Определение стимулятора роста-рактопамина в мясе и печени методом иммуноферментного анализа

• Автор: Лемясева, Светлана Васильевна
• Шифр специальности: 06.02.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 147 с. : ил.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Характеристика стимуляторов роста животных из группы |3 - агонистов и методы их определения
1.2 Препарат рактопамин и его фармако-токсикологическая характеристика
1.3 Применение рактопамина как стимулятора роста в животноводстве
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы исследований
2.1.1 Метод иммуноферментного анализа для определения стимулятора роста -рактопамина
2.1.2 Методика построения калибровочной кривой по стандартным растворам рактопамина
2.1.3 Методика определения предела обнаружения рактопамина в мясе и печени
2.1.4 Методика расчета предела количественного определения рактопамина в мясе и печени
2.1.5 Методика определения извлекаемое рактопамина из проб мяса индейки
2.1.6 Изучение влияния температурной обработки мяса и печени на содержание рактопамина
2.1.7 Статистическая обработка экспериментальных данных
2.2 Результаты исследований
2.2.1 Совершенствование метода иммуноферментного анализа для определения рактопамина в мясе
2.2.1.1 Построение калибровочной кривой по стандартным растворам рактопамина
2.2.1.2 Определение предела обнаружения и предела количественного
определения рактопамина при исследовании свинины
2.2.1.3 Определение предела обнаружения и предела количественного
определения рактопамина при исследовании говядины и говяжьей печени
2.2.1.4 Определение предела обнаружения и предела количественного
определения рактопамина при исследовании мяса индейки
2.2.2 Определение стимулятора роста - рактопамина в мясе и печени импортного и отечественного происхождения
2.2.2.1 Исследование свинины
2.2.2.2 Исследование говядины
2.2.2.3 Исследование говяжьей печени
2.2.2.4 Исследование мяса индейки
2.2.3 Изучение влияния температурной обработки мяса и печени на содержание рактопамина
2.2.3.1 Влияние процессов замораживания и варки на содержание рактопамина в свинине
2.2.3.2 Влияние процессов замораживания и варки на содержание рактопамина в говядине и говяжьей печени
2.2.3.3 Влияние процессов замораживания и варки на содержание рактопамина в мясе индейки
2.3 Обсуждение результатов исследования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
Актуальность темы. В промышленном животноводстве нередко прибегают к использованию стимуляторов роста, так как они позволяют добиться значительного повышения эффективности производства продукции животного происхождения. Использование стимуляторов роста (в т.ч. рактопамина) при выращивании животных в странах Евросоюза и РФ запрещено и находится под строгим контролем ветеринарных служб в соответствии с Директивами ЕС 96/22/ЕС, 96/23/ЕС (1996), а также Указанием Россельхознадзора от 21 сентября 2012 г.
Однако в ряде стран (США, Канада, Бразилия, Мексика, Австралия, Аргентина, Южная Корея, Япония и другие страны) считают, что стимуляторы роста являются безопасными для животных и человека и продолжают их применять: в частности, рактопамин, кленбутерол, зилпатерол используются для стимуляции мышечной массы у животных и птицы. Так, Управлением по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами США (1999) и Канадским агентством продовольственной инспекции (2005) был утвержден для применения препарат рактопамин под названием торговой марки Paylean (для свиней), Optaflexx (для крупного рогатого скота) и Томах (для индейки).
Вместе с тем, имеются сообщения, что добавление рактопамина в корм небезопасно для животного. Так, по данным «Европейского управления безопасности пищевых продуктов» (EFSA), препарат приводит к значительным нарушениям здоровья животных, включая сердечно - сосудистый стресс, тремор скелетной мускулатуры, повышенную агрессивность и гиперактивность

Рисунок 8 - Микроиспарительная система «EVA»
Для адаптации метода иммуноферментного анализа для выявления наличия рактопамина в мясе и печени крупного рогатого скота, а также в мясе свиней и индейки, были исследованы стандартные растворы рактопамина для построения калибровочной кривой, определены предел обнаружения и предел количественного определения в мясе и печени.
2.1.1 Метод иммуноферментного анализа для определения стимулятора роста — рактопамина. Определение стимулятора роста - рактопамина осуществляли с помощью иммуноферментного анализа с использованием тест-системы RIDASCREEN® Ractopamin R9901 (производство R-Biopharm AG, Германия), где в основе процедуры анализа лежит взаимодействие антигенов с антителами при протекании ферментативной цветной реакции. Планшет, входящий в состав набора RIDASCREEN® Ractopamin, сенсибилизирован антителами «захвата», специфическими к антителам к рактопамину (рисунок 9).