Цитологические особенности спермиев ценных видов рыб Волго-Каспийского бассейна и их изменение в зависимости от условий криоконсервации

• Автор: Акимочкина, Татьяна Ивановна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Астрахань
• Количество страниц: 153 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ:
ВВЕДЕНИЕ..
ГЛАВА I. РЕТРОСПЕКТИВНЫЙ АНАЛИЗ НАУЧНОЙ ИНФОРМАЦИИ ПО ПРОБЛЕМЕ КРИОКОНСЕРВАЦИИ РЕПРОДУКТИВНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ
1.1. Проблема сохранения генофонда исчезающих диких животных и растений и пути ее решения

1.1.1. Способы сохранения генофонда диких и домашних животных

1.1.2. Перспективы использования сверхнизких температур для сохранения генофонда растительного и животного мира

1.2. Достижения в области криобиологии

1.2.1. Основные явления, происходящие при охлаждении воды и биологических объектов

1.2.2. Причины устойчивости и повреждаемости живых систем при криоконсервации

1.2.3. Особенности защитного действия некоторых криопротекторных веществ на биологические объекты в процессе их криоконсервации
1.2.4. Методы оценки качества половых клеток животных после хранения их в условиях низких температур
1.3. Особенности воздействия низких температур на спермии хладнокровных животных
1.3.1. Опыт криоконсервации семенной жидкости лососевых видов рыб
1.3.2. Особенности криоконсервации семенной жидкости осетровых видов рыб
1.3.3. Особенности криоконсервации спермы карповых видов рыб
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объем и структура проведенных исследований
2.2. Методы патофизиологического анализа качества половых клеток до и после замораживания при низкой и сверхнизкой температуре
2.3. Способы приготовления криопротекторной искусственной среды для замораживания семенной жидкости рыб
2.4. Способы дефростации и повышения подвижности спермиев рыб после низкотемпературного хранения семенной жидкости
2.5. Метод осеменения икры дефростированной семенной жидкостью
2.6. Статистические методы исследования
ГЛАВА III. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СПЕРМИЕВ РЫБ ДО И ПОСЛЕ КРИОКОНСЕРВАЦИИ
3.1. Цитологические и функциональные особенности спермиев ценных видов рыб Волго-Каспийского бассейна
3.2. Зависимость криоустойчивости клеток от состава криопротекторной среды
3.2.1. Морфофункциональная характеристика дефростированных спермиев осетровых видов рыб
3.2.2. Изменение качества спермиев карповых видов рыб после дефростации семенной жидкости
3.2.3. Криоустойчивость спермиев белорыбицы в зависимости от состава криопротекторной среды
3.2.4. Качественная характеристика дефростированных спермиев окуня
3.3. Зависимость криоустойчивости клеток от скорости замораживания и условий хранения криоконсервированной семенной жидкости
3.4. Оплодотворяющая способность дефростированных спермиев разных видов рыб
3.4.1. Оплодотворяющая способность спермиев севрюги после дефростации
3.4.2. Результаты оплодотворения икры семенной жидкостью окуня, после их предварительного криоконсервирования
ГЛАВА IV. СПОСОБЫ СТИМУЛЯЦИИ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМИЕВ ПОСЛЕ ДЕФРОСТАЦИИ СЕМЕННОЙ ЖИДКОСТИ
4.1. Влияние температурного режима размораживания семенной жидкости на подвижность спермиев
4.2. Влияние компонентов различной природы как возможных стимуляторов подвижности спермиев
ГЛАВА V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
ПРИЛОЖЕНИЕ I.

Saacke R.G., 1970, 1972). Ойвадис с соавторами (Ойвадис Р.Н., 1985; Ойвадис Р.Н. с соавт., 1984; Соколовская И.И. с соавт., 1981) предложила рассматривать объект в отраженном свете, проходящем через темнопольный конденсор, так называемый «акроскопический тест». Оба эти способа дают сходные результаты: ошибка в пределах 6%. Корреляция количества интактных акросом с оплодотворяющей способностью спермы достигала 60% (Linford E. et al., 1976; Saacke R.G., 1972). В настоящее время эти методы используются для определения породных и видовых различий в качестве семени (Lunstra D. et al., 1982; Menkveld R. et al., 1984), для определения качества замороженной и замороженно-высушенной спермы (Ойвадис Р.H., 1980; Chandler J.E. et al., 1984; Jeyendram R.S. et al., 1981; Larson E.V. et al., 1976). Для повышения точности анализа рекомендовано использование глютарового альдегида и буфера на основе какодилата натрия (Johnson L. et al., 1976).
При изучении акросом все шире используется растровая (Ойвадис Р.Н., 1985; Linford E. et al., 1976; Wolf D. P. et al., 1976) и сканирующая электронная микроскопия (Ойвадис Р.Н., 1985, Lacy D. et al., 1974; Liakatas J. et al., 1982), а с недавнего времени и непрямой иммунофлуоресцентный анализ (Wolf D. Р. et al., 1976).
Содержание мертвых и аномальных спермиев может определяться визуально на сырых мазках и в счетных камерах (Милованов В,К., 1962; Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, 1983). Однако значительно более эффективным является использование обычных и флуоресцентных красителей.
В. Морозов еще в 1938 г. (цит. по Милованов В.К., 1962) показал, что живые спермин не прокрашиваются эозином. В настоящее время используются различные нефлуоресцентные красители: эозин, азур-эозин, нигрозин-эозин (Linford E. et al., 1976; Mahadevan М. М. et al., 1984; Macler A., 1979; Wong W. T. ct al., 1985), трипановый синий (Foster M. et al., 1983; Kusunoki H. et al., 1984), фуксин, генциановый фиолетовый, карболовый Циля, метиленовый Мерфолера. Имеются подробные прописи окрашивания образцов (Милованов В.К., 1962;