Стандартизация и валидация методов ракетного иммуноэлектрофореза и иммуноферментного анализа при контроле качества медицинских биологических препаратов

• Автор: Устинникова, Ольга Борисовна
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 144 с. : ил.

ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1. Валидация аналитических методов
1.2. Стандартные образцы
1.3. Культуральные вирусные вакцины
1.3.1. Бычий сывороточный альбумин
1.4. Вакцины против брюшного тифа
1.5. Методы контроля качества МИБП, основанные на реакции преципитации
ГЛАВА 2. Материалы и методы
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение
ЗЛ. Валидация метода ракетного иммуноэлектрофореза, применяемого для определения содержания Ви-антигена в брюшнотифозной вакцине «Вианвак» и аттестация ОСО содержания Ви - антигена
3.2. Валидация метода ракетного иммуноэлектрофореза для определения БСА с применением сыворотки против белков сыворотки рогатого скота
3.3. Валидация ИФА тест-системы «Immunoenzymetric Assay for the Measurement of В SA», производства «Cygnus Technologies, Inc.», USA
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ
Развитие медицины, широкое внедрение медицинских биологических препаратов, новые критерии обеспечения жизнедеятельности человека предъявляют повышенные требования к безопасности и качеству биофармацевтических продуктов.
В технологической практике одним из важнейших документов, определяющих требования к производству и контролю качества лекарственных средств для человека, являются «Правила производства лекарственных средств» - «Good Manufacturing Practice for Medicinal Products (GMP)».
Правила GMP устанавливают требования к системе управления качеством, контролю качества, персоналу, помещениям и оборудованию, документации, производству продукции, проведению анализов и др.
Валидация (аттестация) - одна из составляющих частей GMP, проведение которой показывает, что поддерживающие системы, оборудование, процессы и методы контроля находятся на должном уровне и, поэтому, производимая продукция отвечает заложенным в нормативной документации требованиям качества.
Методы контроля являются частью системы обеспечения качества, отражающей адекватность функционирования всей системы производства.
Необходимость валидации методов контроля МИБП определена международными документами (74,75), рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) (53,54), а также отечественными нормативными документами (6,14,46).
Для того чтобы аналитическая методика заняла свое место в системе качества, соответствовала своему назначению, то есть гарантирова-

ла результаты с установленной точностью, требуется ее валидация. Разработка принципов валидации методов контроля для установления их характеристик и показателей точности, является актуальной задачей.
Имеющиеся в литературе рекомендации по валидации количественных методов контроля указывают перечень необходимых для установления характеристик, но не устанавливают алгоритм проведения процесса валидации (74,75,100). Разнообразие МИБП и методов их контроля допускает различия в процедуре валидации, однако разработка общих принципов валидации количественных методов является важнейшим моментом этой процедуры для аналогичных методов контроля.
При контроле качества МИБП важное место занимают отраслевые стандартные образцы, являющиеся необходимой метрологической составляющей системы качества, особенно при отсутствии международных или государственных стандартных образцов.
Существующая сегодня нормативная база, определяющая порядок аттестации стандартных образцов, предполагает использование в процессе получения аттестованного значения стандартного образца десяти квалифицированных лабораторий, что, как правило, невозможно обеспечить при аттестации отраслевых стандартных образцов МИБП ввиду ограниченной области их применения.
Определение порядка аттестации отраслевых стандартных образцов в условиях ограниченного числа квалифицированных лабораторий, разработка принципов валидации количественных методов контроля является основой совершенствования системы обеспечения качества и безопасности биофармацевтической продукции.
Проведение контроля качества МИБП в соответствии с международными правилами и требованиями нормативной документации с целью недопущения недоброкачественных препаратов до потребителя является основой политики в области качества препаратов, курируемых ФГУН ГИСК им. Л.А.Тарасевича. В связи с чем, изучение вопросов стандарта-

В набор тест-системы входит:
- планшет с сорбированными аффинно очищенными кроличьими антителами к БСА;
- овечьи поликлональные антитела к БСА, конъюгированные с пе-роксидазой хрена;
- готовые калибранты с концентрацией БСА 0,5; 2,0; 8,0; 32,0 нг/мл.
- ТМВ-субстрат: 3,3’, 5,5’-тетраметилбензидин;
- стоп раствор 0,5N H2SO4;
- концентрат (20-кратный) раствора для отмывания планшетов.
2. Вакцина паротитная серии 0328, 0329, 0330 и полуфабрикат па-ротитной вакцины (после осветляющей фильтрации) серии 00115, 00116, 00117 производства филиала ФГУП «Микроген» Московского предприятия по производству бактерийных препаратов.
3. Растворитель для образцов BSA Sample Diluent, Cygnus Technologies, Product № F031A, Lot № 21044.
4. 1 %-ный агарозный гель, приготовленный из Agarose-M, LKB, 2206-101, Lot. 6391.
5. Трис-боратный буферный раствор pH 8,6-8,8;
6. Сыворотка преципитирующая белки сыворотки крови рогатого скота (СРС) адсорбированная кроличья диагностическая для судебно-медицинских целей жидкая, производство ФГУП Санкт-Петербургский НИИВС, серии 2, 4 и 17, с титром антител 1:10000. Сыворотку против СРС использовали в разведении 1:100.
7. Бычий сывороточный альбумин (Albumin, bovine., Sigma., А-4503, Lot 98F-0047.
8. Субстанция (полуфабрикат) вакцины «Вианвак», производство ООО «Гритвак», серии 151003, 161002, 170902, 181, 200. Субстанция вакцины «Вианвак» представляет собой Vi-полисахарид очищенный, лиофильно высушенный.