Индивидуальная изменчивость березы повислой по формам трещиноватости коры в ЦЧО

• Автор: Клещева, Елена Васильевна
• Шифр специальности: 06.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 166 с. : ил.

Глава 1. Индивидуальная изменчивость березы повислой

1.1 Изменчивость по форме трещиноватости коры

Глава 2. Природно-климатические условия

2.1 Климатические особенности

2.2 Рельеф и почвы

2.3 Лесорастительная растительность

Глава 3. Программа, методика, объекты и объем исследований

3.1 Программа работ

3.2 Объекты исследований

3.3 Методика

3.3.1 Методика цитогенетических исследований

3.3.2 Методика электрофоретического разделения белков березы повислой в геле агар-агара
3.3.3 Методика иммунизации в геле агар-агара
3.4 Объем выполненных работ
Глава 4. Рост и продуктивность потомств березы повислой
4.1 Адаптационная способность
4.2 Рост полусибсового потомства березы повислой I и II поколений
Глава 5. Изменчивость качественных количественных признаков у полусибсового потомства березы повислой второго поколения различных по типу трещиноватости коры
5.1 Изменчивость посевных качеств семян березы повислой I поколения в пределах форм по трещиноватости коры
5.2 Изменчивость морфобиологических признаков у сеянцев в зависимости от формовой принадлежности
5.3 Изменчивость коррелятивных связей у полусибсового потомства березы повислой II поколения в зависимости от формовой принадлежности
Глава 6. Генетические основы размножения
6.1 Изменчивость генетического материала репродуктивность сферы
6.2 Кариотипические исследования
6.3 Митотическая активность
6.4 Характеристика мужской генеративной сферы
6.5 Система семенного размножения березы повислой

Глава 7. Изменчивость генетических систем различных по трещиноватости коры форм березы повислой на основе качественной характеристики
7.1 Идентификация форм березы повислой различных по трещиноватости коры по изоферменту
пероксидаза
7.2 Генеалогия некоторых форм березы на основе иммунных
характеристик белков
Заключение
Список использованных источников
Приложения

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. В связи с возрастающим дефицитом древесины большое внимание уделяется быстрорастущим породам, в частности березе повислой, которая в Центральной лесостепи занимает обширные ареалы, обладает большим полиморфизмом, является самой молодой с точки зрения продвинутости в эволюции из рода Betula и в ней интенсивно идет процесс формообразования.
Исследование полиморфизма березы повислой представляет огромный интерес для лесокультурного производства, так как, используя семена с учетом их генетического происхождения можно значительно повысить устойчивость и продуктивность насаждений (Гроздова, 1961; Яблоков, 1962; Махнев, 1965; Багнев, 1987; Данченко, 1990).
Основным методом изучения генетической обусловленности фенотипического признака является испытание отдельных фенотипов по семенному потомству, однако это вызывает определенные затруднения из-за длительности созревания древесных пород. Поэтому наряду с выделением форм и испытанием их по потомству актуальное значение приобретает поиск ранней генетической диагностики наследственных свойств березы повислой.
Исключительную роль в изучении генотипа растения и, особенно в оценке исходного селекционного материала играет биохимический метод, позволяющий на молекулярном уровне судить о гетерогенности и поли-морфности вида, а также применять генетические маркеры для ранней идентификации принадлежности организма к тому или иному виду, форме.
Следует отметить, что решение этих задач имеет не только научное, но и прикладное значение, так как даёт предпосылки для ускорения перевода семеноводства березы повислой на генетико-селекционную основу. Эти обстоятельства и определяют актуальность темы.

Лубяную ткань заготавливали в феврале в период замедленных физиологобиохимических процессов у березы. Навеску 30 г заливали 1% раствором глюкозы в соотношении 1:1 (30) мл. затем растирали со стеклом и заливали 10%-ным раствором хлористого натрия, забуферного до pH 7,0 в соотношении 1:10 и получали 300 мл гомогената. Экстрацию белков проводили в течение 12 часов при температуре +5 С , в холодильнике. Затем гомогенат отжимали через четыре слоя марли и центрифугировали 20 минут при 600 обмин. Жидкость сливали в чистые колбы. В прозрачный раствор добавляли сернокислый аммоний, до появления белых хлопьев (белков) и помещали в холодильник на 3 часа при температуре +ЗС +5С. после центрифугирования в течение 20 минут при 6 тыс. об-мин осадок переносили в смоченную целлофановую гильзу, дабавляли 0,5 см 3 дистилированной воды и ставили на диализ против дистиллированной воды на 36 часов, меняя воду, до исчезновения ионов Б04 и ЫаС1 в диализируемом растворе. Содержание гильзы после диализа снова центрифугировали в течение 20 минут при 6 тыс. об-мин, отделяя водорастворимые белки от солерастворимых. Водорастворимые белки концентрировали в токе воздуха до нужного объема. Соли и водорастворимые белки затем использовали для получения сывороток, электрофоретического и иммунохимического исследований.
При проведении электрофоретического исследования белков березы повислой в качестве носителя мы использовали агар-агар фирмы «Бій»» Приготовление 1% агарового геля, используемого для электрофоретического разделения растворов белков березы повислой при проявлении изо-ферментного состава:
Готовим 2% агар - бактерицидный. Навеску сухого агара-20 граммов заливаем 1 литром дистиллированной воды и выдерживаем до полного набухания, помещаем в водяную баню до полного растворения. Затем расплавленный агар смешиваем с буферным раствором и дистиллированной водой в соотношении 2:1:1.
Веронал - ацетатный буфер Михаэлиса (0,1%,рН-8,55)