Роль апоптоза лимфоцитов в патогенезе ВИЧ-инфекции

• Автор: Мустафин, Ильшат Ганиевич
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 205 с. : 47 ил.

Перечень сокращений, принятых в диссертации

АИФ апоптоз индуцирующий фактор

АФК активные формы ю1слорода

А 23187 ионофор кальция

БАВ биологически акивные вещества

ГК глюкокортикоиды

ДМСО диметилсульфоксид

Дн дексаметазон

мв микровезикулы

мкАТ моноклональные антитела

мкл микролитр
МП митохондриальный потенциал
МС 540 флюорохром мероцианин
ПКГ программированная клеточная гибель
ФГА фитогемагглютинин
ФС фосфатидилсерин
ФСБ фосфатно-солевой буфер
ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота
этс эмбриональная телячья сыворотка
век антигенраспознающий рецептор В-клеток
СБ кластер дифференцировки
СМХ-Ков хлорометил-Х-розамин
БЮСб дигексилокарбоцианина йодид
ИТС флюоресцеин изотиоцианат
т-СЬССР хлорофенилгидразон карбонила цианид
ТСЯ антиген-распознающий рецептор Т-клеток
РЕ фикоэритрин
Р1 пропидия йодид
А'Рщ трансмембранный митохондриальный потенциал
АРС аллофикоцианин
РегСР перридин хлорофильный белок
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. АПОПТОЗ И ЕГО РОЛЬ В НОРМЕ И ПАТОЛОГИИ
(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Апоптоз как вид клеточной гибели
1.2. Регуляция апоптоза
1.3. Роль апоптоза в норме и при патологии
1.4. Роль апоптоза в патогенезе ВИЧ-инфекции
1.5. Микровезикулы: патофизиологическое и клинико-
диагностическое значение при ВИЧ-инфекции
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Характеристика исследуемого материала
2.2 Методы выделения и культивирования лимфоцитов
периферической крови и клеточных линий
2.3 Методы исследования апоптоза лимфоцитов перифериической крови
2.4 Методы выявления микровезикул и их характеристика
2.5 Реактивы и оборудование
ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Спонтанный апоптоз лимфоцитов доноров и
больных ВИЧ-инфекцией
3.2. Изучение механизмов индуцированного апоптоза лимфоцитов при ВИЧ-инфекции
3.3. Активация и апоптоз лимфоцитов при ВИЧ-инфекции
3.4. Микровезикулы в патогенезе ВИЧ-инфекции
3.5. Механизмы репликации ВИЧ-1 и апоптоза
лимфоцитов и клеточных линий
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

образованию части гиподиплоидных клеток, обнаруживаемых после окраски PI с помощью проточной цитометрии (Никонова М.Ф., 1996).
Более того, поликлональная активация Лф, достигаемая их инкубацией с ФГА, приводит к существенному повышению чувствительности клеток к действию апоптогенных факторов (в частности, анти-Fas-AT) (Sloand Е., 1997; Ярилин А., 2000), а также развитию апоптоза при повторной активации клеток.
Также показано, что у активированных in vivo Лф (высокий уровень экспрессии рецептора поздней активации клеток - HLA-DR) повышается уровень экспрессии Fas-рецептора, свидетельствующего о готовности клетки к процессу Fas-индуцированного апоптоза
Таким образом, активация клеток может служить предпосылкой для вступления клеток в процесс запуска их программированной клеточной гибели. В качестве подтверждения вышесказанного можно привести также факт индукции апоптоза Эф после инкубации клеток с моноклональными антителами к CD69 (Walsh G.M., 1996). Данный рецептор впервые был описан как маркер ранней активации Лф и впоследствии был обнаружен у активированных Т и В-Лф, NK-клеток, нейтрофилов, Эф и тромбоцитов. Подтверждением этого может служить, например, факты отсутствия экспрессии данного рецептора у Эф периферической крови и его появления после инкубации с цитокинами (ИЛ-3, ИЛ-5, ГМ-КСФ), а также наличия его у клеток, полученных из БАЛ у больных БА (Hartnell А., 1993; Nishikava К., 1992). Тем не менее, остается непонятным сочетание фактов индукции экспрессии данного рецептора и увеличение выживаемости клеток in vitro под влиянием вышеуказанных цитокинов.
Противоположный эффект в регуляции процесса ПКГ играет, в частности, низкоаффинный Fc-рецептор для Ig G (CD32). Было показано, что связывание данного рецептора моноклональными антителами препятствует апоптозу Эф и продлевает их выживаемость in vitro даже в