Значение молекулярно-генетических методов в диагностике и лечении рака поджелудочной железы

• Автор: Кашинцев, Алексей Ариевич
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 114 с. : 15 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ И

ТЕРМИНОВ
Введение

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Актуальность проблемы диагностики и лечения рака поджелудочной железы

1.2 Молекулярно-биологические особенности рака поджелудочной железы

1.2.1 Роль повреждения генетического аппарата в развитии рака поджелудочной железы

1.3 Современные методы диагностики рака поджелудочной железы

1.4 Хирургическое лечение рака поджелудочной железы

1.5 Химиотерапия в лечении рака поджелудочной железы
1.6 Значение молекулярно - генетических методов в диагностике и лечении рака поджелудочной железы
1.7 Роль супрессорных генов ВЫСА1, ВЯСА2 и РАЬВ2 при раке поджелудочной железы
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Характеристика исследованных больных
2.2 Оценка чувствительности различных инструментальных методов
2.3 Оценка результатов лечения больных раком поджелудочной железы
2.4 Молекулярно - генетические методы
2.4.1 Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови
2.4.2 Метод выделения РНК из парафиновых блоков
2.4.3 Реакция обратной транскрипции
2.4.4 Выделение ДНК из парафиновых блоков
2.4.5 Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
2.5 Статистическая обработка полученных данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛИНИКИ,
ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РАКА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ
ЖЕЛЕЗЫ
3.1 Анализ общей группы больных
3.2 Особенности клинического течения рака поджелудочной железы
3.3 Диагностика заболевания
3.4 Результаты хирургического лечения
3.5 Результаты химиотерапевтического лечения
3.6 Значение карбогидратного антигена С А 19-9 в диагностике и прогнозе
заболевания при лечении рака поджелудочной железы
Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОВЕДЕННЫХ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1 Анализ частоты мутации генов BRCA1, BRCA2 у больных раком поджелудочной железы
4.2 Клиническая характеристика носителей мутации генов BRCA. Опыт применения специфической химиотерапии
4.3 Анализ частоты мутации гена PALB2
4.4 Анализ экспрессии генов KRAS, PSCA, CDX2, CDH17, F5, LIPF, UGRP, UPK2, TG2
Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ И ТЕРМИНОВ
BRCA1 - ген рака молочной железы 1 (breast cancer 1)
BRCA2 - ген рака молочной железы 2 (breast cancer 2)
PALB2 - партнер и локализатор гена BRCA2 (partner and localizer of BRCA2)
KRAS - онкоген саркомы мышей, вызванный вирусом Kirsten (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog)
CA 19-9 - карбогидратный антиген 19-9 (carbohydrate antigen 19-9)
SPB - белок сурфактанта В (surfactant protein В)
PSCA - антиген стволовых клеток простаты (prostate stem cell antigen)
CDX2 - ген краниокаудальной дивергенции 2 (caudal related homebox gene2) CDH17 - кадерин 17 (cadherin - 17)
F5 - ген кодирующий простациклин (coagulation factor 5)
LIPF - ген кодирующий желудочную липазы (lipase gene)
UGRP - утероглобин- связывающий протеин (uteroglobin - related protein) UPK2 - уроплакин 2(uroplakin 2)
TG2 - тиреоглобулин 2 LPB - липофилин Б
FOLFIR1NOX - 5 — фторурацил, иринотекан, лейковорин, оксалиплатина
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
дНТФ - дезоксинуклеотидтрифосфат
кДНК — комплементарная ДНК
мРНК - матричная ДНК
п.о. - пара оснований
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РНК - рибонуклеиновая кислота
РПЖ — рак поджелудочной железы
mut - мутантный аллель
wt — аллель дикого типа (не мутантный)

повышении уровня СА 19-9, возможность выполнения радикальной операции и эффективность химиоадъювантной терапии снижается, а прогноз течения заболевания ухудшается, но показатели антигена и результаты исследований категорически разнятся (Halm U., et al., 2006; Bernhard J., et al., 2010; Chiang K., et ah, 2012).
Для улучшения диагностики с помощью онкомаркеров рекомендуется одновременно оценивать несколько различных маркеров. В исследовании R.E. Brand с соавторами 2011 год, было проанализировано 83 потенциальных биомаркера, в результате было показано, что панель, состоящая из СА19-9, ICAM-1 (молекула межклеточной адгезии 1), OPG (остеопротегерин), обладает наибольшей чувствительностью и специфичностью.
MGB (маммаглобин) — белок, относящийся к группе секретоглобинов, представляет собой гликопротеин. М.A. Watson и соавторы (1996), впервые выделили из протокового эпителия молочной железы, а его гиперпродукция отмечена при раке молочной железы. При дальнейшем исследовании экспрессию маммаглобина выявили при злокачественных образованиях легких, яичников, желчевыводящих протоков (Ouellete R.J., et ah, 2004; Siödin A., et ah, 2008; Tassi R., et ah, 2009).
Ген, кодирующий данный белок состоит из 502 нуклеотидов, имеет 3 экзона и 2 интрона, располагается в 11 хромосоме (1 lql2.3-13.1). Масса его составляет порядка 20кДа. В клетке находится зачастую в виде дидимера, данный комплекс фиксируется в мембране и способен переносить стероидные и бифинильные молекулы в клетку, поэтому в настоящее время маммаглобин рассматривают как потенциальный маркер для таргетной терапии (Carter D., et ah, 2002; Zuo L., et ah, 2009).
Для раннего выявления рака наиболее эффективно определение мРНК маммаглобина. Однако её выделение имеет ряд сложностей, из-за нестабильности м - РНК. Чувствительность и специфичность данного метода составляет 95-100% (Grünewald K., et ah, 2000)