Клиническое применение метода электропорации для выявления повреждений эритроцитов

• Автор: Казиев, Гаджибек Рагимович
• Шифр специальности: 14.01.20
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 с. : 12 ил.

Перечень сокращений, используемых в работе:
АД - артериальное давление крови,
АОС - антиоксидантная система,
АОЗ - антиоксидантная защита,
АТФ — аденозинтрифосфат.
БМЭ - большая медицинская энциклопедия,
ДД - двояковогнутые дискоциты,
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота,
НЭП - импульсное электрическое поле,
МДА - малоновый диальдегид,
МЦ — микроциркуляция,
НАДФ (Н) - никотинамидадениндинуклеотидфосфат,
ПОН - полиорганная недостаточность,
ПЖЭ - продолжительность жизни эритроцитов,
pH - отрицательный десятичный логарифм концентрации Н+,
р02 - парциальное напряжение кислорода,
СОЭ - скорость оседания эритроцитов,
Фл - фемтолитр (1015)
ФНО - фактор некроза опухоли,
ФЭК - фотоэлектрический колориметр,
ЭФПЭ - электрофоретическая подвижность эритроцитов, р - константа скорости уменьшения числа эритроцитов,
I) - оптическая плотность раствора,
НСТ - гематокрит НОВ - гемоглобин
X - относительная константа скорости гемолиза эритроцитов,
МО - оксид азота,
МСН - среднее содержание гемоглобина в эритроците,
МСНС — средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах,
МСУ - средний объем эритроцита,
Я - период полураспада клеточных мембран после воздействия импульсного электрического ПОЛЯ,
КВ С - эритроциты,
Ы)¥ — индекс морфологии эритроцитов

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Эритроцит - как модельная система для изучения нарушений мембранной структуры
1.2. Механизм гемолиза эритроцитов для оценки степени повреждения мембран
1.3. Электропорация биологических мембран
1.4. Влияние фармакологических препаратов на мембраны
эритроцитов
Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Стандартизация методики исследования
2.1.1. Суспензия эритроцитов как модельная система для исследования функционального состояния мембран
2.1.2. Измерение оптической плотности фотоколориметричес-
ким методом
2.1.3. Выявление скрытых дефектов модифицированной мембраны эритроцитов с помощью метода калиброванной электропорации
2.1.4. Влияние температуры на скорость уменьшения численности эритроцитов при воздействии на них импульсного электрического поля
2.1.5. Изменение состояния эритроцитов суспензии крови в
зависимости от времени выдержки
Глава III. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Зависимость значения порогового потенциала пробоя мембраны эритроцитов от возраста донора
3.2. Возрастные аспекты состояния мембран эритроцитов

В 1 мл рабочей суспензии находилось -14 млн эритроцитов = 14* 10б эритроцитов.
Объем эритроцитов равен У=4/3-к-Я3эр= 268-10'18 м3.
В 1 мл суспензии находится 14-106 эритроцитов, значит в линейном размере суспензии Ьсус„ = 10"2м содержится пэр = 2,4-102 эритроцитов. Так как линейный размер эритроцита составляет 1зр = 6,4-10'6 м, значит расстояние
между эритроцитами в 6,5 раз больше их размера.
Далее необходимое количество суспензии эритроцитов разливали по индивидуальным стандартным полипропиленовым пробиркам, которые термостатировали при температуре 19-20°С, что находится ниже точки фазового перехода для мембран эритроцитов, и выдерживали до проведения исследований 60 мин.
Перед каждым этапом исследования суспензию перемешивали.
После воздействия физико-химического фактора рабочая суспензия эритроцитов (2,4 мл) помещалась в кювету с электродами, на которые подавалось импульсное электрическое поле. Температура, при которой воздействовали импульсным электрическим полем была одинаковой и была равна 19-20°С.
Объем суспензии в кювете для электрического пробоя мембран рассчитан в соответствии с требованием поддержания одинакового значения электрического сопротивления в растворе.
Мембраны эритроцитов подвергали действию импульсного электрического поля (ИЭП). В качестве источника ИЭП использовали клинический дефибриллятор «ЬИерак-7», создающий в суспензии напряженность поля 1100 В/см. Энергия электрического импульса 230 Дж, длительность импульса 10 мс.
После воздействия импульсного электрического поля суспензию помещали в измерительные кюветы. Все кюветы с суспензиями хранились в одинаковых условиях.
Исследуемые образцы суспензии эритроцитов находились в четырех кюветах.