Васкулогенная мимикрия при меланоме кожи

• Автор: Григорьева, Ирина Николаевна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с. : 20 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

Раздел 1.1. Васкуляризация опухолей и васкулогенная мимикрия

Раздел 1.2.Исследование васкулогенной мимикрии на срезах

опухолей

Раздел 1.3. Клиническое значение васкулогенной мимикрии

Заключение

Глава 2. Материалы и методы исследования

Раздел 2.1. Методы исследования васкулогенной мимикрии на

клеточных линиях метастатической меланомы кожи человека
Раздел 2.2. Методы исследования васкулогенной мимикрии in vivo ...43 Раздел 2.3.Методы исследования васкулогенной мимикрии
на парафиновых блоках больных меланомой кожи
Раздел 2.4. Статистический анализ
Глава 3. Результаты собственных исследований
Раздел 3.1. Способность клеточных линий метастатической
меланомы кожи к васкулогенной мимикрии
Раздел 3.2. Создание модели васкулогенной мимикрии
Раздел 3.3. Исследование васкулогенной мимикрии на
парафиновых блоках меланомы кожи
Глава 4. Обсуждение результатов исследования
Заключение
Выводы

Список использованной литературы
Список сокращений
• ЭК - эндотелиальные клетки
• СПС - сосудисто-подобные структуры
• ВМ - васкулогенная мимикрия
• VEGF-A - фактор роста эндотелия сосудов
• VEGFR-1 - рецептор фактора роста эндотелия сосудов 1-ого типа
• VEGFR-2 - рецептор фактора роста эндотелия сосудов П-ого

• PAS - окрашивание - Periodic-Acid-Shiff (периодическая
кислота и реактив Шиффа)
• bFGF - основной фактор роста фибробластов
• HGF — фактор роста гепатоцитов
• TGFpi- фактор роста опухолей бета
• TNFa - фактор некроза опухолей альфа
• PBS - фосфатно-солевой раствор
• DMSO - диметилсульфоксид
• BCIP/NBT - 5-бромо-4-хлоро-3-индоксил фосфат
• DAB - 3-диметиламинобензидин тетрахлорид
• АЕС - З-амино-9-этилкарбозол
• МПМ - максимальная плотность микрососудов
• ПМ-ВМ - плотность микрососудов в зоне васкулогенной
мимикрии
• Сох-2 - циклооксигеназа-
• CD - кластер дифференцировки
• VE-кадхерин - молекула клеточной адгезии
• TYRP1 - белок, связанный с тирозиназой
• NOTCH - фактор дедифференцировки
• МСАМ — молекула адгезии меланомных клеток
• MITF — транскрипционный фактор, ассоциированный с
микроофтальмией

Глава 2. Материалы и методы
Раздел 2.1 Методы исследования васкулогенной мимикрии на клеточных линиях метастатической меланомы кожи человека
Культивирование клеточных линий
В работе использовали клеточные линии метастатической меланомы кожи, полученные в лаборатории экспериментальной диагностики m биотерапии, опухолей НИИ ЭДиТО из метастататических лимфатических узлов пациентов, находившихся на лечении в НИИ Клинической Онкологии: mel Cher, mel Р, mel Mtp, mellbr, mel Ksen, mel Kor, mel Gus, mel R, mel:ME, mel Ch, mel II, mel Ml, mel Si, mel BGF, mel RZ84 [4], прошедшие не менее 30 пассажей до проведения исследования. Линия me Wo получена из американской коллекции клеточных культур (АТСС), также представляет собой клеточную линию меланомы кожи, полученную из метастатического лимфоузла. Клеточная линия эндотелиальных клеток мыши SVEC-4-10 использовалась в качестве положительного контроля формирования сосудистоподобных структур.
Культивирование клеточных линий метастатической меланомы кожи проводили во флаконах (Costar) объемом 25 см2 в полной культуральной среде RPMI, содержащей 10% телячьей эмбриональной сыворотки, 2тМ/мл L-глутамина, стрептомицина или гентамицина (100 мкг/мл). Для проведения экспериментов по формированию сосудистоподобных структур пересадку клеточных линий осуществляли- при достижении 70-80% монослоя с помощью раствора Версена или трипсина.
Клеточную линию SVEC-4-10 культивировали в среде DMEM, содержащей 10% телячьей эмбриональной сыворотки, 2тМ/мл L-глутамина, стрептомицина или гентамицина (100 мкг/мл).