Морфологическая характеристика репаративной регенерации фетальной печени крыс

• Автор: Ельчанинов, Андрей Владимирович
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : 15 ил.

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Регенерация и возраст

1.2. Регенерация органов млекопитающих в пренатальном периоде

1.3 Развитие печени крысы в эмбриональный и ранний постнатальный периоды

1.4. Восстановление массы печени после частичной гепатэктомии как модель регенерации паренхиматозных органов млекопитающих

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Морфологические особенности нормальной и поврежденной фетальной печени

3.2. Доказательства воспроизводимости

3.3 Восстановление массы печени

3.4. Клеточный состав печени после гепатэктомии в пренатальном периоде
3.5. Митотический индекс гепатоцитов вне зоны повреждения в пре- и постнатальном периодах после резекции печени плодов крыс
3.6. Суточная динамика митотической активности гепатоцитов вне зоны повреждения в печени плодов крыс после резекции
3.7. Оценка стабильности времени митоза гепатоцитов вне перираневой зоны после резекции печени плодов крыс
3.8. Иммуногистохимическое исследование пролиферации гепатоцитов вне зоны повреждения
3.9. Характеристика пролиферации гепатоцитов в перираневой области
3.10. Площадь гепатоцитов и их ядер в пре- и постнатальном периодах после резекции печени плодов крыс
4. ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
р - достигнутый уровень достоверности
и - число животных в группе
ВМР - костный морфогенетический белок
РвР - фактор роста фибробластов
НОБ- фактор роста гепатоцитов
ЕвР - эпидермальный фактор роста
ТОР-а - трансформирующий фактор роста-альфа
ТвР-В - трансформирующий фактор роста-бета
ММРй - матриксные металлопротеиназы
ТІМРв - тканевые ингибиторы металлопротеиназ
РСКА - ядерный антиген пролиферирующих клеток
ПМР-а - фактор некроза опухолей-альфа
ПД - печеночный дивертикул
ДПК - двенадцатиперстная кишка
ПОЛ - пероксидное окисление липидов
МИ - митотический индекс
ИнКі67 - индекс КІ
Я - ядро
Г - гепатоцит
ЯЦО - ядерно-цитоплазматическое отношение
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность
Репаративная регенерация печени млекопитающих в разные периоды постнатальной жизни подробно изучена [Сидорова В.Ф., 1976]. В частности, показано, что даже у новорожденных млекопитающих печень после резекции хорошо регенерирует. При этом масса органа восстанавливается за счет размножения и гипертрофии гепатоцитов, а отрастания значительного количества паренхимы от раневой поверхности не происходит, что характерно для регенерационной гипертрофии [Сидорова В.Ф., Рябинина
З.А., Лейкина Е.М., 1966; Michalopoulos G.K., DeFrances М.С., 1997]. Следовательно, способность печени к регенерации формируется во время органогенеза в пренатальном периоде. Однако сведения о восстановительном росте печени плодов млекопитающих отсутствуют.
С самого начала изучения феномена регенерации многие исследователи отмечали некоторое сходство между этим процессом и эмбриональным развитием органов. Особенно это заметно при развитии и регенерации конечности амфибий [Лиознер Л.Д., 1982]. Сходные черты между эмбриональным развитием; и регенерацией можно обнаружить и при восстановлении паренхиматозных органов. Например, после удаления части печени у взрослых млекопитающих гепатоциты начинают активно размножаться и синтезировать а-фетопротеин — маркер гепатобластов, чего не отмечается в печени взрослых особей в норме [Michalopoulos G.K., DeFrances M-С., 1997]. Однако между эмбриональным развитием и регенерацией органов есть коренные различия. Например, после повреждения часто регенерирует орган значительно отличающийся от удаленного, так при регенерации печени в постнатальном периоде удаленные доли не формируются вновь [Сидорова В.Ф., Рябинина 3.À., Лейкина Е.М., 1966].

гепатоцитами и действует аутокринно [Michalopoulos G.K., Khan Z., 2005, Michalopoulos G.K., 2007, 2010].
Конечным итогом действия всех выше перечисленных факторов роста является активация экспрессии так называемых ранних генов [Fausto N., 1999, 2000]. Помимо прочих, в состав семейства ранних генов входит множество протоонкогенов, активность которых побуждает клетку к делению [Zhao R., Duncan S.A., 2005].
После того как в процессе репаративной регенерации масса печени достигает исходных значений, восстановительный процесс завершается. Фактором, который прекращает репаративные процессы в печени, является TGF-ß [Michalopoulos G.K., Khan Z. 2005, Michalopoulos G.K., 2007; Fausto N. et al, 1995; Fausto N. 1999, 2000]. Данный фактор синтезируется клетками Ито и является составным компонентом матрикса печени. Известно, что TGF-ß является ингибитором пролиферации в культуре гепатоцитов. Введение TGF-ß животным после частичной гепатэктомии вызывает подавление восстановительных процессов в печени. Концентрация TGF-ß в плазме крови постепенно нарастает после частичной гепатэктомии, достигает стабильно высокой концентрации через 48-72 часа. Также известно, что норэпинефрин снижает чувствительность гепатоцитов к TGF-ß, что делает возможным их пролиферацию несмотря на высокую концентрацию ингибирующего фактора. Однако по-прежнему до конца не ясны точные механизмы влияния TGF-ß на гепатоцит! [Michalopoulos G.K., Khan Z., 2005, Michalopoulos G.K., 2007, 2010; Fausto N.et al, 1995, 1999; 2000].
После частичной гепатэктомии в постнатальном периоде в печени млекопитающих наряду с активацией пролиферации отмечается таюке повышение уровня апоптоза гепатоцитов [Chen S. et al., 2010]. Одной из причин гибели клеток может быть оксидантныйг стресс, признаки которого обнаруживается в печени после резекции [Sigal S.H. et al., 1999]. Накопление