Культуральные и антигенные свойства метапневмовируса птиц

• Автор: Данко, Леонид Юрьевич
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 117 с. : ил.

Содержание
Введение
1 .Обзор литературы
1.1 .Метапневмовирусная инфекция птиц
1.1.1 .Хронологическая справка, распространение и ущерб, причиняемый этой болезнью
1.1.2.Характеристика и морфология метапневмовируса птиц
1.1.3.Культуральньїе свойства метапневмовируса птиц
1.1.4.Антигенная вариабельность метапневмовируса птиц
1.1.5:Эпизоотологические данные болезни
Ы.б.Клинические признаки и патологоанатомические изменения
1.1.7.Диагностика болезни
1.1.8.Профилактика и меры борьбы с болезнью
1.1,9.3аключение
2.Собственные исследования
2.1 .Материалы и методы
2.1.1 .Материалы исследований
2.1.2.Методы исследований
2.2.Результаты собственных исследований
2.2.1.Выделение метапневмовируса птиц и его идентификация
2.2.2.Изучение культуральных свойств метапневмовируса птиц
2.2.3.Изучение антигенных свойств метапневмовируса птиц
2.2.4.Изучение антигенной специфичности вируса ( Ag - признак )
2.2.5.Изучение степени нейтрализации (Ап - признак)
3.Обсуждение результатов исследований
4.Выводы
Список литературы
ПРИЛОЖЕНИЕ

Список сокращений
ИП иммунопероксидазное окрапшвание
ИФ иммуно флуоресценция
ИФА иммуно ферментный анализ
КЭ куриные эмбрионы
МПВ метапневмовирус
МПВИ метапневмо вирусная инфекция
ГТТТР полимеразная цепная реакция
PH реакция нейтрализации
СПФ свободные от патогенной флоры
СОГ синдром опухшей головы
ТОК тканевая органная культура
ТЦЦ50/смЗ 50% тканевая цитопатогенная доза
ТЦЦ цитопатогенное действие
ФЭК фибробласты эмбрионов кур
ФЭГ фибробласты эмбрионов гусей
ФЭУ фибробласты эмбрионов уток
Lg логарифм по основанию
ART avian rhinotracheitis (ринотрахеит птиц)
APV Avian pneumovirus (пневмовирус птиц)
ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
(твердофазный иммуно ферментный анализ) Mab моноклональные антитела
SHS swollen head syndrome (синдром опухшей головы)
TRT turkey rhinotracheitis (ринотрахеит индеек)
Vero перевиваемая линия клеток почки зеленой мартышки
Введение
Актуальность темы. Метапневмовирусная инфекция широко распространена в стадах коммерческой птицы (куры-несушки, бройлеры и индейки) в птицеводческих хозяйствах разных стран мира (Buys & Du Preez, 1980; Buys et al., 1989; Me Dongall & Cook, 1986; Wilding et al., 1986; Alkhalaf, 2002; Jones, 2004).
Первичная вирусная инфекция часто осложняется болезнями бактериальной и вирусной природы, ведущими в результате к высокой заболеваемости и смертности (И.А.Борисова, А.В.Борисов, 2009; Cook, 2000).
Случаи возникновения метапневмовирусной инфекции птиц отмечены в птицехозяйствах Российской Федерации (В.Н.Ирза с соавт., 2003,2005; З.Б.Хлебовец с соавт., 2005; Д.В. Дмитриев, 2007; Б.Б.Трефилов с соавт., 2010). У невакцинированных кур-несушек и бройлеров регистрировали специфические антитела к метапневмовирусу.
Исходя из обширных различий в антигенной структуре и аминокислотной последовательности гена, существующие штаммы метапневмовируса классифицированы на четыре подтипа A,B,C,D (И.А.Борисова, 2008; Cook, Cavanagh, 2002; Sahara, Varence, 2002).
Проблема антигенной структуры метапневмовируса помимо большого теоретического значения представляет в настоящее
время существенный практический интерес в период массовой

вакцинации против этой болезни, а также при изучении репликации вакцинных и эпизоотических штаммов вируса в организме и культурах клеток и их распространения среди птицы.
Чувствительность клеточных культур к метапневмовирусу птиц установлена многими исследованиями (И.А. Борисова, 2008;
А.С.Пронин с соавт., 2006; Panigrahy et al., 2000; Jirjis et al., 2000, Cook et al., 2001). Однако какая бы система не была использована
1.1.8. Профилактика и меры борьбы с болезнью
Поскольку пневмовирусная инфекция птиц не может быть взята под контроль с помощью медикаментозных средств (Hafez et al., 1990), основным подходом к контролированию заболевания является использование аттенуированных вакцин в молодом стаде, как индеек, так и цыплят, и инактивированных вакцин у несушек и родительского поголовья перед началом яйцекладки. Было разработано некоторое количество аттенуированных вакцин, которые с различной степенью успеха проявили себя в полевых условиях. Все вакцины были получены методом повторных пассажей вирулентного вируса в лабораторной культуральной системе до достижения различных степеней аттенуации. (Cook et al., 1989а,b; Buys et al., 1989; Cook et al., 1990; Gulati et al., 2001; Williams et al., 1991).
Демонстрация того, что имеются два типа пневмовирусов птиц, вызвала пересмотр процесса вакцинации. Cook et al. (1995, 1996) показали, что вакцина полученная от первичного английского штамма МПВ, обеспечивающая защиту, как кур, так и индеек от экспериментального заражения штаммами, принадлежащими к двум различным Mab группам. Это означает, что вакцины подтипа А защищали от заражения как подтипом А, так и подтипом В. Сообщений о том, защищают вакцины подтипа В от заражения вирусами подтипа А не было опубликовано. Кажется, было бы благоразумно использовать вакцины в областях, где присутствуют оба подтипа, если только один подтип демонстрирует, что он достаточно эффективен против обоих.
Однако поскольку пневмовирусы являются РНК-вирусами и генетически нестабильны, живые вакцины подвержены некоторой реверсии к вирулентному состоянию, и поэтому может быть так,