Детекция и мониторинг специфической реаранжировки генов иммуноглобулинов в процессе лечения острых лимфобластных лейкозов

• Автор: Давидян, Юлия Рубеновна
• Шифр специальности: 14.00.29
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 0 с. : 143 ил.

Содержание.

Список используемых сокращений

Введение

Глава 1 Обзор литературы

Гпава 2 Материалы и методы исследования

2 1 Описание протоколов терапии острых лимфобластных лейкозов

2.1.1. Протокол «ОЛЛ-2005»

2.1.2. Протокол «Рб+ОЛЛ с Гпивеком»

2.1.3 Протокол «АИ-МВ2002»

2 2 Клинико-лабораторные исследования

2 3. Характеристика больных

2.4 Методы исследования
2.4.1. Выделение ДНК
2 4 2 ПЦР с семейств-специфичными праймерами
2.4.3 Анализ ПЦР продуктов
2 4 4 Выделение и секвенирование полученных ПЦР продуктов
2 4 5 Синтез пацивнт-специфичных праймеров
2 4 6 ПЦР с пациент-специфичными праймерами
2 5 Статистический анализ полученных данных
2 6 Основные понятия
2 7 Схемы программ химиотерапии
Гпава 3. Результаты и их обсуждение
3.1. Результаты лечения больных ОЛЛ по протоколу «ОЛЛ-2005» и их обсуждение
3 2 Результаты лечения больных ОЛЛ по протоколу «Рб+ОЛЛ с Гпивеком" и их
обсуждение

3.3 Результаты лечения больных ОЛП по протоколу «АЦ--МВ2002» и их
обсуждение
3 4 Результаты детекции реаранжировок генов 1дН и ТСЛв у больных

3 5 Мониторинг минимальной резидуальной болезни
Глава 4 Заключение
Выводы
Список использованной литературы

Список используемых сокращений:

т-олл
t(9;22)
Ph+ ОЛЛ
bcr-abl

MLL-AF
STI517

GALGB
GMALL PETHEMA ГНЦ РАМН

FISH
D-FISH

ОТ-ПЦР

N-конец
V-ген
С-ген
J-ген
острый лимфобластный лейкоз Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз транслокация (9;22)
острый лимфобластный лейкоз с транслокацией (9;22) химерный транскрипт транслокации (9:22) ген абельсон на 22 хромосоме химерный транскрипт транслокации (4:11)
Гливек, ингибитор ABL-тирозинкиназы кластер дифференцировки лактатдегидрогеназа
интернациональная исследовательская группа Berlin-Frankfurt-Munster
американская группа В исследователей по изучению рака и острых лейкозов
немецкая группа исследователей
испанская группа исследователей
Гематологический Научный центр Российской Академии
Медицинских Наук
минимальная резидуальная болезнь
флюоресцентная гибридизация in situ
двойная флюоресцентная гибридизация in situ
полимеразная цепная реакция
полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией
дезоксирибонуклеиновая кислота
рибонуклеиновая кислота
полиэтиленгликоль
центральная нервная система
иммуноглобулин
Т-клеточный рецептор
аминоконец протеина (NH2)
ген вариабельного региона
ген константного региона
соединительный ген

Репертуар используемых УН-семейств в опухолевых клетках при ОЛЛ и ХЛЛ в основном соответствует нормальному репертуару В-лимфоцитов. Преобладание /НЗ-сегментов в клонально перестроенных 1дН при В-линейном ОЛЛ и ХЛЛ обусловлено наибольшей представленностью этого семейства среди функциональных реаранжирующихся УН-генов (см таблицу 2). Однако, как и для многих других лимфопролиферативных заболеваний, для ОЛЛ характерна некоторая избирательность в использовании отдельных УН-сегментов Наиболее ярко выраженной особенностью опухолевых клеток при ОЛЛ является аномально высокая частота реаранжировок с участием УН6-1 сегмента Этот единственный функциональный представитель семейства УН6 в нормальном репертуаре встречается весьма редко Достоверно более частое участие /Н6-сегмента в реаранжировках гена 1дН при В-линейном ОЛЛ у детей и взрослых, по всей вероятности, связано с проксимальным расположением этого сегмента по отношению к точке соединения и участием его в реаранжировке в первую очередь [79, 80]
Выбор мишеней для анализа реаранжировки генов ТСК при Т-линейном ОЛЛ зависит от целей исследования. Оптимальной мишенью для определения клональности или МРБ является ТСРКЗ-локус [105, 149] Это связано, во-первых, с высокой частотой (около 100%) реаранжировок этого локуса при Т-линейном ОЛЛ Во-вторых, перестроки этих генов очень стабильны и не меняются при прогрессии заболевания [149]
При этом перестройки генов 1д и ТСИ могут встречаться при различных иммунологических вариантах ОЛЛ Лейкемическая трансформация происходит в ранних лимфоидных предшественниках, которые, по-видимому, не утратили способность осуществлять реаранжировку генов как 1дН. так и ТСИ Так, например, мониторинг реаранжировки генов ТСИО, ТСЯВ и ТСРЭ часто используют в многоцентровых исследованиях по анализу МРБ, так как перестройки этих генов обнаруживаются не только при Т-ОЛЛ, но и при В-ОЛЛ [48]. По результатам последних исследований частота кросс-линейных перестроек генов ТСИ при В-линейном ОЛЛ оказалась неожиданно высокой - до 93% [146] Реаранжировка генов ТСИВ, ТСИО и ТСИй может быть выявлена в 35%, 60% и 90% соответственно Большинство реаранжировок ТСИВ при В-линейном ОЛЛ являются моноаллельными полными перестройками Биаллельные реаранжировки ТСИО происходят примерно в 2 раза чаще, чем моноаллельные В отличие от кросс-линейных реаранжировок ТСИ при В-линейном ОЛЛ