Молекулярно-генетические методы дифференциации пород пчелы медоносной Apis mellifera L.

• Автор: Чудинов, Олег Светославович
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Рыбное
• Количество страниц: 139 с. : ил

Оглавление
Введение

1. Обзор литературы

1.1. Породы медоносных пчел (Apis mellifera)

1.1.1. Темная лесная пчела, среднерусская (Apis mellifera

mellifera L.)

1.1.2. Бурзянские (Башкирские) бортевые пчелы - популяция

Apis mellifera mellifera L

1.1.3. Серая горная кавказская порода (Apis mellifera caucasica)

1.1.4. Желтая (долинная) кавказская порода (Apis mellifera

remipes Gerst.)

1.1.5. Итальянская порода (Apis mellifera ligustica)
1.1.6. Краинская порода (Apis mellifera camica)
1.1.7. Карпатская порода (Apis mellifera carpatica)
1.1.8. Украинская степная порода (Apis mellifera acervorum)
1.1.9. Дальневосточные пчелы
1.1.10. Внутрипородный тип среднерусской породы пчел «Приокский»
1.1.11. Пчела Юго-Восточной Азии и Индии - Apis cerana
1.2. Генетика и современное состояние исследований Apis mellifera
и Apis cerana
1.2.1. Основные генетические особенности пчел рода Apis
1.2.2. Построение генетической карты пчелы медоносной

1.2.3. Исследования митохондриальной ДНК пчел
1.2.4. Изоферментный анализ
1.2.5. Малоиспользуемые в настоящее время методы дифференциации пчел
1.2.6. Микросателитный анализ
1.2.7. Локальная амплификация ДНК с использованием случайно-выбранного праймера (НАРБ)
1.2.8. Заключение по обзору литературы
2. Материалы и методы
2.1. Материалы
2.1.1. Основные реактивы
2.1.2. Расходные материалы
2.1.3. Образцы используемые в работе
2.2. Методы
2.2.1. Фиксация образцов для хранения и их хранение (оптимизированная методика)
2.2.2. Выделение и очистка тотальной ДНК (выбранная методика)
2.2.3. Выделение и очистка митохондриальной ДНК из личинок
2.2.4. Определение степени фрагментации ДНК
2.2.5. Процедура нормализации концентрации ДНК
2.2.6. Процедура локальной амплификации с использованием митохондриальных праймеров
2.2.7. Процедура локальной амплификации с использованием КАРО-праймеров (оптимизированный протокол)
2.2.8. Процедура гель-электрофореза и документирование результатов

2.2.9. Элюция фрагментов ДНК из Г1ААГ
2.2.10. Введение радиоактивной метки в зондовую ДНК
2.2.11. Имобилизадия ДНК на нейлоновую мембрану Hybond N
2.2.12. Процедура проведения гибридизации, отмывки после гибридизации от не специфически связавшейся зондовой ДНК
2.2.13. Фотопроцедуры, проявление и фиксирование
рентгеновской пленки и пленки микрат
3. Результаты эксперимента и обсуждение
3.1. Сравнение разных методов выделения тотальной ДНК из пчел
3.2. Оптимизация условий проведения RAPD - амплификации
тотальной ДНК
3.3. Подбор 10-нуклеотидных RAPD-праймеров для определения межпородных и межвидовых отличий пчелы медоносной
Apis mellifera L. и пчелы из юго-восточной Азии Apis cerana
3.4. Определение принадлежности породоспецифичиых и видоспецифичных маркеров к геномной или митохондриальной
ДНК пчел
Заключение
Список литературы

вдвое выше (соответственно 28,1; 27,7 и 56,8%). В течение сезона семьи приокских пчел выращивали всреднем на 15,4% больше расплода, чем среднерусские. Восковая продуктивность пчелиных семей приокского типа была на 19-25% выше, чем среднерусской.
Структуру приокской группы определяют три линии: 1-С (сасовская), ГУ -(тульская зимостойкая) и «клеверная», каждая из которых имеет по две-три ветви, а также определенное число семей от межлинейных кроссов или аутбредного скрещивания.
Линия 1-С является самой старой и многочисленной. Отличительные особенности пчел - эффективное использование полифлорного медосбора с заливных лугов и любого относительно слабого и недостаточно устойчивого медосбора, миролюбие, большая длина хоботков, слабая ройливость, а также вполне достаточная зимостойкость. Племенное ядро линии размещено на пасеке «Путково» ОПХ «Ходынино» НИИ пчеловодства.
Линии ГУ — 3 представляют семьи, характеризующиеся высокой зимостойкостью, более эффективным использованием относительно сильного и устойчивого медосбора с гречихи.
Пчелы несколько уступают по длине хоботка особям предыдущей линии, но превосходят их по размерам тела.
Узкоспециализированная «клеверная» линия выведена сравнительно недавно на основе разведения «в себе» семей-помесей, сочетающих 5/8 «крови» серой горной кавказской и 3/8 - среднерусской пород (Г.Д.Билаш, А.В.Бородачев, 1991).
От предыдущих двух линий клеверные пчелы отличаются самыми длинными хоботками (6,95 мм), крупными тергитами (4.85 мм) и высоким содержанием пыльцевых зерен клевера лугового в пыльцевых обножках (в среднем 78,7%). Племенное ядро размещается на экспериментальной пасеке «Галенькино».