Функциональное состояние перитонеальных макрофагов и влияние на него in vitro препарата глюкозаминилмурамилдипептида (ГМДП) у женщин с наружным генитальным эндометриозом

• Автор: Елисеева, Мария Андреевна
• Шифр специальности: 14.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Иваново
• Количество страниц: 128 с. : 11 ил.

СОДЕРЖАНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Современные представления о патогенезе наружного генитального эндометриоза

1.2. Роль эндометриальных факторов в развитии наружного генитального эндометриоза

1.3. Функциональное состояние перитонеальных макрофагов у женщин с наружным-генитальным эндометриозом и существующие

подходы к, его коррекции

Глава 2’. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Организация работы и объем исследований

2.2'. Методы исследования
Глава 3. СРАВНИТЕЛЬНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ
ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ЖЕНЩИН
Глава - 4. ХАРАКТЕРИСТИКА ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ С КЛЕТКАМИ ЭНДОМЕТРИЯ ПРИ НАРУЖНОМ ГЕНИТАЛЬНОМ ЭНДОМЕТРИОЗЕ
4.1. Характеристика экспрессии функциональных и SR молекул перитонеальными макрофагами у женщин с наружным генитальным эндометриозом
4.2. Особенности экспрессии функциональных и SR молекул на поверхности перитонеальных макрофагов после их взаимодействия in vitro с эутопическим эндометрием при наружном генитальном эндометриозе
4.3. Характеристика экспрессии мРНК HSP27 молекул в

эндометрии женщин с наружным генитальным эндометриозом
4.4. Характеристика экспрессии мРНК HSP27 молекул клетками эндометрия после их взаимодействия in vitro с перитонеальными макрофагами при наружном генитальном эндометриозе
Глава 5. ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ IN VITRO ПРЕПАРАТА ГМДП НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ ЖЕНЩИН С НАРУЖНЫМ ГЕНИТАЛЬНЫМ ЭНДОМЕТРИОЗОМ И ВОЗМОЖНОСТЬ ЕГО НАПРАВЛЕННОГО ТРАНСПОРТА В КЛЕТКИ С ПОМОЩЬЮ НАНОСИСТЕМЫ
5.1. Изменение экспрессии функциональных и SR-молекул перитонеальными макрофагами женщин с наружным генитальным эндометриозом под действием препарата ГМДП

5.2. Влияние in vitro транспортной наносистемы на основе препарата ГМДП и диоксида кремния на экспрессию функциональных и SR-молекул перитонеальными макрофагами при
наружном генитальном эндометриозе
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АПТЭС - аминопропилтриэтоксисилан ВМК - внутриматочная контрацепция
ГМДП - глюкозаминилмурамилдипептид ДБЖ - дезоксирибонуклеиновая кислота ИФА - иммуноферментный анализ
кДНК - комплементарную дезоксирибонуклеиновая кислота
КОК - комбинированный оральный контрацептив
мАТ - моноклональные антитела
МНК - мононуклеарных клеток
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
НМФ - нарушение менструальной функции
НСТ- нитросиний тетразолий НЦЦ - нейроциркуляторная дистония ОТ - обратная транскрипция ПЖ - перитонеальная жидкость
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РГ -рилизинг-гормон
УЗИ - ультразвуковое исследование
ЭКГ -электрокардиограмма
AFS - американское общество фертильности
Всі - В-клеточная лейкемия CD - кластер дифференцировки Fas - синтетаза жирной кислоты
FITC - флюоресцеин изотиоционат HLA - комплекс гистосовместимости
HLA-DR - антигены главного комплекса гистосовместимости
эндометриальной ткани культивировали в присутствии аутологичной перитонеальной жидкости, разведенной культуральной- средой КРМЫ640 в соотношении 1:1 в тех же условиях. После окончания срока культивирования' проводили разделение фрагментов, эндометриальной ткани и фракции перитонеальных макрфоагов путем фильтрации через1 стальную мелкоячеистую сетку. Ткань эндометрия дважды отмывали в фосфатносолевом' буфере и фиксировали для выделения из ткани тотальной РНК и проведения ОТ-ПЦР: Макрофаги, полученные после совмегсной инкубации с аутологичным эндометрием, отмывали с среде ИРМ! 1640 и метили мАТ для-проведения цитометрических исследовании. Показатели ткани эндометрия; и чистой популяции перитонеальных макрофагов, которые культивировались в тех же условиях только в среде ЯРМ1 1640, использовали! в* качестве контроля.
Определение влияния препарата ГМДП на уровень экспрессии функциональных рецепторов перитонеальными макрофагами женщин с наружным генитальным эндометриозом
Для определения- влияния ГМДП (глюкозаминилмурамилдипептида), входящего в состав препарата Ликопид, на функциональное состояние перитонеальных макрофагов, обогащенную популяцию макрофагов , женщин с наружным генитальным эндометриозом инкубировали в среде КРМ1 1640, содержащей ГМДП в концентрации 2 мкг/мл в течение 24 часов при 37°С и 5% С02. Кроме того, ГМДП добавляли в совместную культуру
перитонеальных макрофагов с аутологчиным эндометрием. Показатели макрофагов, инкубировавшихся в тех же условиях только в среде КРМ1 1640, использовали в качестве контроля. После окончания срока культивирования макрофаги отмывали в среде ЛРМ! 1640 в течение 10 мин и затем определяли экспрессию поверхностных рецепторов-с помощью моноклональных антител методом проточной цитометрии.