Морфофункциональная характеристика прогениторных клеток пациентов с хронической сердечной недостаточностью при интрамиокардиальной трансплантации

• Автор: Ким, Ирина Иннокентьевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 102 с. : 17 ил.

Оглавление:

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1.1. Характеристика и свойства стволовых /прогениторных клеток 12 Глава 1.2. Мобилизация стволовых/прогениторных клеток из костного мозга

Глава 1.3. Результаты лечения пациентов с ХСН аутологичными стволовыми/прогениторными клетками

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЙ

Глава 2.1. Характеристика пациентов

Глава 2.2. Мобилизация мононуклеаров периферической крови

Глава 2.3. Фенотип МНК периферической крови и мобилизованных МНК 39 Глава 2.4. Иммунноцитохимическое исследование популяции клеток с фенотипом СЭ34+ в периферической крови, мобилизованных введением Г-КСФ из костного мозга
Глава 2.5. Световая микроскопия мононуклеарных клеток периферической крови, мобилизованных из костного мозга введением Г-КСФ
Глава 2.6. Клеточный цикл и апоптоз СИ34+ клеток
Глава 2.7. Оценка пролиферативной активности МНК МТТ-тестом
Глава 2.8. Исследование уровней цитокинов в супернатантах МНК
Глава 2.9. Интрамиокардиальное введение мобилизованных МНК и оценка ее эффективности
Глава 2.10. Статистическая обработка полученных результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3.1. Гемостимулирующая активность Г-КСФ
Глава 3.2. Эффект введения Г-КСФ на выход стволовых/прогениторных клеток в периферическое русло у больных с ХСН

Глава 3.3. Содержание СО 34+ клеток в периферической крови после мобилизации Г-КСФ в зависимости от возраста и длительности заболевания ХСН у пациентов
Глава 3.4. Исследование функциональной активности МНК периферической крови после курса мобилизации Г-КСФ
Глава 3.5. Клиническая эффективность интрамиокардиального введения МНК при мобилизации Г-КСФ больных ХСН
Глава 3.6. Изучение взаимосвязей морфофункциональных свойств аутологичных МНК мобилизованных Г-КСФ с параметрами клинической эффективности интрамиокардиального введения
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
Заключение
ГЛАВА 5. ВЫВОДЫ
Список использованной литературы

Список сокращений
Г-КСФ - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор ГМ-КСФ - гранулоцитарно/макрофагальный колониестимулирующий фактор
ИБС - ишемическая болезнь сердца
ИЛ - интерлейкин
ИМ - инфаркт миокарда
ИФН - интерферон
КонА - конкавалин А
ЛИС - липополисахарид
ММП - матриксная металл опротеиназа
МНК - мононуклеарные клетки
МТТ - 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолиум бромида
ПНП - предсердный натрийуретический пептид
РААС - ренин-ангиотензин-альдостероновая система
САС - симпатоадреналовая система
СК - стволовые клетки
СН - сердечная недостаточность
ФИО - фактор некроза опухоли
ФВЛЖ - фракция выброса левого желудочка
ХСН - хроническая сердечная недостаточность
ЭСК - эмбриональная стволовая клетка
ЭПК - эндотелиальная прогениторнная клетка
ЭПО - эритропоэтин
CD - кластер дифференцировки
ЕСМ - экстрацеллюлярный матрикс
FCS - фетальная телячья сыворотка
SCF - фактор стволовых клеток

показано, что клетки костного мозга имеют возможность напрямую уменьшать некроз и апоптоз миокарда человека in vitro на модели ишемии через РКС и р38 МАРК пути (Kubal С., 2006). Таким образом, вполне возможно, что клетки костного мозга могут способствовать сокращению потери кардиомиоцитов прямо и косвенно.
Потенциальное существование резидентных клеток-предшественников сердца является одной из наиболее актуальных проблем в кардиологии в последние годы, так как она открывает двери для новых терапевтических возможностей сердечно-сосудистых заболеваний. На сегодняшний день определены предполагаемые стволовые клетки сердца, которые являются небольшими круглыми клетками с высоким ядерно-цитоплазматическим соотношением и экспрессируют маркеры c-kit и Sca-1 белок (Beltrami А.Р., 2003). Эти клетки являются клоногенными, самообновляющимися, плюрипотентными, и группируются в нишах, особенно в предсердиях и верхушке сердца. При пересадке в пограничную зону инфаркта эти клетки способны дифференцироваться в зрелые клетки сердца и тем самым регенерировать весь миокард (Beltrami А.Р., 2003). Остается неясным, имеют ли эти клетки сходства с другими популяциями Sea-1 клеток сердца, которые не экспрессируют маркеры сердца, эндотелиальных, или гемопоэтических клеток (Oh H., 2003), но обладают аналогичными возможностями.
Совсем недавно была описана другая группа предполагаемых клеток-предшественников в сердце, которые экспрессируют islet 1 (lsl 1), LIM домен фактора транскрипции, встречающихся преимущественно при развитии эмбриона и плода (Laugwitz K.L., 2005). Большинство из этих клеток находятся в выносящем тракте правых отделов сердца и левого предсердия во время раннего развития. Однако если клетки дифференцируются, lsl 1 был выключен, и они практически не обнаруживаются в зрелом возрасте, что затрудняет создание их практического применение во взрослом сердце.
Вполне возможно, что трансплантация клеток костного мозга в сердце может стимулировать развитие предполагаемых клеток предшественников в