Морфологическое обоснование применения фибринового сгустка с плюрипоттентными стромальными клетками для ускорения регенерации кости нижней челюсти в эксперименте

• Автор: Шевела, Александр Андреевич
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 116 с. : 31 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Применение препарата фибрина в лечении повреждений
1.2 Репарация костной ткани в условиях использования плюрипотентных стромальных клеток
1.2.1 Характеристика плюрипотентных стромальных клеток и их источники
1.2.2 Некоторые особенности применения плюрипотентных стромальных клеток
1.2.3 Регенерация костной ткани при использовании только плюрипотентных стромальных клеток без подложек
1.2.4 Адсорбция плюрипотентных стромальных клеток на матрицах с целью восстановления костей
1.2.5 Применение клеточных технологий в клинической и экспериментальной стоматологии
2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Группы животных и сроки забора материала
2.2 Приготовление богатого тромбоцитами фибринового сгустка
2.3 Выделение аутологичных плюрипотентных стромальных клеток
2.4 Моделирование дефекта нижней челюсти и применение фибринового сгустка, аутологичных плюрипотентных стромальных клеток и их сочетания.ЗЗ
2.5 Подготовка материала к исследованию морфологическими и лучевыми методами
2.6 Морфометрические и статистические методы обработки результатов
3 ОСОБЕННОСТИ РЕГЕНЕРАЦИИ УЧАСТКА ПОВРЕЖДЕНИЯ КОСТИ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ВЛИЯНИЯ НА РЕПАРАТИВНЫЙ ПРОЦЕСС

3.1 Регенерация кости нижней челюсти без внешнего воздействия на репаративный процесс
3.2 Регенерация костной ткани в условиях применения аутологичного богатого тромбоцитами фибринового сгустка
3.3 Регенерация нижнечелюстной кости после введения аутологичных плюрипотентных стромальных клеток
3.4 Регенерация костной ткани на фоне использования фибринового сгустка с плюрипотентными стромальными клетками
3.5 Изучение особенностей регенерации дефекта нижней челюсти радиовизиографическими методами
3.6 Особенности васкуляризации в процессе заживления дефекта
нижнечелюстной кости
3.7 Изменения численной плотности клеток в оценке состояния
поврежденного участка нижнечелюстной кости
4 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЕ А (обязательное) РИСУНКИ К
ПРИЛОЖЕНИЕ Б (обязательное) РИСУНКИ КЗ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БТФС
АПСККП

Плюрипотентные стромальные клетки Богатый тромбоцитами фибриновый сгусток Аутологичные плюрипотентные стромальные костномозгового происхождения Дезоксирибонуклеиновая кислота
Зеленый флюоресцентный белок (Green fluorescent protein)
клетки

снова дезинфицировали кожу спиртом.
Спустя 1, 2, 3, 4 и 5 недель после операции крыс выводили из эксперимента передозировкой диэтилового эфира.
Крысы с гнойно-воспалительными процессами в исследованиях не участвовали.
2.5 Подготовка материала к исследованию морфологическими и лучевыми методами
Нижнюю челюсть с дефектом фиксировали в 10 % растворе забуференного нейтрального формалина не менее 1 суток.
Фиксированные фрагменты нижней челюсти с удаленными мягкими тканями сначала использовали для радиовизиографических исследований. В компьютере радиовизиографа «Heliodont+» (Herona, Germany, 2010) установлена программа «Tomodent» (Anvisystem, Россия) для оценки плотности костной ткани. Плотность представлена как отношение данных в участке повреждения в условных единицах к результатам, полученным на соответствующих неповрежденных участков на противоположной неповрежденной стороне.
Затем нижнюю челюсть подвергали декальцинации раствором «Биодек R» (Bio Optica Milano, Италия) в соответствии с рекомендациями производителя. Далее фрагменты кости дегидратировали в этаноле, проводили через бензол и заключали в парафин. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином (Саркисов Д.С., Перов IO.JI., 1996), изучали при увеличении до 1200 раз на световом микроскопе Axioimager Ml (Zeiss, Германия).
2.6 Морфометрнческие и статистические методы обработки результатов
Морфометрию костной ткани нижней челюсти проводили в соответствии