Влияние антигенов Главного комплекса гистосовместимости на заболеваемость лейкозом у коров айрширской и черно-пестрой пород

• Автор: Изместьев, Сергей Викторович
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 127 с. : ил.

1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Главный комплекс гистосовместимости (МНС)
(Major Histocompatibility complex)
2.1.1. Функциональная роль главного комплекса гистосовместимости
2.1.2. Антигены Главного комплекса гистосовместимости и болезни
2.1.3. Главный комплекс гистосовместимости крупного рогатого скота
2.1.4. Связь антигенов Главного комплекса гистосовместимости сельскохозяйственных животных и восприимчивости к заболеваниям
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИСЛЕДОВАНИЯ
3.1.Методика выделения суспензии лимфоцитов
3.2. Постановка микроцитотоксического теста
3.3. Определение полимеразной цепной реакции (ПЦР)
3.4. Исследование рестрикции продуктов амплификации
3.5. Проведение ПЦР с аллельспецифическими праймерами
VD-19 и ER
3.6. Электрофорез продуктов амплификации
3.7. Методы генетико-статистического анализа
4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Распределение антигенов BoLA-A в популяциях айрширской породы крупного рогатого скота
4.2. Характеристика антигенов гистосовместимости в связи с заболеваемостью лейкозом
4.3. Оценка коров на устойчивость и восприимчивость к гемобластозам крупного рогатого скота методом статусметрии
4.4. ПЦР-ПДРФ типирование больных гемобластозами, вирусоносителей и здоровых животных по локусу BoLA -DRB3
4.4.1. Амплификация экзона 2 гена BoLA-DRB3
4.4.2. Анализ рестрикционного полиморфизма экзона 2 гена ВоЬАЛЖВЗ
4.4.3. Анализ аллелей гена ВЛА-БИВЗ ассоциированных с устойчивостью и чувствительностью к гемобластозам крупного рогатого скота
4.4.4. Анализ аллелей гена ВоЬА-Б11ВЗ ассоциированных с устойчивостью и чувствительностью к лейкозу крупного рогатого скота у коров в возрасте 5 лет и старше
4.4.5. Определение аллельных вариантов гена ВоЬА4ЖВЗ, ассоциирующихся с устойчивостью или чувствительностью к лейкозу, с помощью аллельспецифичной полимеразной цепной реакции
4.5. Наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготность в популяции эйрширского скота
4.6. Продуктивность коров айрширской породы и ее связь с устойчивостью и восприимчивостью к гемобластозам крупного рогатого скота
5. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
6. ВЫВОДЫ
7. СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
8. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Лейкозы человека, животных и птиц относительно широко распространены и встречаются почти во всех странах мира. Среди инфекционных болезней крупного рогатого скота в России (по статистическим данным Министерства сельского хозяйства РФ) гемобластозы занимают первое место. Отсутствие ранней диагностики, лечения и эффективных мер профилактики выдвигает проблему лейкозов в число важнейших биологических и социальных задач.
Многочисленные исследования, проводимые как в России, так и за рубежом (Miller Y. et al., 1969; Calafat Y. et al., 1974; N.Sagata et al., 1985; Straub, 1984; J.L.Heeney, V.E.O.Valli, 1990; J.Coulston et al.,1991; Надточей Г.В., Валихов А.Ф., 1972; Валихов А.Ф., 1978, 1991; Шишков В.П. и соавт., 1984, 1989; В.В.Разумовская и соавт., 1997; Ломакин А.И. и соавт., 1998; В.И.Колесников и соавт., 1999; Р.С.Москалик и соавт., 1999; С.В.Новицкий и соавт., 1999; Гулюкин М.И. и соавт. 1998, 1999, 2000), направленные на изучение эпизоотологии, этиологии и биологических особенностей лейкозного процесса, позволили установить вирусную природу этого заболевания и разработать доступные и чувствительные методы диагностики. Установлено, что лейкоз крупного рогатого скота - хроническое инфекционное заболевание опухолевой природы, вызываемое РНК-содержащим вирусом семейства Retroviridae - вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), поражающим лимфоидную ткань, то есть являющимся лимфотропным.
Согласно вирусоиммуногенетической концепции этиопатогенеза гемо-бластозов, выдвинутой В.П.Шишковым, клиническому и патоморфологическому проявлению болезни, кроме вирусного инфицирования, способствуют генетическая предрасположенность и иммунологическая недостаточность организма.
Лейкозы наносят значительный экономический ущерб вследствие гибели и вынужденной выбраковки животных, утилизации органов и туш при убое; расходов, связанных с ограничительными мероприятиями.
м_(/+03)(с/+05) (6+0і)(е+0і)
Этиологическая фракция (EF) дополняет показатель относительного риска с учетом частоты антигена в популяции и оценивает непосредственное влияние ассоциации на популяцию:
EFJfbz3 (1 -/„)
fn- частота антигена в популяции (fn=(a+b)/N).
Атрибутивный риск:
_а Ъ_
а+с b+d _fb~ß
1+_L ' i-/*
b+d
Достоверность различий частоты встречаемости BoLA-антигенов в двух популяциях проводили с использованием критерия / и коррекцией Jates на непрерывность выборки (Hoff Charles, 1985).
((ad - be) - 0,5Nf N ^ (a + b)(a + + d)(b + dj
где ad-bc - абсолютная величина разности;
0.5 N - поправка на непрерывность для малых выборок.
Величину Р, соответствующую х2, находили из таблицы / при одной степени свободы: df=l.
Ожидаемая гетерозиготность (НеХ) вычисляется по следующей формуле:
Hex=l-(fl2 +
• f- частота аллелей одного гена.