Иммунологическая реактивность, плоидность и кинетика клеточного цикла клеток периферической крови при различных патологических состояниях у детей

• Автор: Хисамова, Назиля Фагильевна
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 106 с. : 19 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
Введение
Глава 1 Обзор литературы
1.1. ДНК - цитометрия как один из методов
изучения клеточного цикла
1.2. Жизненный цикл клетки
1.3. Факторы, влияющие на клеточный цикл
Собственные исследования
Глава 2 Материалы и методы исследований
2.1 Обследованный контингент
2.2 Методы исследований
Глава 3 Результаты комплексного обследования детей
контрольной группы
Глава 4 Результаты комплексного обследования детей
с врождёнными пороками развития мочеполовой
системы
Глава 5 Результаты комплексного обследования детей
с хроническими гломерулонефритами
Глава 6 Результаты комплексного обследования детей с доброкачественными и злокачественными
опухолями головного мозга и острыми лейкозами
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы
•Оги-

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
Ig А - иммуноглобулины класса А Ig G - иммуноглобулины класса G Ig М - иммуноглобулины класса М АГ - интиген АТ - антитело
ВОЗ - всемирная организация здравоохранения B-OJIJI - острый В-лимфобластный лейкоз ВНР - врожденный порок развития
ВНР МПС - врождённые пороки развития мочеполовой системы
ЕКК - естественные киллерные клетки
ИКК - иммунокомпетентные клетки
ИРИ - иммуннорегуляторный индекс
КР - клубочковая реабсорбция
КФ - клубочковая фильтрация
МКАТ - моноклональные антитела
МПС - мочеполовая система
ОАК - общий анализ крови
ОАМ - общий анализ мочи
ОМЛ - острый миелоидный лейкоз
РДКБ - Республиканская детская клиническая больница
РФ - Российская Федерация
CD - кластеры дифференцировки
СОЭ- скорость оседания эритроцитов
ФИТЦ - флюоресцеин - 5 - изотиоцианат
ФЭ - фикоэритрин
ХГН - хронический гломерулонефрит ХПН - хроническая почечная недостаточность ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Комплексный подход к изучению процессов протекающих в иммуноком-петентных клетках и характеристика взаимосвязей между различными звеньями системы иммунитета определяют перспективные направления клинической иммунологии. Физиологическое состояние клеток, способность к осуществлению присущих им функций характеризуется, в частности, уровнем ДНК (пло-идностью) и показателями кинетики клеточного цикла. Для объективной оценки этих параметров широкое распространение получает проточная цитофлуо-риметрия, разделом которой является ДНК-цитометрия [Saha I. et al., 2000]. По прогнозам специалистов [Шмаров Д.А., Козинец Г.И., 2004], в самом ближайшем будущем можно ожидать внедрения проточной ДНК-цитометрии в практику работы клинико-диагностических лабораторий.
Согласно консенсусу по стандартизации методов проточной цитометрии, созданному по инициативе Совета Европейского Общества Целлюлярной Аналитической Патологии, материалом для определения плоидности клеток и кинетики клеточного цикла могут быть клетки крови, костный мозг, хирургические биоптаты, жидкости тела [Ormerod M.G., Tribukait В., 2001]. К настоящему времени большое количество научных работ посвящено изучению особенностей плоидности и клеточного цикла в биоптатах органов и тканей [Rytwinski К., Wnuk A. et al., 1999; 2000; Tsuji Y. et al., 2000; Garci'a-Escudero A. et al., 2001; Both C.T. et al., 2001; Wnuk A. et al., 2001; Takes R.P. et al., 2002; Driemel O. et al., 2005].
Наряду с ДНК-цитометрией биоптатов развивается направление, включающее оценку функционального состояния иммунной системы с использованием качественных параметров клеток, участвующих в иммунном ответе. Так, методом проточной ДНК-цитометрии исследовалось функциональное состояние иммунокомпетентных клеток и пролиферативная активность лимфоцитов цельной крови при сочетанной травме. В условиях инкубации с митогенами и специфическими антигенами было установлено угнетение функции лимфоци-

Определение иммуноглобулинов классов А, М,С в сыворотке крови
Метод радиальной иммунодиффузии в геле [МапсЫш О. Щ а1.,1965] основан на измерении диаметра кольца преципитации, образующегося при внесении исследуемой сыворотки в лунки, вырезанные в слое агара с предварительно диспергированной моноспецифической сывороткой. Содержание иммуноглобулинов определяли относительно контрольной сыворотки крови человека с известной концентрацией иммуноглобулинов.
При количественном определении иммуноглобулинов пользовались компьютерной программой « Иммуноглобулин» в режиме 8 С-4.
Определение уровня циркулирующих иммунных комплексов
Принцип метода основан на том, что в растворе полиэтиленгликоля (МВ-6000) циркулирующие иммунные комплексы преципитируют и вызывают помутнение раствора [Имельбаева Э.А. и др., 2006]. Степень помутнения зависит от содержания ЦИК сыворотке. Измерение оптической плотности раствора проводится на спектрофотометре [Федосеева В.Н. и др., 1993; Мешкова Р.Я., 1996].
Статистические методы
Статистическую обработку результатов исследования проводили в операционной среде «'Шпботге-ХР» с использованием современных пакетов прикладных программ «8ТАТ18Т1СА 6.0».
Для показателей, имеющих нормальное распределение признака, вычислялись среднее арифметическое значение (М) и стандартная ошибка среднего значения (ш). Для показателей, не имеющих нормального распределения, вычислялись медиана и интеркартильный размах (25 - 75 перцентили). Достоверность различий оценивалась по критерию Манна-Уитни. Корреляционный анализ выполнялся по методу Спирмена с определением коэффициента ранговой корреляции (гй). Значения р < 0,05 приняты статистически значимыми. [Гланц С., 1999].