Роль компонентов сфингомиелинового цикла в развитии экспериментального рака печени

• Автор: Зайнагетдинов, Ринат Закуанович
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 123 с. : 13 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Регуляторная роль липидов в клетке
1.1.1. Роль компонентов сфингомиелинового цикла в жизнедеятельности клеток
1.1.1.1. Сфингомиелиновый цикл - структура, функции
и локализация
1.1.1.2. Роль компонентов сфингомиелинового цикла в процессах канцерогенеза
1.1.1.3. Экспериментальные попытки регуляции роста опухолей при воздействии на содержание компонентов
сфингомиелинового цикла
1.2. Применение липосом в медицине и фармакологии
1.3. Экспериментальная модель гепатоцеллюлярной
карциномы при введении Ы-диэтилнитрозамина
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Моделирование гепатоцеллюлярного рака у крыс
2.2.2. Схема проведения эксперимента
2.2.3. Получение гомогената печени
2.2.4. Определение содержания компонентов сфингомиелинового цикла в печени крыс методом тонкослойной хроматографии
2.2.4.1. Разделение сфинголипидов методом тонкослойной
хроматографии
2.2.5. Определение активности фосфолипазы А2
2.2.6. Определение активности фосфолипазы В

2.2.7. Определение белка микробиуретовым методом
2.2.8. Определение содержания ТБК-активных продуктов ПОЛ
2.2.9. Определение активности каталазы
2.2.10. Регистрация апоптоза методом оценки фрагментации ДНК
2.2.11. Морфологическое исследование печени крыс
2.2.12. Приготовление липосом и нагрузка их компонентами 48 сфингомиелинового цикла - сфингомиелином или церамидом
2.2.12.1. Выделение фосфатидилхолина из яичных желтков
2.2.12.2. Приготовление «пустых» и «нагруженных» липосом
2.2.13. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Развитие рака печени
3.1.1. Изменение морфологической картины печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.2. Изменение активности процесса перекисного окисления
липидов
3.1.2.1. Изменение содержания ТБК-активных продуктов
в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.2.2. Изменение активности каталазы в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.3. Изменение активности фосфолипазы Б в печени крыс
на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.4. Изменение активности фосфолипазы А2 в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.5. Содержание компонентов сфингомиелинового цикла в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.5.1. Содержание сфингомиелина в печени крыс на фоне
развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.5.2. Содержание церамида в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.5.3. Содержание сфингозина в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.1.6. Оценка активности апоптоза в печени крыс на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2. Влияние введения не нагруженных («пустых») липосом, а также липосом, содержащих компоненты цикла сфингомиелина, на развитие гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.1 Изменение морфологической картины печени крыс при введении не нагруженных («пустых») липосом, а также липосом, содержащих сфингомиелин или церамид, на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.1.1. Изменение морфологической картины печени крыс при введении не нагруженных («пустых») липосом.на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.1.2. Изменение морфологической картины печени крыс при введении липосом, содержащих сфингомиелин, на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.1.3. Изменение морфологической картины печени крыс при введении липосом, содержащих церамид, на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.2. Изменение содержания ТБК-активных в печени крыс при введении «пустых» липосом, а также липосом, содержащих компоненты сфингомиелинового цикла, на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы
3.2.3. Изменение активности каталазы в печени крыс при введении «пустых» липосом, а также липосом содержащих сфингомиелин или церамид, на фоне развития гепатоцеллюлярной карциномы

образованием- иона карбония (СНз+), который может метилировать пуриновые и пиримидиновые основания, в составе ДНК [10, 80].
Преимущественное действие Т4-ДЭНА на гепатоциты объясняется тем, что данная реакция' протекает в системе микросомального окисления, которая наиболее. активна в клетках печени: [42]. Ключевую роль при этом играет цитохром Р-450; функционирование которого сопровождается образованием активных форм-кислорода (АФК) [42].
Следует отметить, что опасность употребления в пищу продуктов, содержащих нитраты, заключается в-способности: нитрит - иона участвовать в реакции-; нитрозирования, аминов; и амидов, в результате которой5 образуются нитрозо соединения. в том числе и 14-ДЭНА.. Образование нитрозосоединений происходит при взаимодействии азотистой кислоты с вторичными аминами' как в продуктах питания в процессе: их кулинарной; обработки, так и внутри организма [55]
Генотоксическое действие ТГДЭНА на стадии инициации заключается« в быстром- (и практически необратимом) повреждении: генетического материала; клеток, ионом карбония; способствующем их последующему неопластическому развитию1 [55]. При делении клетки такие повреждения; ДНК могут фиксироваться в геноме дочерних клеток [77]. Это, однако, не означает, что все пролиферирующие инициированные клетки становятся злокачественными. В соответствии с существующими представлениями, инициированная- клетка может длительное время оставаться- в состоянии покоя, не проявляя агрессии, до тех пор, пока не подействует другой (другие) фактор, побуждающий- клетку к делению, клонообразованию и, тем5 самым, формированию опухоли [20, 91].
Процесс, в ходе которого инициированная клетка завершает неопластическую трансформацию, называется промоцией.
Для стадии промоции канцерогенеза характерны- клональная экспансия инициированных клеток и дальнейшие изменения в их геноме [79]. Так, формируется популяция клеток с геномными повреждениями,