Особенности размножения алтайских генотипов вишни и микровишни с использованием методов биотехнологии

• Автор: Плаксина, Татьяна Викторовна
• Шифр специальности: 06.01.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Барнаул
• Количество страниц: 163 с. : ил.

Список сокращений и обозначений

Глава 1. Состояние изученности проблемы (обзор литературы)

1.1. Использование методов биотехнологии в размножении плодовых и ягодных культур

1.2. Размножение in vitro косточковых культур

Глава 2. Объекты, условия и методики исследований

2.1 .Объекты исследований

2.2. Методы культуры in vitro

Глава 3. Эмбриокультура и микроразмножение in vitro генотипов вишни

и микровишни

3.1. Влияние сроков изоляции и регуляторов роста на рост и развитие зародышей in vitro

3.2. Культура изолированных тканей семядолей гибридов вишни и микровишни

3.3. Микроразмножение сортов, гибридов, отборных форм вишни и микровишни путем активации развития меристем
3.4. Влияние элементов минерального питания на развитие эксплантов вишни
3.5. Окоренение и адаптация пробирочных растений вишни и микровишни к нестерильным условиям
3.6. Сравнительная характеристика сортов вишни, размноженных зеленым черенкованием и in vitro
Глава 4. Экономическая эффективность использования методов
биотехнологии
Глава 5. Технология микроразмножения алтайских сортов, гибридов
вишни и микровишни
Выводы

Практические рекомендации
Библиографический список использованной литературы
Приложения

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ
АБК - абсцизовая кислота;
БАЛ - 6-бензиламинопурин;
ВЧ - вишне-черемуховый гибрид (С. fruticosa х С. Maackii);
В5 - среда Гамбурга и Эвелега (1968);
ГК - гибберелловая кислота;
Г1 - 3-66-9 (6х) свободное опыление;
Г2 — 3-66-9 (6х) хчеремуха обыкновенная;
Гз -микровишня песчаная х микровишня войлочная;
Г4 — 3-66-9 (6х) х черешня Дрогана желтая;
Г5 - 3-66-9 (6х) х вишня пенсильванская;
Гб - 3-66-9 (6х) х вишня Максимовича;
Г7 - ВЧ 8-83-46 (6х) хчеремуха обыкновенная;
Г8 - ВЧ 8-83-46 (6х) хчерешня Дрогана желтая;
2,4-Д - 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота;
ИПА - 2-изопентиладенин;
ИМК - (1 -индол ил м асл я пая кислота;
ИПК - Р-индолилпропионовая кислота;
НУК - а-нафтилуксусная кислота;
МС - среда Мурасиге и Скуга (1962);
ТДЗ - тидиазурон;
ТИБК - трийодбензойная кислота; ex vitro - “вне стекла”;
in vitro - “в стекле”(лат.), культивирование тканей, органов или организмов в пробирках на искусственных питательных средах, в асептических условиях;
in vivo - в природе, естественных местах произрастания;
WPM - среда Ллойда - Маккоуна.

Для культивирования зародышей вишни наиболее часто используется питательная среда МС, поэтому и мы применили эту среду. Кроме минерального состава питательной среды для развития изолированных зародышей большое значение имеют регуляторы роста. В исследованиях по культуре изолированных зародышей из ауксинов в питательную среду добавляют ИУК или ИМК. В качестве цитокининов используют обычно БАП и кинетин. На самых различных растениях показана стимуляция роста зародышей под действием ГК (Здруйковская-Рихтер, 1973; Лесникова и др., 1997).
В наших опытах были использованы питательные среды с БАП 1 - 2 мкМ и БАП совместно с ГК (5 мкМ). Среды подобного состава для эмбриокультуры применяли многие исследователи. Например, Н.П. Лесникова с сотрудниками (1997) использовали среды, в состав которых включали ГК и цитокинин для культивирования гибридных зародышей алычи, абрикоса, персика. Н.В. Кухарчик (2006) для дифференцированных зародышей вишни и сливы добавляла в питательную среду только БАП в концентрации от 0,5 до 0,75 мг/л.
В таблице 2 представлены данные о влиянии регуляторов роста на развитие изолированных 30-дневных зародышей на разных вариантах питательных сред. Изолированные зародыши этого срока продолжают расти и развиваться, поэтому очень чувствительны к внесенным извне регуляторам роста. На безгормональной питательной среде (контроль) зародыши, изолированные через 30 дней после опыления, не проросли и к концу пассажа погибли.
Использование 1 мкМ БАП в питательной среде стимулировало прорастание 12,5 - 40 % зародышей. У зародышей отмечали рост побега с листьями, а у отдельных зародышей комбинации 3-66-9 от свободного опыления (Г0 рост корня, его длина в среднем достигала 2,3мм. У отдельных зародышей развивались только листья. Увеличение в питательной среде БАП