Тест-система [набор] для диагностики чумы мелких жвачных животных методом полимеразной цепной реакции

• Автор: Бобоев, Гиёсиддин Юнусович
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Душанбе
• Количество страниц: 131 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Краткая характеристика ЧМЖЖ
2.2. Эпизоотология ЧМЖЖ
2.2.1. Распространение ЧМЖЖ
2.2.2. Факторы распространения ЧМЖЖ
2.3. Биологические свойства вируса ЧМЖЖ
2.4. Физико-химические свойства вируса ЧМЖЖ
2.5. Антигенные свойства вируса ЧМЖЖ
2.6. Диагностика ЧМЖЖ
2.7. Молекулярно-генетические методы диагностики
2.7.1. Полимеразная цепная реакция
2.7.2. Применение ГТЦР для диагностики ЧМЖЖ
2.8 .Выводы по обзору литературы
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Материалы
3.1.1. В ирусы и вируссодержащие материалы
3.1.2. Реактивы, растворы и оборудование

3.2. Культивирование и титрование вируса ЧМЖЖ
3.3. Очистка и концентрирование вируса ЧМЖЖ
3.4. Оценка эффективности методов очистки и концентрирования 41 вируса ЧМЖЖ
3.5. Электрофоретический анализ белков ЧМЖЖ
3.6. Электрофоретический анализ вирусного белка в ПААГе
3.7. Выделение нуклеиновых кислот из очищенных препаратов 42 вирусов, культуральных и органо-тканевых вируссодержащих материалов
3.7.1. Выделение РНК из очищенных и концентрированных 43 препаратов вируса ЧМЖЖ
3.8. Сбор данных нуклеотидных последовательностей вируса
3.9. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей
3.10. Конструирование праймеров
3.11. Синтез и очистка олигонуклеотидов
3.11.1 Синтез кДНК на РНК вируса
3.12. Оптимизация параметров постановки ПЦР при идентификации
3.12.1. Электрофоретический анализ нуклеиновых кислот
3.12.2. Определение чувствительности и специфичности ПЦР
3.12.3. Определение диагностической ценности ПЦР
3.13. Постановка и учет результатов серологических реакций
3.13.1. Подготовка проб патологического материала

3.13.2. Постановка РДП
3.13.3. Постановка ИФА
3.14. Статистическая обработка данных
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Очистка и концентрирование вируса ЧМЖЖ
4.1.1. Подбор оптимальных условий культивирования вируса 50 ЧМЖЖ
4.1.2. Получение очищенных и концентрированных препаратов 51 вируса ЧМЖЖ из вируссодержащих материалов
4.1.3. Электронномикроскопическое изучение морфологии и 53 структуры вируса ЧМЖЖ
4.2. Подбор оптимальных методов выделения РНК вируса
4.3. Определение физико-химических свойств РНК вируса ЧМЖЖ
4.3.1. Определение константы седиментации РНК вируса ЧМЖЖ
4.3.2. Определение плавучей плотности РНК вируса ЧМЖЖ
4.4. Поиск и анализ нуклеотидных последовательностей генома 58 вируса чумы МЖЖ в международных базах данных
4.5. Разработка метода ПЦР для идентификации вируса ЧМЖЖ
4.5.1. Подбор праймеров
4.5.2. Подбор и отработка температурно-временного режима
4.5.3. Подбор оптимальных условий проведение ПЦР

препаратов. ПЦР позволяет дифференцировать вакцинные штаммы и полевые изоляты вируса ЧМЖЖ.
Разработка, адаптирование и внедрение в ветеринарную практику в Республике Таджикистан тест-системы [набор] для диагностики ЧМЖЖ на основе ПЦР является весьма актуальной проблемой.