3. Цитогенетический анализ
2.4.4. Статистическая обработка данных
2.5. Оценка частоты аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей
2.5.1. Животные
2.5.2. Цитогенетический анализ

2.5.3. Статистический анализ
2.5.4. Оценка результатов
2.6. Оценка частоты доминантных летальных мутаций в половых клетках дрозофилы
2.6.1. Постановка эксперимента и анализ результатов
2.6.2. Статистическая обработка данных
2.7. Оценка влияния неконтактно активированных вод на жизнеспособность бактерий
2.8. Объем проведенных исследований
ГЛАВА 3. АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ НЕКОНТАКТНО АКТИВИРОВАННЫХ ВОД НА ОСНОВЕ ОСМОТИЧЕСКОЙ ВОДЫ НА ПОКАЗАТЕЛИ НЕСТАБИЛЬНОСТИ КЛЕТОК КРОВИ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO
3.1. Спонтанные эффекты
3.2. Оценка чувствительности генома к действию стандартного
мутагена
3.3. Заключение по главе
ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ГЕНОТОКСИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ НЕКОНТАКТНО АКТИВИРОВАННЫХ ВОД НА ОСНОВЕ ВОДОПРОВОДНОЙ ВОДЫ
4.1. Химический состав московской водопроводной воды и неконтактно

активированных вод, полученных на ее основе

4.2. Оценка нестабильности генома на культуре клеток крови человека.
4.2.1. Спонтанные эффекты
4.2.2. Оценка чувствительности генома к действию стандартного

мутагена
4.3. Оценка генотоксических эффектов в клетках костного мозга мышей
4.4. Оценка генотоксических эффектов в (головых клетках Drosophila melanogaster
4.5. Заключение по главе

ГЛАВА 5. ИНДУКЦИЯ ЭФФЕКТОВ НЕСТАБИЛЬНОСТИ ГЕНОМА КЛЕТОК КРОВИ ЧЕЛОВЕКА НЕКОНТАКТНО АКТИВИРОВАННЫМИ ВОДАМИ НА ОСНОВЕ
БУТИЛИРОВАННОЙ ВОДЫ «ПИЛИГРИМ»
ГЛАВА 6. АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ НЕКОНТАКТНО АКТИВИРОВАННЫХ ВОД НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ Е.Соїі И ВВегеиБ
ГЛАВА 7. СИСТЕМА ОЦЕНКИ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ АКТИВИРОВАННЫХ ПИТЬЕВЫХ ВОД И ТЕХНОЛОГИЙ ИХ ПРИГОТОВЛЕНИЯ
ГЛАВА 8. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. СВЯЗЬ ЭФФЕКТОВ НЕСТАБИЛЬНОСТИ ГЕНОМА С ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИМИ СВОЙСТВАМИ НЕКОНТАКТНО АКТИВИРОВАННЫХ ВОД
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

2.3.3. Определение сиетосуммы люминол-геминовой хемилюминесценции
Метод основан на регистрации задержанного во времени хемилюминесцентного свечения гемин - люминольного реагента при добавлении в него анализируемого образца воды. Сущность метода состоит в раздельном определении активных свободно-радикальных и ион-радикальных форм кислорода в воде и возможности оценки стабильности ее структурированной фазы по кинетическим зависимостям хемилюминесценции образца [19].
Чувствительность метода составляет 10‘7 г/л по перекиси водорода. Определению не мешает наличие в воде химических загрязнителей. Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью :Ы0%.
Измерения проводили при комнатной температуре. Хемилюминометр (хемилюминесцентный анализатор жидких проб ЛИК-2) калибровали разбавленными в дистиллированной воде растворами перекиси водорода. Перед измерениями растворы слегка перемешивали без встряхивания и оставляли в затемненном (но не в темноте) месте на 20 часов.
100 мкл гемин - люминольного реагента (8 мг/л гемипа в щелочном растворе люминола, ГО 33.10.000.01) не разбрызгивая но стенкам кюветы, помещали в измерительную кювету прибора. Кюветное отделение закрывали крышкой дозатора, в которую вносили 50 мкл анализируемой воды или калибровочного раствора так, чтобы капля не касалась боковых стенок дозатора, закрывали выдвижную крышку кюветного отделения и резко нажимали на крышку для быстрого ввода пробы в реагент (чтобы не искажать кинетическую кривую хемилюминесценции время нажатия не превышало 0,2 сек). После окончания счета фиксировали светосумму люминесценции (21), амплитуду (Ам) и время выхода максимума хемилюминесценции (1м). Через 10 секунд после окончания основного счета вновь нажимали па крышку и регистрировали показания прибора 2-го цикла измерений. Каждую пробу измеряли 3-5 раз.