Окислительный стресс и действие разобщителей. Ультраструктурное исследование на клетках Saccharomyces cerevisiae и Podospora anserina

• Автор: Ожован, Сильвия Михайловна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил. + Прил. (179 с.: ил.)

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Окислительный стресс и АФК

АФК, старение и ПКС

Изучение ПКС в клетках Saccharomyces cerevisiae

Индуцированный апоптоз в клетках Saccharomyces cerevisiae

Антиоксидантные системы защиты клетки

Антиоксиданты направленного действия

Роль разобщителей в борьбе с АФК
Особенности ультраструктуры митохондрий дрожжей
Функционально-зависимые параметры ультраструктуры митохондрий
Podospora anserina-модельный организм
Особенности Podospora anserina
Старение Podospora anserina
Особенности ультраструктуры Podospora anserina при старении
Митохондриальные АФК
Митохондриальная ДНК: нестабильность и реорганизация
Долгоживущие штаммы Р. anserina
Значение изучения старения Podospora anserina для других организмов
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Культура клеток
2. Обработка клеток веществами, влияющими на уровень АФК
3. Флюорисцентная микроскопия

4. Фиксация клеток для электронно-микроскопического исследования
РЕЗУЛЬТАТЫ
Часть I. Исследование структуры Saccharomyces cerevisiae дикого типа и мутанта hysp2 в условиях действия индукторов апоптоза и митохондриально-направленных антиоксидантов и разобщителей
1.1. Ультраструктура клеток Saccharomyces cerevisiae дикого типа и мутанта Aysp2 при действии индуктора апоптоза-амиодарона
Исследование действия амиодарона: флуоресцентная микроскопия
Исследование действия амиодарона: электронная микроскопия
1.2. Исследование ультраструктуры клеток дрожжей S. cerevisiae при фосфолипидозе, вызванного амиодароном
1.3. Исследование эффектов FCCP и С12ТРР и изменений ультраструктуры клеток S. cerevisiae при одновременной инкубации с амиодароном
1.4. Защитное действие митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ3 при апоптозе, вызванном амиодароном
1.5. Влияние высоких концентраций митохондриально-направленного катиона С12ТРР на ультраструктуру клеток Saccharomyces cerevisiae
1.6. Действие мягких разобщителей C12RB и C12R19, на ультраструктуру клеток S. cerevisiae.

Часть II. Исследование ультраструктуры Podospora anserina
2..1. Увеличение продолжительности жизни нитчатого гриба с помощью митохондриальнонаправленного катиона SkQi
ОБСУЖДЕНИЕ
1. Ультраструктуриые исследования на клетках Saccharomyces cerevisiae
а. Исследование септирования митохондрий клеток Saccharomyces cerevisiae при обработке амиодароном
б. Амиодарон и липидные включения
в. Влияние проникающих катионов и АФК на ультраструктуру митохондрий
2. Ультраструктурные исследования на клетках Р. anserina
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АФК- активные формы кислорода
ЛВ-липидное включение
мтДНК- митохондриальная ДНК
МТП- митохондриальная транзиционная пора
СОД- супероксиддисмутаза
ПКС- программируемая клеточная смерть
ппДНК- плазмидоподобная ДНК
стДНК- стареющая ДНК
дикого типа ярко-выраженная перестройка мтДНК является главной причиной старения (Оз1еуасг, Во^Ьогйэ, 2000).
Рис. 6.. Схематическое изображение мтДНК в процессе ее реорганизации при старении Робозрога атеппа.
Ранние исследования с использованием различных метаболических ингибиторов, добавленных в субстрат, на котором выращивался гриб, предполагают, что изменения в работе митохондрий влияют на продолжительность жизни культур (Tudzynski, Esser, 1977; Osiewacz, 2002). При использовании концентраций, которые не влияют или мало влияют на
Долгоживущие штаммы Р. anserina