Консервирование лейкоцитов в условиях околонулевых температур : экспериментальное исследование

• Автор: Лаптев, Денис Сергеевич
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 99 с. : ил.

Содержание

Список использованных сокращений

Введение

ГЛАВА I. Состояние проблемы хранения лейкоцитов в условиях

околонулевых температур (обзор литературы)

1Л Структура и функциональные свойства лейкоцитов

1.2 Способы получения лейкоцитного концентрата и его применение

1.3 Особенности хранения лейкоцитов в условиях околонулевых

температур

ГЛАВА II. Материалы и методы исследований

2.1 Получение лейкоцитного концентрата

2.2 Разработка метода хранения лейкоцитов в условиях околонулевых температур (+2° ч- 0 °С)
2.3 Методы исследования функционального состояния лейкоцитов до и после хранения в условиях околонулевых температур (+2° ч- 0 °С)
2.4 Методы изучения биологических особенностей хладоограждающего
раствора
ГЛАВА III. Результаты экспериментальных исследований
3.1 Сравнительное исследование влияния трех вариантов хладоограждающего раствора на функциональные и морфологические показатели лейкоцитов, хранившихся при +2° ч- 0 °С
3.2 Изучение функциональных и морфологических особенностей лейкоцитов в зависимости от срока экспозиции в условиях +2° ч- 0 °С
3.3 Определение скорости образования продуктов перекисного окисления липидов в мембранах лимфоцитов, хранившихся при +2° ч- 0 °С
3.4 Влияние длительности хранения разработанного хладоограждающего раствора на его свойства
3.5 Биологические особенности разработанного хладоограждающего раствора

3.5.1 Испытание на «острую токсичность» разработанного хладоограждающего раствора
3.5.2 Изучение «хронической токсичности» разработанного хладоограждающего раствора
3.5.3 Определение пирогенности разработанного хладоограждающего раствора
3.5.4 Изучение переносимости экспериментальными животными трансфузий аутологичных лейкоцитных концентратов, подвергнутых охлаждению до +2° 0 °С в течение 24 часов с разработанным хладоограждающим
раствором
Глава IV. Обсуждение результатов экспериментальных исследований
Выводы
Список использованной литературы
Список работ, опубликованных по теме диссертации

Список использованных сокращений
АКМ — активированные кислородные метаболиты
ГМБТОЭМ - гексаметиленбистетраоксиэтилмочевина
ГМФШ - гексозомонофосфатный шунт
ГФ - Государственная Фармакопея
ДМАЦ — диметилацетамид
ДМСО - диметилсульфоксид
ЛД50- средняя летальная доза
JIK - лейкоцитный концентрат
ЛКБ - лизосомально-катионные белки
МДА - малоновый диальдегид
МПО - миелопероксидаза
НАДФ - никотинамиддинуклеотидфосфат
НК - нормальные киллеры
НСТ - нитросиний тетразолий
ОМЭПС - сукцинат 3-гидрокси-6-метил-2-этилпиридина (мексидол)
ПВП - поливинилпирролидон
ПОЛ - перекисное окисление липидов
СЦК - средний цитохимический коэффициент
ФАН - фагоцитарная активность нейтрофилов
ЭДТА Na2 - динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты
CDF - цитратфосфатдекстроза

увеличение продукции АКМ, появление пула каталитически активных ионов железа (II) Fe2+ и падение активности эндогенной системы ингибиторов СРР. Данное производное 3-гидроксипиридина взаимодействует с водорастворимыми радикалами и с ионами двухвалентного железа, хелатируя или окисляя их в катион железа (III) Fe3+, что уменьшает эффективную концентрацию катализатора СРР. Таким образом, в основе антиоксидантного действия ОМЭПС лежит его способность ингибировать стадию инициации перекисного окисления липидов (ПОЛ), во многом обусловленную образованием АКМ и появлением каталитически активных ионов железа (Меньшикова Е.Б. и соавт., 2006).
Также в состав раствора введен кровезаменитель «Желатиноль» - 8% раствор гидролизованной пищевой желатины в 0,9 % растворе натрия хлорида (Хлябич Т.Н., 1997). «Желатиноль» имеет существенно меньшую среднюю молекулярную массу (20000±5000 г/моль), чем желатина (от 30000-до 100000 г/моль), является нетоксичным, апирогенным, не вызывает антигенных реакций и седиментацию эритроцитов при внутривенном * введении. Желатин по своей биологической природе является денатурированным белком, полученным из коллагенсодержащих тканей, крупного рогатого скота в результате ступенчатой тепловой и химической обработки (Свиридов С.В., 1999). В настоящее время в мире применяются более 50 различных препаратов на основе желатина, обладающих слабым экзоцеллюлярным хладоограждающим эффектом. Препараты желатины наименее реактогенны, обладают буферными свойствами, не нарушают гомеостаз, улучшают реологические свойства крови, обеспечивают переход межтканевой жидкости в сосудистое русло. Их применяют в качестве коллоидной основы эритроцитсодержащих сред и как кровезамещающие препараты (Мамаев А.Е. и соавт, 1997, 1998; Селиванов Е.А., 2003). Наиболее известен в России "Желатиноль" (Gelatinolum), разработанный в Ленинградском НИИ гематологии и переливания крови в 1961 году (Свиридов С.В., 1999). Прозрачный раствор янтарного цвета со